曾春萍
(張家口市藥品檢驗(yàn)所化學(xué)組,張家口 075000)
桃葉鴉蔥是菊科植物桃葉鴉蔥(Scorzonera sinensis Lipsch)的干燥全草。主要分布在河北、內(nèi)蒙等地。民間使用療效確切,具清熱解毒、解毒療瘡之功效,且有飼用價(jià)值。筆者研究了桃葉鴉蔥對(duì)實(shí)驗(yàn)性炎癥的影響,為臨床用藥提供了一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
1.1 儀器 ZW358十萬(wàn)分之一電子天平(日本島津公司);UV-2100紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)(北京萊伯泰科儀器有限公司);3k30超速冷凍離心機(jī)(美國(guó)Sigma公司)。
1.2 藥物 桃葉鴉蔥,采自河北省沽源縣,經(jīng)河北北方學(xué)院中藥鑒定室趙恒成教授鑒定為正品。桃葉鴉蔥浸膏的制備:桃葉鴉蔥2.5 kg,用75%乙醇回流提取制備,生藥含量為1.0 kg/L。消炎痛(山西三晉藥業(yè)有限公司,批號(hào)067243)。伊文思藍(lán)(成都貝斯特試劑有限公司,批號(hào)65535)。冰醋酸(張家口化學(xué)試劑廠,批號(hào)051125)。
1.3 動(dòng)物 昆明種小鼠,雌雄各半,體質(zhì)量18~22 g;SD大鼠,雄性,體質(zhì)量180~220 g,均購(gòu)于河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。
采用SPSS 17.0 for Windows軟件處理。數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,采用單因素方差分析,P<0.05表示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
3.1 對(duì)醋酸誘發(fā)小鼠毛細(xì)血管通透性增高的作用[1]取小鼠50只,隨機(jī)分為5組。實(shí)驗(yàn)前禁食不禁水15 h,高、中、低劑量組分別按 0.04,0.02,0.01 mL/g體質(zhì)量灌胃,對(duì)照組給生理鹽水,陽(yáng)性組給消炎痛(0.01 mg/g)。給藥30 min后,小鼠尾靜脈注射2%伊文思藍(lán)生理鹽水溶液0.01 mL/g,30 min后,腹部注射0.3%醋酸溶液0.02 mL/g,20 min后,脫頸處死小鼠,剪開(kāi)腹部皮膚,用10 mL生理鹽水反復(fù)沖洗腹腔,收集洗滌液,以吸管吸出洗滌液5mL,3000 r/min離心15 min,取上清液用UV-2100紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)在590 nm處比色,測(cè)定吸光度,與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較,得到染料滲出量,比較組間差異。
3.2 對(duì)棉球所致肉芽組織增生的作用[2]取大鼠40只,分組及劑量同3.1,實(shí)驗(yàn)前禁食不禁水15 h,乙醚淺麻醉,無(wú)菌條件下大鼠背部剃毛,75%乙醇及0.2%利凡諾消毒后,切開(kāi)皮膚,將已滅菌干燥的20 mg棉球植入背部皮膚下。術(shù)后當(dāng)日給藥,1次/d,連續(xù)7 d,第8天處死大鼠,剝離肉芽組織,濾紙吸干,烘箱干燥24 h后稱質(zhì)量,比較各肉芽組織的質(zhì)量,計(jì)算增加百分率及抑制率,比較組間差異。
3.3 對(duì)蛋清所致大鼠足腫脹的作用[2]取大鼠40只,分組及劑量同3.1,實(shí)驗(yàn)前禁食不禁水15 h,測(cè)定每鼠右后足體積為基數(shù),給藥30 min后,以新配制的10%蛋清致大鼠足趾腫脹,分別于 0.5、1、2、3、4、5 h測(cè)大鼠右后足體積,求出腫脹增長(zhǎng)百分率[(給藥后值-給藥前值)/給藥前值],比較組間差異。
3.4 對(duì)醋酸誘發(fā)小鼠扭體反應(yīng)的影響[3]選取小鼠50只,隨機(jī)分為5組,分組及劑量同3.1,實(shí)驗(yàn)前禁食不禁水15 h,腹部注射給藥6 min后,腹部注射0.5%醋酸0.01 mL/g,0.5 h后記錄25 min內(nèi)小鼠扭體次數(shù),與模型組相比較,求出減少百分率,比較組間差異。
4.1 各組小鼠給藥后對(duì)醋酸誘發(fā)小鼠毛細(xì)血管通透性增高的作用的比較 結(jié)果桃葉鴉蔥各劑量組與模型組比較,均能顯著抑制醋酸誘發(fā)小鼠毛細(xì)血管通透性增高(P<0.01),且高劑量組的作用與0.01 mg/g的消炎痛相當(dāng),結(jié)果見(jiàn)表1。
