梁燕玲 羅 艷 李永亮 董艷芬 (廣東藥學院基礎學院,廣東 廣州 510006)
植物烏欖為橄欖科,分布于我國南部福建、兩廣、云南等地。其果實具有止血,利水,解毒功效。主治內傷吐血,咳嗽痰血,水腫,乳癰,外傷出血。民間常用于治療風濕性腰腿痛、手足麻木、感冒、上呼吸道炎、肺炎等〔1〕。烏欖果除現(xiàn)有的民間藥效外,課題組的研究發(fā)現(xiàn)烏欖果水提物具有快速降壓和減慢心率的作用〔2〕。本研究的目的是通過觀察烏欖果水提物對大鼠胸主動脈環(huán)平滑肌的作用,進一步探討烏欖果的藥用價值,并同比觀察烏欖葉、樹皮水提物對血管的作用,以明確藥用部位,了解烏欖的藥理作用,為開發(fā)其藥用價值提供實驗依據。
1.1 藥品與試劑 實驗所用烏欖果、葉和樹皮采自廣東省中山地區(qū),曬干入藥,烏欖果為成熟果實。烏欖各藥用部位水提取物由廣東藥學院藥物化學教研室提取,用烤箱于60℃烤干,實驗時用蒸餾水稀釋,調試pH值到7.0,用濾孔直徑為4~5 nm的過濾器過濾。去甲腎上腺素(NE):上海和豐制藥有限公司生產,批號:061002。維拉帕米(異搏定):上海和豐制藥有限公司生產,批號:4E12002。乙酰膽堿(Ach):上海三愛思試劑有限公司生產,批號:20060328。Krebs-Henseleit(K-H)液(mmol/L):NaCl 118.3、KCl 4.7、KH2PO41.2、MgSO41.2、NaHCO325.0、葡萄糖 11.0、CaCl22.5。
1.2 實驗動物及分組 實驗所用動物為SD成鼠,體重180~220 g,雌雄不拘,由廣東省實驗動物中心提供。采用離體大鼠胸主動脈血管環(huán),血管內皮完整,每組樣本量為12例。隨機分為:1%、10%烏欖果水提物組,10%烏欖葉水提物組,10%烏欖樹皮水提物組,生理鹽水對照組,陽性藥物(異搏定)對照組。
1.3 儀器 MedLab生物信號采集處理系統(tǒng),肌張力換能器,離體組織器官灌流系統(tǒng)(南京美易公司生產)。
1.4 方法〔3〕
1.4.1 血管環(huán)的制備 大鼠斷頭處死,迅速開胸取出胸主動脈,置于95%O2和5%CO2混合氣預飽和的K-H液中。小心剔除血管周圍結締組織后,剪成2.5~3 mm的血管環(huán)。將血管環(huán)懸掛于預置15 ml K-H液的浴槽內,37℃恒溫,持續(xù)通以95%O2和5%CO2的混合氣體。血管環(huán)加靜息張力約2 g平衡120 min,期間每15 min更換K-H液1次。
1.4.2 血管內皮完整性驗證 待血管環(huán)穩(wěn)定后,用1×10-5mol/L NE使血管環(huán)收縮達峰值,加入10-6mol/L Ach檢驗血管內皮完整性。若加Ach后NE預收縮的血管舒張下降在25%以下,可認為血管內皮受損,棄除。
2.1 烏欖果水提物對NE預收縮胸主動脈環(huán)張力的影響 不同濃度劑量烏欖果水提物對NE預收縮大鼠胸主動脈環(huán)平滑肌有明顯的舒張作用,高劑量組、低劑量組(給藥后15、20 min)和異搏定組分別與生理鹽水組有顯著差異(P<0.05)。給藥后3、5 min高劑量組血管環(huán)張力下降比低劑量組顯著(P<0.05)。低劑量組起效時間為(278.87±20.76)s,高劑量組為(105.88±49.94)s,兩組差異顯著(P<0.05)。見表1。
