王 穩(wěn)，吳廷廷，王小娟，魏晶晶，謝 云，王 通，張勵才，3

(1.徐州醫(yī)學(xué)院麻醉學(xué)院，江蘇徐州 221002;2.中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院，湖南 長沙 410013;3.江蘇省麻醉學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江蘇省麻醉與鎮(zhèn)痛應(yīng)用技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江蘇徐州 221002)

地西泮(diazepam，Dia)是最常用的鎮(zhèn)靜、催眠藥之一。有研究表明［1］地西泮有鎮(zhèn)痛作用。山莨菪堿(anisodamine，Ani)是M膽堿受體拮抗劑，有較弱的中樞協(xié)同鎮(zhèn)痛作用［2］，且已有臨床研究表明山莨菪堿可以用于全麻術(shù)后催醒［3］。但是關(guān)于山莨菪堿對地西泮催眠、鎮(zhèn)痛作用的影響尚鮮有報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)對此進(jìn)行了初步的動物實(shí)驗(yàn)研究，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1試劑和儀器鹽酸消旋山莨菪堿注射液(批號:0907172，徐州萊恩藥業(yè)有限公司);地西泮注射液(批號:090721，江蘇省濟(jì)川制藥有限公司);生理鹽水;HH-42型快速恒溫顯水箱(常州國華電器有限公司)。

1.2實(shí)驗(yàn)動物昆明種小鼠，♀♂并用，清潔級，體質(zhì)量(22±5)g，由徐州醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物中心供。

1.3實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1山莨菪堿對地西泮小鼠催眠作用的實(shí)驗(yàn)各組小鼠腹腔注射地西泮25 mg·kg-1，待翻正反射消失后1 min，分別腹腔注生理鹽水及山莨菪堿，記錄各組小鼠翻正反射消失的持續(xù)時間，即睡眠時間(sleep time，ST)。各組山莨菪堿劑量均按人使用劑量折算為小鼠用量［3］，注射容積均為10 ml·kg-1。

1.3.2山莨菪堿對地西泮小鼠鎮(zhèn)痛作用的實(shí)驗(yàn)甩尾法實(shí)驗(yàn):將小鼠尾下部1/3垂直浸入(48.0±0.5)℃恒溫水浴中，以尾進(jìn)入水面到回縮出水面的時間為甩尾潛伏期(TFL)。為防止?fàn)C傷，浸水截止時間 15 s，TFL 超過 15 s者，痛閾記為15 s［5］。用藥前測痛閾2次，間隔5 min，取其平均值為基礎(chǔ)痛閾。記錄各組小鼠的基礎(chǔ)痛閾和注射山莨菪堿后5、10、15和20 min甩尾法痛閾。地西泮腹腔注射1 mg·kg-1［1］，山莨菪堿腹腔注射 4 mg·kg-1［4］，注射容積均為 10 ml·kg-1。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法數(shù)據(jù)均采用±s表示，用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，組內(nèi)比較采用配對t檢驗(yàn)，組間比較采用方差分析。

2 結(jié)果

2.1山莨菪堿對地西泮小鼠睡眠時間的影響與NS組比較，山莨菪堿各組均可縮短地西泮小鼠的睡眠時間(P＜0.05)。見Tab 1。

Tab 1 The influence of anisodamine on the sleeping time of diazepam(righting reflex)(xˉ±s，n=10)

2.2山莨菪堿對地西泮小鼠鎮(zhèn)痛作用的影響與基礎(chǔ)TFL相比，C組TFL延長(P＜0.05);與A組相比，C組TFL延長(P＜0.05);C組各時間點(diǎn)的TFL與A組和B組相比有延長的趨勢。見Tab 2。

Tab 2 The influence of anisodamine on the analgesia of diazepam(tail-flick test)(xˉ±s，n=10)

3 討論

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，山莨菪堿對地西泮小鼠有催醒作用;山莨菪堿對地西泮小鼠的甩尾潛伏期無明顯影響，但二者合用有協(xié)同鎮(zhèn)痛的趨勢。

地西泮為長效BZ類藥物，苯二氮類的大多數(shù)作用都是通過調(diào)節(jié)大腦內(nèi)最主要的抑制性受體——GABAA受體所產(chǎn)生的［6］，且GABA能夠產(chǎn)生鎮(zhèn)痛、催眠和遺忘作用［7］。山莨菪堿是M抗膽堿能藥，同時還具有降低迷走神經(jīng)張力，舒張支氣管，減少呼吸道分泌，改善呼吸功能等作用。但是由于山莨菪堿不易透過血腦屏障，中樞作用很弱，而外周作用明顯［8］。我們推測山莨菪堿可縮短地西泮小鼠的睡眠時間可能與GABA受體關(guān)系不大，其具體機(jī)制尚有待進(jìn)一步的研究。

在本實(shí)驗(yàn)條件下，1 mg·kg-1的地西泮對小鼠的甩尾潛伏期的影響無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。其原因可能是因?yàn)橛^察時間不夠長或小鼠樣本量不足。山莨菪堿為抗膽堿藥，可使平滑肌明顯松弛，并能解除血管痙攣，同時有鎮(zhèn)痛作用［9］，且有較弱的中樞協(xié)同鎮(zhèn)痛作用［2］。在本實(shí)驗(yàn)中，山莨菪堿與地西泮合用有協(xié)同鎮(zhèn)痛的趨勢，其具體的作用及機(jī)制尚有待進(jìn)一步的研究。

綜上所述，山莨菪堿可縮短地西泮的睡眠時間，山莨菪堿與地西泮合用有協(xié)同鎮(zhèn)痛的趨勢，但對地西泮小鼠鎮(zhèn)痛效應(yīng)的影響尚有待進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)研究。

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