表1 桃葉鴉蔥浸膏對(duì)小鼠毛細(xì)血管通透性的影響Tab.1 Effects on Capillary permeability of the mice
4.2 各組大鼠給藥后對(duì)棉球所致肉芽組織增生的作用的比較 連續(xù)7 d腹部注射桃葉鴉蔥各劑量組與模型組相比較,均對(duì)棉球所致肉芽組織增生有明顯的抑制作用(P<0.01),且高劑量組的作用與0.1 mg/g的消炎痛相當(dāng),結(jié)果見(jiàn)表2。
表2 桃葉鴉蔥浸膏對(duì)棉球肉芽組織增生的影響Tab.2 Effects on tampon granuloma of the rats %
4.3 各組大鼠給藥后對(duì)蛋清所致大鼠足腫脹的作用的比較 結(jié)果桃葉鴉蔥各劑量組與模型組比較,均有顯著抑制蛋清所致大鼠足腫脹的作用,且高劑量組的作用與0.01 mg/g的消炎痛相當(dāng),結(jié)果見(jiàn)表3。
4.4 各組小鼠給藥后對(duì)醋酸誘發(fā)小鼠扭體反應(yīng)的比較 結(jié)果桃葉鴉蔥各劑量組與模型組比較,對(duì)醋酸誘發(fā)的小鼠扭體反應(yīng)有一定的抑制作用,但其作用強(qiáng)度不及消炎痛,結(jié)果見(jiàn)表4。
炎癥是具有血管系統(tǒng)的活體組織對(duì)局部損傷的反應(yīng)。腫脹是炎癥早期的重要指標(biāo),在炎癥晚期和慢性炎癥期,由于巨噬細(xì)胞和纖維母細(xì)胞等增生,形成肉芽組織。本實(shí)驗(yàn)用醋酸、棉球和蛋清作為致炎因子,觀察了桃葉鴉蔥乙醇提取物對(duì)實(shí)驗(yàn)性滲出、腫脹、增生和疼痛的影響。
表3 桃葉鴉蔥浸膏對(duì)蛋清所致大鼠足腫脹的影響(±sTab.3 Effects on swelling degrees of rat’s toes(±s%
表3 桃葉鴉蔥浸膏對(duì)蛋清所致大鼠足腫脹的影響(±sTab.3 Effects on swelling degrees of rat’s toes(±s%
注:與模型組比較,△P<0.05,△△P<0.01。
組別 n 腫脹增長(zhǎng)百分率劑量(mg/10 g)-1002004000.1模型組桃葉鴉蔥浸膏桃葉鴉蔥浸膏桃葉鴉蔥浸膏消炎痛888881 h 32.9±7.129.3±4.425.1±6.820.6±2.5△18.5±3.7△△2 h 43.5±7.341.2±6.336.5±4.2△24.5±6.0△△22.6±4.3△△3 h 57.9±8.450.1±6.4△43.7±3.5△△37.2±3.8△△36.0±2.1△△4 h 78.5±5.864.5±6.9△51.2±4.0△△43.2±4.2△△40.1±5.3△△5 h 95.8±5.773.5±6.1△△63.1±3.7△△54.1±4.6△△55.2±4.2△△
表4 桃葉鴉蔥浸膏對(duì)醋酸誘發(fā)小鼠扭體反應(yīng)的影響(±sTab.4 Effects on the twist reaction of the mice(±s
表4 桃葉鴉蔥浸膏對(duì)醋酸誘發(fā)小鼠扭體反應(yīng)的影響(±sTab.4 Effects on the twist reaction of the mice(±s
注:與模型組比較,△P<0.01。
組別模型組桃葉鴉蔥浸膏桃葉鴉蔥浸膏桃葉鴉蔥浸膏消炎痛n劑量(mg/10 g)-1002004000.11010101010扭體次數(shù)(次)32.1±4.527.8±2.825.0±3.4△21.0±2.6△18.5±1.5△抑制率(%)-13.422.131.542.4
桃葉鴉蔥75%乙醇提取物低、中、高劑量組及消炎痛組與空白組比較,對(duì)醋酸誘發(fā)小鼠毛細(xì)血管通透性增高、棉球所致肉芽組織增生、蛋清所致大鼠足腫脹的抑制作用均有顯著性差異。醋酸所致小鼠扭體試驗(yàn)的中、高劑量組和消炎痛組同空白對(duì)照組相比較具有顯著性差異,低劑量組對(duì)腫脹也有較弱的抑制作用。顯示其對(duì)化學(xué)因素引起的疼痛和炎癥有明顯的對(duì)抗作用。
急性炎癥是“熱毒”證候的一個(gè)重要表現(xiàn),《滇南本草》謂清熱解毒藥:“清熱,解諸瘡,癰疽發(fā)背,丹流瘰疬。”桃葉鴉蔥抗炎鎮(zhèn)痛作用當(dāng)與其清熱解毒功效有關(guān)。
本實(shí)驗(yàn)證明其具有良好的抗炎、鎮(zhèn)痛作用,為今后桃葉鴉蔥的開(kāi)發(fā)、應(yīng)用提供了理論依據(jù)。目前,桃葉鴉蔥抗炎鎮(zhèn)痛作用的物質(zhì)基礎(chǔ)及作用原理還不甚清楚,在以后的研究中將進(jìn)一步對(duì)此進(jìn)行研究。
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