2.2 烏欖果水提物與烏欖葉、樹皮水提物藥效作用的比較烏欖果、葉和樹皮的水提物對NE預收縮血管環(huán)平滑肌均有明顯的舒張作用,舒張作用給藥后50 min仍有顯著差異(P<0.05);其中以烏欖葉水提物的舒血管作用最明顯;烏欖果水提物組在給藥后前20 min血管張力下降低于烏欖樹皮水提物組,但20 min后血管張力下降比后者顯著(P<0.05),且給藥后50 min血管環(huán)平滑肌張力下降百分率接近烏欖葉水平。見表2。水提物的起效時間:烏欖葉27 s,果105 s,樹皮63 s。血管 環(huán)張力下降達50%所需時間分別為:5.5、27、41 min。
表1 烏欖果水提物舒血管作用的藥物量效關系(x ± s,n=12)
表2 烏欖果、葉、樹皮水提物舒血管作用比較(x ± s,n=12)
本實驗研究結果表明,烏欖果水提物對大鼠胸主動脈內皮完整血管環(huán)具有明顯舒張作用,舒血管作用與陽性藥物異搏定類同。不同濃度劑量烏欖果水提物對NE收縮血管作用有不同程度的舒張作用,舒血管作用隨提取物劑量的加大而加強,說明有一定的藥物量效關系。提示烏欖果水提物對心血管系統(tǒng)有調節(jié)作用,其降壓效應的作用途經可能是舒張血管平滑肌,但作用的機制還有待進一步的研究。
在比較烏欖果、葉、皮水提取物對大鼠胸主動脈離體血管環(huán)作用的實驗研究中發(fā)現(xiàn),三個不同藥用部位水提取物對血管環(huán)均有明顯舒張作用,而且維持時間較長。其中烏欖葉水提物的舒血管作用最為顯著,起效快,其次是烏欖果水提物,提示烏欖葉和果含有更豐富的舒張血管作用活性物質。
研究提示,烏欖果、葉、皮水提取物對由NE誘發(fā)的離體血管收縮均有舒張作用,烏欖果水提物舒張血管平滑肌作用僅次于烏欖葉,作用維持時間較長,并有明顯的降壓和減慢心率效應〔2〕。烏欖果是著名的亞熱帶特產水果,是嶺南果品之一,性平無毒,可供生食。在民間多用于制成鹽腌果制品,無需添加任何防腐劑可以長時間保存而不變質,可長年食用。新鮮成熟的烏欖果肉含有豐富的脂肪、維生素C、有機酸、蛋白質及微量元素等。腌制品中的水分、蛋白質和脂肪酸三種營養(yǎng)與新鮮烏欖果肉無明顯差異〔4〕。新鮮烏欖果揮發(fā)成分主要為萜類化合物,具有良好的抑菌作用及鎮(zhèn)咳、祛痰的功效〔5〕。烏欖果肉還有較強的抗氧化活性,對氧自由基清除率高,具有抗衰老的作用〔6〕。烏欖在中國特別在廣東省具有豐富資源,其果具有豐富的營養(yǎng)及多方面的藥效作用,保存與食用方法簡單。所以筆者認為長期食用烏欖果以及相關制品對高血壓可具防治作用。高血壓是世界最常見的心血管疾病。隨著中國人口老齡化的加劇以及人們的生活水平和方式的逐漸改變,中國人疾病譜發(fā)生了明顯改變,高血壓、糖尿病等慢性非傳染性病的發(fā)病率持續(xù)上升并成為居民的主要死因。進一步深入研究烏欖果舒血管作用的有效成分及作用機制,以應用于防治高血壓具有極為重要的意義,因此烏欖具有廣泛的應用開發(fā)前景和價值。
1 趙國平,戴 慎,陳仁壽.中藥大辭典(上冊)〔M〕.第2版.上海:科學技術出版社,2006:661.
2 董艷芬,梁燕玲,羅 艷,等.烏欖果降壓作用的實驗研究〔J〕.醫(yī)學理論與實踐,2006;19(8):880-2.
3 張紅雨,徐長慶,李鴻珠,等.白黎蘆醇對大鼠離體胸主動脈環(huán)的舒張作用〔J〕.中國中藥雜志,2005;30(16):1283-6.
4 陸慧寧,馮順卿.烏欖果及其種子營養(yǎng)成分分析〔J〕.江西化工,2008;3:81-2.
5 謝惜媚,陸慧寧,馮順卿.烏欖果揮發(fā)性成分及脂肪酸的GC-MS分析〔J〕. 分析測試學報,2008,27(增刊):83-85.
6 張樹球,農 嵩,李朝敢,等.烏欖等對氧自由基清除率的影響〔J〕.中國老年學雜志,2001;21(5):237-8.