謝輝晉綜述,杜遠立審校

(1.三峽大學人民醫(yī)院,湖北宜昌 443002;2.湖北省宜昌市第一人民醫(yī)院 443000)

骨關節(jié)炎相關細胞因子作用機制研究進展

謝輝晉1綜述,杜遠立2審校

(1.三峽大學人民醫(yī)院,湖北宜昌 443002;2.湖北省宜昌市第一人民醫(yī)院 443000)

骨關節(jié)炎;受體,細胞因子;作用機制

骨關節(jié)炎(osteoarthritis,OA)是一種常見的慢性關節(jié)疾病,其主要病變是骨關節(jié)軟骨的退行性變和繼發(fā)骨質增生,涉及的組織主要包括滑膜組織、軟骨組織及軟骨下骨,具體表現為關節(jié)軟骨破壞、關節(jié)表面形成骨贅、滑膜細胞反應性增生、滑膜炎和關節(jié)間隙變窄等[1-2]。骨關節(jié)炎的發(fā)病原因迄今為止尚不完全清楚,近年來越來越多的研究發(fā)現細胞因子在骨關節(jié)炎的發(fā)病中起重要作用,根據細胞來源和生物學特性可將其分為分解性細胞因子和合成性細胞因子兩類。正常情況下這兩類因子共同作用,可保持分解代謝與合成代謝的相對平衡,維護關節(jié)的正常結構和功能。但骨關節(jié)炎相關細胞因子種類較多,作用機制復雜,且交互影響,是目前骨關節(jié)炎研究的熱點及難點?，F將近年來國內外學者對骨關節(jié)炎的病理基礎及細胞因子的研究新進展綜述如下。

1 分解性細胞因子

1.1 白細胞介素-1(interleukin-1,IL-1) IL-1是一種激素樣多肽,可分為 IL-1α和IL-1β兩種亞型,IL-1β在骨關節(jié)炎發(fā)生機制中起主要作用,是已經證實的所有致病細胞因子中首要相關因子之一。IL-1對骨關節(jié)炎的作用主要通過以下幾個方面實現。

1.1.1 對基質金屬蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)的影響 MMPs是降解細胞外基質的主要酶系,能降解幾乎所有的軟骨細胞外基質,使關節(jié)軟骨腫脹,最終破壞關節(jié)正常結構。MMPs的組織抑制因子(tissue inhibitor of metalloproteinase,TIMPs)是MMPs重要的特異性調節(jié)因子,它能抑制MMPs的活性,發(fā)揮保護軟骨基質的作用。正常生理條件下,軟骨基質的降解與合成之間保持動態(tài)平衡。在骨關節(jié)炎患者關節(jié)中,IL-1通過刺激成纖維細胞、中性粒細胞、巨噬細胞、關節(jié)軟骨細胞、滑膜細胞,使患者關節(jié)各組織中MM Ps高表達,與此同時TIM Ps表達下降,MM Ps/TIMPs正常比值失衡,導致骨關節(jié)軟骨中細胞外基質遭到破壞。骨關節(jié)炎軟骨中存在一種可使MMPs活性增加的物質,該物質叫胞漿素原激活物(plasminogenal activator,PA),而PA又受胞漿素原激活物抑制物-1(plasminogenal activator inhibitor-1,PAI-1)的抑制調節(jié)[3]。IL-1可刺激 PA的分泌,并抑制 PAI-1的合成,故在骨關節(jié)炎軟骨中高表達的IL-1促進了MMPs的激活,進一步加強對軟骨的破壞作用。由于軟骨細胞外基質中90%～95%的成分是Ⅱ型膠原,MMPs中基質金屬蛋白酶-13(MMP-13)對裂解Ⅱ型膠原活性最強,所以MM P-13在骨關節(jié)炎軟骨破壞過程中的作用尤為突出[4]。

