馬 馳,林居純,陳雅莉,覃春紅,張輝建

(四川農(nóng)業(yè)大學(xué)藥學(xué)系四川農(nóng)業(yè)大學(xué)國家級動物類實驗教學(xué)示范中心,四川雅安625014)

金黃色葡萄球菌(SA)是一種常見的病原菌,在臨床上主要引起動物機(jī)體發(fā)生感染及化膿性炎癥,嚴(yán)重時引起敗血癥或膿毒血癥而導(dǎo)致死亡,臨床上主要使用抗菌藥物控制該病的發(fā)生。隨著抗菌藥物的廣泛使用,有關(guān)動物源性金黃色葡萄球菌耐藥已有報道[1-2]。本次研究從四川省不同地區(qū)養(yǎng)禽場采集樣本,分離鑒定出金黃色葡萄球菌,進(jìn)行耐藥性監(jiān)測,為臨床合理用藥提供指導(dǎo),為食品動物源性細(xì)菌耐藥監(jiān)測網(wǎng)提供數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 藥品及試劑 青霉素鉀等24種抗菌藥物由中國農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)藥理實驗室提供;Baird-Parker瓊脂、亞碲酸鉀卵黃增菌液、MH肉湯及葡萄球菌科細(xì)菌生化編碼微量鑒定管(10×16支/盒)購于杭州天和微生物試劑有限公司。

1.2 金黃色葡萄球菌臨床分離菌及質(zhì)控菌2007～2008年于四川省不同地區(qū)的養(yǎng)殖場采集禽源肝組織以及關(guān)節(jié)液,按照文獻(xiàn)[3]進(jìn)行分離純化及鑒定,共得到183株金黃色葡萄球菌,其中雞源132株,鴨源 51株;質(zhì)控菌金黃色葡萄球菌ATCC25923,由中國農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)藥理實驗室提供。

1.3 藥敏試驗及結(jié)果判斷 采用微量肉湯倍比稀從圖1可見,多重耐藥菌株主要分布在3～8耐間,在各種耐藥類型中,以 7耐菌株所占比例最大(15.30%);而42株MRSA菌株均呈現(xiàn)多重耐藥,釋法,試驗結(jié)果按CLSI標(biāo)準(zhǔn)判斷[4]。

2 結(jié)果

根據(jù)CLSI標(biāo)準(zhǔn)對耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)的判定,在183株SA 中,共有 42株 MRSA,其檢出率為22.95%。所檢測的183株SA以及42株MRSA對24種抗菌藥物的耐藥性見表1。

由表1顯示,183株SA對24種抗菌藥物均呈現(xiàn)不同程度的耐藥,其中對常用的青霉素類、磺胺類藥物以及甲氧芐啶產(chǎn)生了嚴(yán)重的耐藥性,耐藥率可高達(dá)81%以上;對先鋒唑啉、頭孢噻呋、阿米卡星、卡那霉素、氯霉素相對較為敏感,耐藥率在8%～19%之間;對林可霉素的耐藥率偏低但其中介率較高,表示其耐藥率有上升的可能性;其余抗菌藥物耐藥率在20%～50%之間。

42株MRSA耐藥情況更為嚴(yán)重,對青霉素、氨芐西林、諾氟沙星、二氟沙星以及甲氧芐啶的耐藥率高達(dá)90%以上,對苯唑西林、磺胺異噁唑和復(fù)方新諾明耐藥率已達(dá)100%;相對于阿莫西林/克拉維酸(41%)、氯霉素(29%)較為敏感外,對其余抗菌藥物都表現(xiàn)中等程度以上耐藥,耐藥率在 52%～89%之間。

SA對24種抗菌藥物的多重耐藥性在183株SA中,94.00%以上的菌株呈現(xiàn)多重耐藥(圖1)。耐藥譜型集中分布在10～24耐間,其中以18耐和22耐菌株所占比例最大(16.67%)。183株SA對24種抗菌藥物表現(xiàn)出119種耐藥譜型,無明顯的優(yōu)勢耐藥譜,但 以 PEN/AMP/SIA/TMP/SXT,以 及PEN/AMP/AMC/CRO/SIA/TMP/SXT耐藥譜型較為常見。

3 討論

本次耐藥性監(jiān)測顯示,183株SA對獸醫(yī)臨床常用的青霉素、氨芐西林、磺胺類藥物及甲氧芐啶均已產(chǎn)生較嚴(yán)重的耐藥性(耐藥率大于81%),以上藥物是治療SA感染首選藥物而長期使用,從而導(dǎo)致高耐藥率的產(chǎn)生;對四環(huán)素類藥物、氟喹諾酮類藥物(除二氟沙星以外)和氯霉素呈較低的耐藥率(耐藥率范圍8%～37%),與相關(guān)報道一致[5-6],但對阿奇霉素、紅霉素的耐藥率顯著低于其報道,這可能與樣本來源不同,以及各地用藥習(xí)慣不同有關(guān)。本次研究發(fā)現(xiàn),SA菌株對頭孢曲松耐藥率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于頭孢唑啉與頭孢噻呋,是由于獸醫(yī)臨床常違禁使用頭孢曲松控制感染造成;對阿莫西林/克拉維酸的耐藥率遠(yuǎn)低于青霉素與氨芐西林,表明SA菌株易通過產(chǎn)生β-內(nèi)酰胺酶導(dǎo)致其對青霉素類耐藥,提示在臨床上控制耐藥SA感染或是SA嚴(yán)重性感染時,宜采用β-內(nèi)酰胺類藥物與β-內(nèi)酰胺酶抑制劑配伍應(yīng)用;對先鋒唑啉、頭孢噻呋、阿米卡星、卡那霉素、氯霉素保持較高的敏感性,與獸醫(yī)臨床不習(xí)慣使用這些藥物或禁止使用氯霉素有關(guān),故SA對這些藥物較為敏感。

有報道顯示,MRSA分離菌株對抗菌藥物的耐藥性比非耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MSSA)菌株嚴(yán)重,而且MRSA菌株以多重耐藥為主[7]。本次研究中MRSA檢出率為22.95%,對22種抗菌藥物表現(xiàn)出嚴(yán)重耐藥(耐藥率大于50%),42株MRSA均呈多重耐藥,耐藥類型主要在10～24耐間,這說明MRSA菌株也存在于動物群中,對其引起的感染需引起足夠的重視。

[1] 杜銳,韓文瑜,雷連成.動物源性金黃色葡萄球菌耐藥性的檢測[J].中國獸醫(yī)科技,2005,35(3)：230-232.

[2] 趙麗青,王樹峰,雷質(zhì)文,等.動物源性大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的分離鑒定及耐藥性分析[J].中國動物檢疫,2008,25(8)：43-44.

[3] GB/T 4789.10-2003,食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗[S].

[4] John P H,Renate R,Takashi A,et al.M49-P Methods for broth dilution susceptibility testing of baceterial isolated from aquatic animals;p roposed guideline[S].Pennsylvania：Clinical and Laboratory Standards Institute,2005.

[5] 程福亮,韓文瑜,雷連成,等.33株臨床分離菌的藥敏試驗分析[J].動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2007,28(2)：15-18.

[6] 王冰,劉明春,吳聰明,等.呼和浩特地區(qū)奶牛乳房炎金黃色葡萄球菌的耐藥性調(diào)查[J].中國獸醫(yī)雜志,2007,43(3)：29-30.

[7] 周薇薇,羅燕萍,張秀菊.516株金黃色葡萄球菌對 9種抗生素的耐藥性分析[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2005,15(9)：1054-1055.