周春鳳 （山東綠都安特動(dòng)物藥業(yè)有限公司 濱州 256600）

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高效液相色譜儀使用中應(yīng)注意的幾點(diǎn)問題

周春鳳 （山東綠都安特動(dòng)物藥業(yè)有限公司 濱州 256600）

高效液相色譜儀作為獸藥檢驗(yàn)中必備的精密儀器設(shè)備之一，因其可信度強(qiáng)，精確度高，在獸藥的定性和定量分析中應(yīng)用越來越廣泛，隨著新藥典的頒布，很多種獸藥的檢驗(yàn)項(xiàng)目，如鑒別、含量等都改成了高效液相色譜法。本實(shí)驗(yàn)室所使用的是美國(guó)實(shí)驗(yàn)儀器公司生產(chǎn)的Laballiance高效液相色譜儀，現(xiàn)就這幾年來的工作實(shí)踐，論述一下高效液相色譜儀使用中應(yīng)注意的幾點(diǎn)問題。

1 熟悉設(shè)備

完全的了解設(shè)備可以避免因操作失誤而導(dǎo)致儀器損壞，有利于對(duì)儀器進(jìn)行保養(yǎng)，高效液相重在保養(yǎng)。新購入設(shè)備，廠家的技術(shù)人員負(fù)責(zé)進(jìn)行安裝、調(diào)試，這時(shí)候，負(fù)責(zé)高效液相檢驗(yàn)的化驗(yàn)員最好選擇一種藥物，進(jìn)行完整的演練，這樣印象深刻，省得以后的很多不確信。另外，最好在調(diào)試的時(shí)候由化驗(yàn)員自己重新安裝一下工作站，因?yàn)樵谝院蟮墓ぷ髦锌赡軙?huì)損壞工作站，到時(shí)候再打電話咨詢就很難說得明白了，并且最好完整記錄下安裝的步驟。設(shè)備的安裝調(diào)試說明書讀至少3遍才能有所收獲，有所悟，這也要在非常熟悉實(shí)驗(yàn)步驟和設(shè)備的前提下，所以就不如及早多費(fèi)心做的好。

2 設(shè)備易出現(xiàn)的問題

高效液相色譜儀主要由四大部分組成：柱溫箱(包括進(jìn)樣閥)、高壓輸液泵、檢測(cè)器、工作站。（1）柱溫箱及進(jìn)樣閥容易出現(xiàn)的問題是：溫控儀失靈，不能正確控制柱溫箱的溫度，這時(shí)只要更換一下溫控儀就可以了，溫控儀只在各樣品系統(tǒng)適用性試驗(yàn)中有溫控要求時(shí)應(yīng)用，如果無要求，就不必開啟；漏液，如發(fā)現(xiàn)對(duì)照品和樣品的出峰時(shí)間都不規(guī)律，而且每次的出峰面積也差別很大，根本無法對(duì)樣品進(jìn)行定性和定量，這時(shí)候需要檢查色譜柱和各金屬細(xì)管的連接處，可能是連接處的塑料套因連接時(shí)未按要求而變形了，因其一旦變形就沒法修復(fù)，所以換一個(gè)新的，按要求套上即可。（2）高壓輸液泵容易出現(xiàn)的問題是：①壓力升不上去：檢查一下桌面上是否有漏下的液滴，如果有擰緊漏液處即可。②壓力過高：看一下抽取流動(dòng)相的塑料管里是否有氣泡，如果有，則按一下Stop，這時(shí)候千萬別抽氣泡，等壓力降下來，最好到0Psi，這時(shí)候抽出氣泡。如果在過高的壓力下抽氣泡，后果會(huì)非常嚴(yán)重，流通池會(huì)被鼓破，無法分析樣品，并且會(huì)給你帶來很多困惑，當(dāng)然如果有經(jīng)驗(yàn)的話會(huì)及時(shí)發(fā)現(xiàn)，因?yàn)榱魍ǔ仄屏撕髸?huì)流出藍(lán)色的墨水樣的液體。（3）檢測(cè)器容易出現(xiàn)的問題：①流通池：以上已經(jīng)提過了，如果流通池破了，則需要及時(shí)更換。②氘燈：氘燈的壽命一般為2000h，如果檢測(cè)器打不開了，則說明氘燈超過其使用期限，需要更換了。在日常檢測(cè)中，一般在進(jìn)樣品之前開啟檢測(cè)器，樣品分析完畢，及時(shí)關(guān)閉檢測(cè)器，這樣可以延長(zhǎng)其使用年限，避免不必要的浪費(fèi)。（4）工作站容易出現(xiàn)的問題：安裝工作站的電腦一般不要進(jìn)行其他的工作，一旦出現(xiàn)問題，則需重新安裝。

3 正確的實(shí)驗(yàn)步驟

實(shí)驗(yàn)步驟包括樣品的處理和流動(dòng)相的配制。（1）樣品的配制：嚴(yán)格按照樣品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)配制，樣品最好現(xiàn)配先做，不要擱置，以防樣品分解，導(dǎo)致含量變小。（2）流動(dòng)相的配制：流動(dòng)相最好現(xiàn)配先用，尤其含鹽量高的流動(dòng)相。流動(dòng)相的抽濾需要注意：如果流動(dòng)相中含有機(jī)溶劑，則需要用有機(jī)系濾膜，若使用水系濾膜，則濾膜會(huì)被溶解入流動(dòng)相，流動(dòng)相只能廢掉。如果流動(dòng)相不含有機(jī)溶劑則需要用水系濾膜，若用有機(jī)系濾膜，則再高的壓力也抽濾不下來。同一批樣品一定要用同一批流動(dòng)相。流動(dòng)相配制好后，要先抽濾，再超聲。

4 其他應(yīng)注意的問題

（1）進(jìn)樣針：進(jìn)樣針一定要用專用的平頭針，千萬不能用普通的斜面針頭。（2）進(jìn)樣閥的沖洗：樣品分析完后要沖洗進(jìn)樣閥，避免殘留物影響下一次分析。

高效液相色譜儀屬于精密儀器設(shè)備，未經(jīng)過嚴(yán)格培訓(xùn)的人員不要使用。操作時(shí)一定要嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)步驟和儀器設(shè)備操作規(guī)程進(jìn)行。

（2010–12–06）

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