1.1.2 對IL-1受體(IL-1R)的影響 IL-1與靶細胞上的IL-1R形成激素受體復合物,通過第二信使(cAMP/GTP)將信息傳遞至細胞內,除干擾靶細胞正常生理活動外,還使靶細胞表面IL-1R數量增多約兩倍,致使骨關節(jié)炎的滑膜、軟骨細胞對IL-1具有高度敏感性。IL-1R包括IL-1RⅠ、IL-1RⅡ兩種受體,IL-1要與IL-1RⅠ結合才能產生上述作用,但是 IL-1RⅡ與IL-1具有高親和力,Silvestri等[5]研究發(fā)現骨關節(jié)炎軟骨細胞缺乏IL-1RⅡmRNA表達,故IL-1RⅡ在一定程度上可以抑制IL-1對靶細胞的作用。在IL-1家族中,還存在一種IL-1受體結合蛋白(IL-1Ra),它可以競爭性的結合IL-1R。其中,IL-1β與IL-1RⅠ的親和力最低,而IL-1Ra與IL-1RⅠ細胞表面的親和力最強,且?guī)缀醪豢赡孓D,因此IL-1Ra可抑制IL-1β產生的信號傳遞,是IL-1β有效的拮抗劑。由于細胞表面兩個IL-1R的跨膜區(qū)極易被蛋白酶降解,可釋放出可溶性IL-1受體(sIL-1R),sIL-1R可與IL-1結合,使IL-1RⅠ結合到的IL-1減少,所以sIL-1R也是一種有效的拮抗劑[6]。

1.1.3 對前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)的影響PGE2是由活化磷脂酶A2(phospholipase A2,PLA2)分解膜磷脂產生花生四烯酸氨基酸,在環(huán)氧化酶(cyclooxygenase,COX)和前列腺素E合成酶(prostaglandin E synthase,PGES)作用下形成的。其主要限速酶為COX,分為結構型環(huán)氧化酶-1(cyclooxygenase-1,COX-1)和誘導型環(huán)氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2),PGE2的產生主要由COX-2調節(jié)。IL-1通過誘導COX-2的過量表達,使PGE2合成增加。PGE2通過細胞間環(huán)腺苷酸積累,直接誘導軟骨細胞凋亡,增加破骨細胞形成,引起滑膜炎癥并參與軟骨下骨重塑[7]。反之,PGE2又可進一步加強IL-1對軟骨的分解作用,使滑膜細胞與浸潤性炎性細胞反應性增強。

1.1.4 對一氧化氮(NO)的影響 NO是由L-精氨酸經一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)催化生成的。IL-1可通過誘生型一氧化氮合酶(iNOS)使NO的合成增加。NO能通過減少Ⅱ型膠原α1鏈mRNA的表達而抑制Ⅱ型膠原的合成,并且激活MMPs,促使膠原降解和PGE升高,另外NO在軟骨細胞凋亡中起重要作用,可導致軟骨細胞發(fā)生凋亡[8]。反之,NO還可促進IL-1介導軟骨降解作用,減少軟骨細胞合成IL-1Ra,影響基質生物合成。

1.1.5 對軟骨的直接影響 IL-1對關節(jié)炎軟骨的影響主要是通過作用于軟骨細胞和軟骨基質兩方面來實現的。在正常人體的關節(jié)軟骨組織中,雖然軟骨細胞所占比例較少,但卻是維持軟骨形態(tài)功能的框架,是維持軟骨基質穩(wěn)定的基礎。所以軟骨細胞功能的異常是軟骨組織破壞的開始和關鍵。由于骨關節(jié)炎的軟骨細胞表面有高水平的IL-1R,使軟骨細胞對IL-1具有高親和力,由于IL-1長時間對軟骨細胞的作用致使軟骨細胞出現所謂的“反分化”現象,即軟骨細胞合成Ⅱ型膠原減少或合成的Ⅱ型膠原的性質改變,更易被MMPs消化,同時其他類型的膠原表達增加[9]。IL-1還可促進軟骨細胞發(fā)生凋亡,在骨關節(jié)炎軟骨中,IL-1β在調控軟骨細胞凋亡方面發(fā)揮了重要作用,導致軟骨細胞出現異常的凋亡現象,并比正常軟骨細胞凋亡的發(fā)生率高。IL-1對軟骨基質的影響主要是軟骨細胞功能紊亂的結果,軟骨細胞基質缺損和軟骨的生物力學改變,使其對軟骨細胞的保護與營養(yǎng)作用減弱。同時軟骨細胞降解產生的糖蛋白、膠原和大分子物質被釋放到滑液中引起免疫應答和滑膜炎癥,促進IL-1釋放增加,刺激軟骨細胞分泌更多的MMPs,引起更大的軟骨破壞,形成惡性循環(huán),最后表現為軟骨組織的退行性變。

