尹紀業(yè)，董延生，袁本利，瞿文生，余壽忠，原 野，王和枚，丁日高

（軍事醫(yī)學科學院 毒物藥物研究所國家北京藥物安全評價中心，北京 100850）

動物自發(fā)性病變包括非增殖性和增殖性病變， 安評工作中需要首先排除自發(fā)性病變，因此對自發(fā)

性病變的認識是安評工作的基礎(chǔ)。動物自發(fā)性疾病的研究受到國內(nèi)外學者的普遍重視。F344大鼠非增殖性病變發(fā)病率高，種類多，目前對該品系自發(fā)性疾病仍缺乏系統(tǒng)的認識。本課題受到國家科技部重大新藥專項資助，利用我中心屏障環(huán)境單純飼養(yǎng)F344大鼠336只，觀察2年內(nèi)非增殖性病變的種類和發(fā)生率等相關(guān)病理學背景資料，為藥物安全性評價奠定基礎(chǔ)。

1 材料和方法

1.1 動物 SPF級F344大鼠336只，雌雄各半，8周齡，購于北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司［SCXK（京）2006-0009］。

1.2 實驗分組 按動物剖殺時間分為6、12、18和24個月組，各組動物數(shù)分別為32、64、64、176只。

1.3 飼養(yǎng)條件 在本中心屏障環(huán)境中，動物自然生存狀態(tài)，不加任何影響和條件限制，動物設(shè)施使用許可證號SYXK（軍）2007-008。

1.4 病理學檢查 每組動物腹腔麻醉（戊巴比妥鈉，50 mg/kg）后放血處死，處死的動物解剖檢查并選取各臟器標本。檢查內(nèi)容包括動物體質(zhì)、發(fā)育和營養(yǎng)狀況等，臟器的位置、大小、色澤、有無粘連，以及臟器的質(zhì)地、有無積液等。

1.5 臟器系數(shù) 取心、肺、肝、脾、腎、胸腺、腎上腺、睪丸或卵巢、附睪或子宮和腦等器官稱重其重量并計算臟器系數(shù)。

1.6 組織病理學 試驗結(jié)束后，取心、肺、肝、脾、腎、胃、十二指腸、空腸、回腸、結(jié)腸、胰腺、頜下腺、食管、氣管、甲狀腺、甲狀旁腺、胸腺、腎上腺、腸系膜淋巴結(jié)、睪丸、附睪、前列腺、卵巢、子宮、乳腺、皮膚、膀胱、腦（大腦皮質(zhì)、腦干和小腦皮質(zhì)）、垂體、頸髓、視神經(jīng)、主動脈（弓）、胸骨骨髓和肌肉及坐骨神經(jīng)等組織10％中性福爾馬林固定。組織經(jīng)充分固定后，逐級乙醇脫水，二甲苯透明，石蠟包埋，制備4μm切片，HE染色，光學顯微鏡檢查。

1.7 診斷依據(jù) 將自發(fā)性病變分為非增殖性病變和增殖性病變，本文重點討論非增殖性病變，診斷術(shù)語和標準參見 Guides for Toxicologic Pathology.STP/ARP/AFIP，Washington，DC。

2 結(jié)果

2.1 大體檢查

大體檢查結(jié)果如表1所示，12個月開始出現(xiàn)肉眼可見的病理變化，包括垂體淤血腫大，子宮的腫大等，至18個月、24個月肝臟、腎臟外觀呈細顆粒狀改變可能與自發(fā)性炎癥等病變有關(guān)，脾臟多因動物患白血病而腫大，睪丸因間質(zhì)細胞增生或間質(zhì)細胞瘤出現(xiàn)白色斑點或絮狀外觀。

表1 各組大體檢查出現(xiàn)病變的例數(shù)（n/N） Tab.1 The number of lesions in different group at gross appearance（n/N）

2.2 鏡下檢查結(jié)果

如表2所示，鏡下可見病變隨月齡增加病變種

類和發(fā)病率明顯增加。6、12、18、24個月病變種類

分別為5、6、9、14，其中24個月組9種病變發(fā)病率

均在50％以上。如心臟乳頭肌纖維化是鼠進行性

心肌病的主要病變，各組發(fā)病率均在，對每種病變

其范圍和程度都較高，但范圍和程度上6個月組以輕度為主，局限在心內(nèi)膜淺層，范圍小，12個月組加重，至24個月范圍大，達中重度以上，且多伴隨炎細胞浸潤心肌細胞變性壞死等改變。大鼠腎臟病變種類多樣，包括腎小管擴張，管型，腎小管萎縮，鈣鹽沉積等，在6個月組可見少量動物發(fā)病，24個月組上述改變加重，且伴有間質(zhì)炎細胞浸潤等慢性腎病的改變。