1.1.6 對滑膜的直接影響 在骨關節(jié)炎的滑膜細胞中,大多數都伴有不同程度的炎癥,這是多種因素產生的繼發(fā)性改變,IL-1可使單核細胞浸潤、纖維素滲出,導致關節(jié)滑膜慢性炎癥。IL-1主要由滑膜的襯里層細胞分泌,骨關節(jié)炎滑膜細胞中IL-1表達十分活躍,刺激滑膜增生,產生膠原酶及PGE2,增加溶質素分泌,促進滑膜細胞黏附因子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)的表達,使滑膜炎癥反應加重。

1.2 腫瘤壞死 因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)TNF-α是軟骨基質降解的重要介質,并且在滑膜炎癥中起重要作用。在滑膜細胞和軟骨細胞的表面存在TNF-α受體Ⅰ(TNF-RⅠ)和 TNF-α受體Ⅱ(TNF-RⅡ)兩種受體,骨關節(jié)炎時TNF-RⅠ表達明顯上調。在細胞外存在兩種可溶性的受體,即sTNF-RⅠ和sTNF-RⅡ,高濃度的sTNF-R與細胞表面TNF-α受體競爭結合 TNF-α,從而抑制 TNF-α破壞軟骨。TNF-α通過與TNF-RⅠ結合誘導COX-2,激活多型棱細胞,刺激滑膜細胞產生PGE,誘導軟骨細胞產生過氧化反應,增加骨、軟骨的破壞[10]。TNF-α和 IL-1一樣通過誘導 MM Ps產生,抑制軟骨基質合成[11]。TNF-α還具有促滑膜成纖維細胞樣細胞增值作用,能增強滑膜細胞RNA的表達功能,而使滑膜組織纖維性變及滑液中細胞因子水平異常升高,從而改變關節(jié)的力學特征和軟骨細胞的生活微環(huán)境。在骨關節(jié)炎軟骨下骨中,TNF-α通過激活破骨細胞促進骨吸收的同時,通過成骨細胞介導,抑制成骨細胞合成Ⅰ型膠原,抑制骨形成和鈣化,同時TNF-α還可誘發(fā)骨母細胞產生一種破骨細胞活化因子,促進破骨細胞的骨吸收,進一步加劇對軟骨下骨的破壞。

1.3 白細胞介素-6(interleukin-6,IL-6) IL-6是單核吞噬細胞等在IL-1、TNF-α等誘導下產生的一種細胞因子,具有典型的多能性。在骨關節(jié)炎的全層軟骨及滑膜中IL-6均呈現過量表達[12]。IL-6與 IL-1、TNF-α等因子不同的是,它本身對MMPs、PGE和滑膜基質并沒有直接的作用,IL-6通過激活滑膜內B淋巴細胞,引起自身免疫應答,產生滑膜的炎性反應[13]。IL-6作用于B淋巴細胞與T淋巴細胞,通過自分泌形式作用于軟骨細胞,影響軟骨細胞的正常增殖。IL-6還可使軟骨細胞表面分布的TNF-α受體密度增大,使靶細胞對 TNF-α具有高敏感性,加劇 TNF-α對靶細胞的損傷。IL-1通過IL-6介導,抑制軟骨糖蛋白的合成,導致成纖維細胞和基質降解[14]。但是有研究發(fā)現,IL-6可刺激TIMPs的產生,所以IL-6具有一定的保護軟骨組織的作用[15]。但IL-6對滑膜及軟骨的影響還是以分解作用為主。

1.4 白細胞介素-17(interleukin-17,IL-17) IL-17作為一種前炎癥細胞因子,與骨關節(jié)炎的發(fā)生有密切聯系。研究發(fā)現可溶性IL-17受體(sIL-17R)可競爭性結合 IL-17,減輕自身免疫反映,減少IL-6和Ⅰ型膠原降解標志物的釋放。IL-17/IL-17R在骨關節(jié)炎中細胞因子失衡和結締組織重構方面起重要作用。IL-17具體通過以下幾個方面參與骨關節(jié)炎的發(fā)展:(1)刺激關節(jié)滑膜細胞表達炎癥因子如IL-26、IL-28和巨噬細胞炎癥 蛋 白-23α(macrophage inflammatory protein-23α,MIP-23α);(2)增加關節(jié)軟骨細胞iNOS的表達和NO的產量;(3)刺激軟骨細胞及滑膜成纖維細胞產生 MMP-2、MMP-13、MMP-21,促進軟骨細胞外基質降解;(4)與TNF-α或 IL-10協(xié)同作用增加軟骨細胞和成骨細胞PGE2的合成,上調COX-2的表達。

1.5 白細胞介素-18(interleukin-18,IL-18) IL-18屬于IL-1家族成員之一,IL-18與IL-1有著極為相似的信號傳導途徑,IL-1R相關蛋白也是IL-18的受體之一。骨關節(jié)炎患者關節(jié)中IL-18明顯高于健康者,提示IL-18在骨關節(jié)炎發(fā)生、發(fā)展過程中起重要作用。IL-18作用主要是通過誘導輔助性T淋巴細胞產生干擾素-γ(IFN-γ)和粒巨噬細胞集落刺激因子促進細胞增殖和增強自然殺傷細胞作用。IL-18在關節(jié)滑膜滑液中通過直接接觸T淋巴細胞使單核細胞產生的TNF-α和IL-1β增加,反過來 TNF-α又能刺激IL-18在滑膜細胞中過度表達,形成惡性循環(huán)。IL-18誘導產生的IFN-γ在關節(jié)液中能顯著刺激IL-1、IL-6、NO和PGE2表達,抑制蛋白聚糖前列腺素產生,使IL-8和IL-10表達下降。IL-18也可刺激軟骨細胞及滑膜成纖維細胞產生MM P-1、MMP-3和 MMP-13。

2 合成性細胞因子

2.1 轉化生長因子-β(transforming growth factor-β ,TGF-β)TGF-β主要參與及控制細胞外基質的產生、修飾以及成分的改變,細胞黏附和細胞間的反應等[16]。TGF-β具有調節(jié)細胞外基質的重塑性和促進基質鈣化的作用,不僅能夠促進Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ和Ⅹ型膠原,蛋白多糖等成分合成,還能通過促進骨黏連蛋白(osteonectin)和骨橋素及堿性磷酸酶(alkaline phos-phatase,ALP)而使基質鈣化作用大大增強[17]。TGF-β在軟骨細胞發(fā)育的不同階段起著不同的作用,它能促進未分化和分化早期的軟骨細胞DNA復制,從而促進軟骨細胞增殖及細胞外基質的合成;對分化末期的軟骨細胞,TGF-β則抑制其分化并抑制軟骨基質的合成和鈣化,增加某些降解酶抑制因子的合成。TGF-β可增加 PAI-1和 TIMP-1、TIMP-3的合成,抑制ALP活性。這種對抑制因子合成的上調作用和對蛋白酶的下調作用,進一步增加了由 TGF-β誘導的基質蛋白質的積聚[18]。另外,TGF-β還可增加 IL-1Ra的表達,減少 IL-1R的表達。在骨關節(jié)炎發(fā)病的早、中期,由于軟骨細胞產生了大量的MMPs,激活了 TGF-β的產生,存在高水平的 TGF-β,能在一定程度上自我修復,隨著軟骨細胞功能的破壞,導致TGF-β表達異常,致使 TGF-β含量很低,不能完全保護軟骨組織[19]。2.2 胰島素樣生長因子(Insulin-like growth factor,IGF)IGF-1是調節(jié)軟骨蛋白聚糖合成最重要的生長因子,是軟骨合成的介質,它能與軟骨細胞膜上的IGF-1受體結合,以旁分泌和自分泌的方式起作用,增加蛋白多糖的合成,促進軟骨細胞增殖及軟骨基質合成代謝,抑制軟骨基質降解,保持軟骨內環(huán)境穩(wěn)定[20]。Ⅱ型膠原的合成被證實系IGF-1刺激所致。當軟骨遭受破壞時,基質蛋白溶解,MMPs激活,從而使IGF-1得以活化,在IGF-1作用下,大部分軟骨細胞進入G1期,加快了mRNA的轉錄和各種蛋白質的翻譯合成及各種細胞器的組裝。IGF-1可以抑制由IL-1和纖維結合誘導的MM P-13的表達,而可以限制軟骨細胞外基質降解。在單層培養(yǎng)條件下,IGF-1能與其他因子協(xié)同作用,放大TGF-β對軟骨細胞的作用。骨關節(jié)炎時,血清中 IGF-1濃度低而軟骨中 IGF-1和IGF-1 mRNA濃度高,但同時胰島素樣生長因子結合蛋白(Insulin-like growth factor binding protein,IGFBP)數量也增加,IGFBP可存在于軟骨細胞表面與IGF-1受體結合,它們阻礙了IGF-1和軟骨細胞上受體的結合,使軟骨細胞對IGF-1敏感性下降,對基質的修復能力降低。因此,骨關節(jié)炎發(fā)生的基礎可認為是與IGF系統(tǒng)的紊亂有關。