表2 各組鏡下檢查非增殖性病變出現(xiàn)的例數(shù)和發(fā)病率（n/N）Tab.2 The number of non-proliferative lesions in different group（n/N）

3 討論

3.1 F344大鼠出現(xiàn)的主要非增殖性病變包括：鼠進行性心肌病、支氣管相關(guān)淋巴組織、自發(fā)性腎小管病變、胸腺萎縮和性腺退變等，主要特點及診斷要點簡述如下。

3.1.1 心肌病理改變：

STP定義為鼠進行性心肌?。╩urine progressive cardiomyopathy），組織學觀察可見心肌纖維化，常伴有炎細胞浸潤，心肌纖維變性壞死，形成肉眼可見的白色斑點，文獻報道24個月大鼠發(fā)病率達100％［1］。

3.1.2 肺病理改變：

6個月至24個月動物均可見細支氣管旁慢性炎癥灶，發(fā)病率分別為 78.1％、62.5％、87.5％、74.7％。為肺間質(zhì)血管旁及細支氣管旁淋巴細胞等單核細胞聚集增生，又稱為支氣管相關(guān)淋巴組織（bronchus-associted lymphoid tissue，BALT）［2，3］。

3.1.3 腎臟病理改變：

自發(fā)性病變以腎小管病變?yōu)橹?，包括腎小管擴張和蛋白管型、腎小管萎縮、色素沉著和鈣鹽沉積等，在6個月組部分動物即可見上述改變，發(fā)病率隨年齡增長而增加，可能與營養(yǎng)等多種因素有關(guān)［4］。

3.1.4 胸腺退行性改變：

12個月時可見胸腺的萎縮，胸腺淋巴細胞數(shù)量減少，至24個月時部分萎縮的胸腺會出現(xiàn)“荒蕪”圖像。3.1.5 生殖器官退行性改變：

24個月雌性大鼠的可見卵巢退化表現(xiàn)為卵母細胞變性壞死，成熟卵泡的減少和消失，子宮擴張或萎縮，內(nèi)膜增生等改變均較常見。24個月雄性大鼠睪丸曲細精管萎縮，生精細胞減少，間質(zhì)細胞增生，及前列腺萎縮、上皮增生，炎癥等改變亦較常見。3.2 在本中心屏障環(huán)境及GLP條件下，F(xiàn)344大鼠自發(fā)性疾病種類和發(fā)病率文獻數(shù)據(jù)相差不大，隨動物生存期的延長，動物增殖性和非增殖性疾病發(fā)病率均有所增加。12個月以內(nèi)，大鼠自發(fā)性病變種類少，程度較輕，12個月以上F344大鼠自發(fā)性疾病種類多病變程度重，24個月時病變種類10種以上，發(fā)病率60％以上的就有4種，另外，24個月腫瘤性病變尤為突出，并成為動物死亡的主要原因。

4 結(jié)論

在本中心現(xiàn)有條件下，隨動物生存期的延長，F(xiàn)344大鼠自發(fā)性非增殖性疾病病變程度和發(fā)病率均有所增加，在范圍和程度上有逐漸加重的趨勢。本實驗豐富了F344大鼠自發(fā)性病變的背景資料，為藥物安全性評價提供基礎(chǔ)。作為藥物毒性病理診斷的重要內(nèi)容，非增殖性疾病的認識和研究，將對藥物毒性病理學發(fā)展起到重要的作用。

［1］任進，榎本真，今井清主編，圖解毒性病理學［M］.云南出版集團公司 .2006年10月第1版，P35.

［2］Pabst R，Gehrke I.Is the bronchus-associated lymphoid tissue （BALT）an integral structure of the lung in normal mammals，including humans?［J］.Am J Respir Cell Mol Biol.1990；3 （2）：131-5.

［3］Renne RA，Dungworth DL，Keenan CM，et al.Non-proliferative lesions of the respiratory tract in rats.R-1.In：Guides for Toxicologic Pathology.STP/ARP/AFIP.Washington，DC.

［4］Chandra M，F(xiàn)rith CH.Non-neoplastic renal lesions in Sprague-Daw ley and Fischer-344 rats［J］.Exp Toxicol Pathol.1994；45 （7）：439-47.