2.3 骨形態(tài)發(fā)生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)BMP家族是一組酸性多糖蛋白復合物,屬于TGF-β基因超家族成員,其中BMP-2與BMP-7在維持關節(jié)軟骨的形成以及在軟骨受損后的修復過程中起重要作用[21]。Merrihew等[22]觀察了正常、退化和骨關節(jié)炎3種情況下,軟骨中自體蛋白數量和質量的變化。發(fā)現正常軟骨中,BMP-7 mRNA和蛋白的表達都是最高的,隨軟骨退化程度的增加,BM P-7 mRNA和蛋白的表達逐漸下調[23]。BMPs在軟骨膜及骨膜的表達有助于保持軟骨母細胞和骨母細胞的數量,滿足繼續(xù)生長和生命過程中骨骼的修復需要[24]。BMP-7較IGF-1具有更強的刺激蛋白多糖合成的能力,同時成比例促進膠原合成。目前研究證實BMP還能刺激軟骨合成代謝,增強 TGF-β、IGF-1、TIM Ps的表達,又能有效抑制分解代謝,降低IL-1、IL-6等的表達。

3 小 結

綜上所述,骨關節(jié)炎的發(fā)生是由多種因素和各類因子在關節(jié)不同部位共同作用的結果。各種因子之間存在一定的交叉性作用機制。在研究骨關節(jié)炎時,要將其看作一個即獨立又相互聯系的整體,全面把握各類誘發(fā)因素及致病因子,從復雜的相互作用中找出規(guī)律,抓住各種因子間的主要矛盾。近年來對骨關節(jié)炎的研究已深入至基因和蛋白水平,基因治療的運用使調控各類細胞因子成為可能,人為同時干預多個細胞因子是今后研究的主要突破口。

[1]Brouwer GM,Vantol AW,Bergink AP,et al.Association between valgus and varus alignment and the development and progression of radiographic osteoarthritis of the knee[J].Arthritis Rheum,2007,56(4):1204-1211.

[2]Forsey RW,Fisher J,Thompson J,et al.The effect of hyaluronic acid and phospholipids based lubricants on friction within a human cartilage damage model[J].Biomaterials,2006,27(26):45-47.

[3]Fujita Y,Shiomi T,Yanagimoto S,et al.Tetraspanin CD151 is expressed in osteoarthritic cartilage and is involved in pericellular activation of pro-matrix metalloproteinase 7 in osteoarthritic chondrocytes[J].Arthritis Rheum,2007,54(10):3233-3244.

[4]Xiao R,Dong Q.Expression of MMP-13 in the Synoviocyte of osteoarthritis in human[J].Suzhou University Med Sci,2006,26(5):815.

[5]Silvestri T,Pullstelli L,Dolzani P,et al.In vivo expression of inflammatory cytokine receptors in the joint compartments of patients with arthritis[J].Rheumatol Ina,2006,26(4):360-368.

[6]Galich AL,Domiciano DS,Fuller R,et al.Osteoarthritis:can anti-cytokine therapy play a role in treatment[J].Clin Rheumatol,2010,29(5):451-460.

[7]Kwan Tat S,Pelletier JP,Lajeunesse D,et al.The diff erential expression of osteoprotegerin(OPG)and receptor activator of nuclear factor kappa B ligand(RANK L)in human osteoarthritic subchondral bone osteoblasts is an indicator of the metabolic state of these disease cells[J].Clin Exp Rheumatol,2008,26(2):295-304.

[8]Legendre F,Baugé C,Roche R,et al.Chondroitin sulfate modulation of matrix and inflammatory gene expression in IL-1 beta-stimulated chondrocytes— — study in hypoxic alginate bead cultures[J].Osteoarthritis and Cartilage,2008,16(1):105-114.

[9]Raymond L,Eck S,Hays E,et al.RelA is required for IL-1 beta stimulation of Matrix Metalloproteinase 1 expression in chondrocytes[J].Osteoarthritis and Cartilage,2007,15(4):431.

[10]Mahmoud R,Nehal A,Fathi B,et al.Alterations of the CD4+,CD8+T cell subsets,interleukins-1β,IL-10,IL-17,tumor necrosis factor-αand soluble intercellular adhesion molecule-1 in rheumatoid arthritis and osteoarthritis:preliminary observations[J].Pathol Oncol Res,2008,14(3):321-328.

[11]Lope-Armada M J,Carames B,Lires-Dean M.Cytokines,tumor necrosis factor-alpha and interleukin-1beta,differentially regulate apoptosis in osteoarthritis cultured human chondrocytes[J].Osteoarthritis and Cartilage,2006,14(7):660-667.

[12]Bjornsson GL,Thorsteinsson L,Gudmundsson KO,et al.Inflammatory cytokines in relation to adrenal response following total hip replacement[J].Scand Immunol,2007,65(1):99-104.

[13]Sakao K,Takahashi KA,M azda O,et al.Enhanced expression of interleukin-6,matrix metalloproteinase-13,and receptor activator of NF-kappa B ligand in cells derived from osteoarthritic subchondral bone[J].Orthop Sci,2008,13(3):202-210.

[14]Doss F,Menard J,Hauschild M,et al.Elevated IL-6 levels in the synovial fluid of osteoarthritis patients stem from plasma cells[J].Scand J Rheumatol,2007,36(2):136-143.

[15]Sakao K,Kenji A.Takahashi YA,et al.Osteoblasts derived from osteophytes produce interleukin-6,interleukin-8,and matrix metalloproteinase-13 in osteoarthritis[J].J Bone Miner Metab,2009,27(4):412-423.

[16]張華,倪衛(wèi)東.轉化生長因子-β與骨折愈合[J].重慶醫(yī)學,2008,37(16):1853-1856.

[17]Sakimura K,Matsumoto T,Miyamoto C,et al.Effects of insulin-like growth factor I on transforming growth factor beta1 induced chondrogenesis of synovium-derived mesenchymal stem cells cultrued in a polyglycolic acid scaffold[J].Celles Tissues Organs,2006,183(2):55-61.

[18]T suritani K,Takeda J,Sakagami J,et al.Cytokine receptor-like factor 1 is highly expressed in damaged human knee osteoarthritic cartilage and involved in osteoarthritis downstream of TGF-β[J].Calcif Tissue Int,2010,86(1):47-57.

[19]Roman-Blas JA,Stokes DG,Jimenez SA.Modulation of TGF-beta signaling by proinflammatory cytokines in articular chondrocytes[J].Osteoarthritis and Cartilage,2007:27(12):1367-1377.

[20]Nixon AJ,Brower-Toland BD,Bent SJ,et al.Genetic modification of chondrocytes with insulin-like growth factor-1 enhances cartilage healing in an equine model[J].Clin Orthop,2007,379:201-203.

[21]Wozney JM,Rosen V.Bone morphogenetic protein and bone morphogenetic protein gene family in bone formation and repair[J].Clin Orthop,2005,346(13):26-37.

[22]Merrihew C,Kumar B,Heretis K,et al.Alterations in endogenous osteogenic protein-1 with degeneration of human articular cartilage[J].Orthop Res,2003,21(5):899-907.

[23]Nakase T,Miyaji T,Tomita T,et al.Localization of bone morphogenetic protein-2 in human osteoarthritis cartilage and osteophyte[J].Osteoarthritis and Cartilage,2006,11(36):278-284.

[24]Cook SD,Wolfe MW,Sulkeld SC,et al.Recombinant human osteogenetic protein-1(rhOP-1)heals segmental defects in nonhuman primutes[J].Bone Joint Surg,2007,77(21):734-750.

10.3969/j.issn.1671-8348.2011.04.041

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1671-8348(2011)04-0395-04

2010-03-10

2010-09-28)

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