吳正平

(宜春學(xué)院美容醫(yī)學(xué)院，江西宜春336000)

金花葵Hibiscus manihot L.，又名菜芙蓉，為錦葵科秋葵屬1年生草本植物，是瀕于滅絕的珍稀植物。金花葵具有食用、藥用、保健等功能，有較高的利用價(jià)值［1-2］。前期對金花葵籽油中脂肪酸的氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)聯(lián)用技術(shù)分析［3］，結(jié)果表明金花葵籽油中含有6種脂肪酸，其中不飽和脂肪酸包括油酸、亞油酸以及少量的棕櫚油酸，質(zhì)量分?jǐn)?shù)達(dá)到68.91%。本實(shí)驗(yàn)對金花葵籽油中不飽和脂肪酸進(jìn)行提純，觀察其對實(shí)驗(yàn)性高脂血癥大鼠血脂和肝功能的影響，探討金花葵籽不飽和脂肪酸調(diào)血脂和護(hù)肝作用。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 動(dòng)物 SD大鼠，雄性，體質(zhì)量(150±20)g，由南昌大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)部提供，合格證號:贛醫(yī)動(dòng)字第02196-02。

1.1.2 藥品 金花葵籽不飽和脂肪酸由宜春學(xué)院藥妝研發(fā)中心采用尿素包合法制備［4］，呈黃色澄清油狀物，經(jīng)氣相色譜分析，不飽和脂肪酸量≥95%。

1.1.3 飼料 基礎(chǔ)飼料由南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。高脂飼料含75%基礎(chǔ)飼料，8%豬油，15%蛋黃粉，2%膽固醇。

1.1.4 試劑 血清 TC、TG、LDL-C、HDL-C、TP、ALB、GPT 和GOT檢測試劑盒均為上海申索佑福醫(yī)學(xué)診斷用品有限公司產(chǎn)品。

1.1.5主要儀器 OLYMPUS AU2700全自動(dòng)生化分析儀(日本奧林巴斯)。

1.2 方法

1.2.1 動(dòng)物分組與給藥 將實(shí)驗(yàn)大鼠隨機(jī)分為5組，每組10只:正常組喂普通飼料;高脂組喂高脂飼料;金花葵籽不飽和脂肪酸低、中、高劑量組喂高脂飼料，并灌胃金花葵籽不飽和脂肪酸原液:低劑量組1 mL/kg、中劑量組2 mL/kg、高劑量組4 mL/kg，1次/d。持續(xù)飼養(yǎng)6周。

1.2.2 血清生化指標(biāo)的測定 各組大鼠飼養(yǎng)6周末禁食12 h后，乙醚麻醉，眼眶靜脈采血，分離血清，按試劑盒說明書測定各組血清 TC、TG、LDL-C、HDL-C、TP、ALB、GPT 和 GOT。

1.2.3 肝脂堆積觀察 取大鼠肝臟同一部位，制備肝臟組織冰凍切片，Herxheimer油紅O脂肪染色法進(jìn)行肝臟組織冰凍切片的脂肪染色。

1.2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 以SPSS11.0軟件分析數(shù)據(jù)，數(shù)據(jù)以±s表示，進(jìn)行方差分析和t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 對血脂水平的影響 與正常組比較，高脂組血清TC、TG、LDL-C水平明顯升高(P＜0.01)，HDL-C明顯降低(P＜0.05)，表明高脂血癥模型造模成功。與高脂組比較，低劑量組血清TC、TG、LDL-C水平均有不同程度降低，但無顯著差異(P＞0.05);中劑量組和高劑量組血清 TC、TG、LDL-C水平明顯降低(P＜0.05或P＜0.01)，高劑量組血清HDL-C水平明顯升高(P＜0.05)。見表1。

2.2 對血清TP、ALB、GPT和GOT水平的影響 與正常組比較，高脂組血清 TP、ALB水平明顯降低(P＜0.05)，GPT、GOT水平明顯升高(P＜0.01)。與高脂組比較，低、中、高劑量組血清TP、ALB水平均有所提高，但無顯著差異(P＞0.05);低劑量組血清GPT、GOT水平有所降低，但無顯著差異(P＞0.05);中、高劑量組血清 GPT水平明顯降低(P＜0.05或P＜0.01);高劑量組血清 GOT水平明顯降低(P＜0.05)。見表2。

表1 各組血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平 (±s，n=10)

表1 各組血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平 (±s，n=10)

注:與高脂組比較，*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01。下同。

組別 TC/(mmol/L) TG/(mmol/L) LDL-C/(mmol/L) HDL-C/(mmol/L)正常組 1.97±0.24＊＊ 0.62±0.17＊＊ 0.37±0.10＊＊ 0.58 ±0.12*高脂組 6.89 ±1.92 0.89 ±0.15 2.56 ±0.76 0.44 ±0.13低劑量組 5.82 ±0.96 0.87 ±0.16 2.13 ±0.54 0.43 ±0.15中劑量組 4.85 ±1.62* 0.69 ±0.15* 1.57 ±0.68* 0.49 ±0.17高劑量組 3.87±0.35＊＊ 0.63±0.21＊＊ 1.25±0.46＊＊ 0.54 ±0.11*

表2 各組血清TP、ALB、GPT和GOT水平 (±s，n=10)

表2 各組血清TP、ALB、GPT和GOT水平 (±s，n=10)

GPT/IU GOT/IU正常組 71.04±7.59* 39.13±3.97* 22.13±8.71＊＊ 39.45 ±14.53組別 TP/(g/L) ALB/(g/L)＊＊高脂組 60.84 ±5.62 32.76 ±7.37 65.19 ±17.85 80.35 ±15.56低劑量組 62.87 ±4.53 33.46 ±5.47 60.24 ±18.57 75.64 ±19.35中劑量組 63.75 ±5.48 34.42 ±2.75 49.65 ±8.57* 73.85 ±21.15高劑量組 65.07±4.86 34.72±3.78 45.23±14.45＊＊ 68.50 ±15.67*

2.3 對肝脂堆積的影響 正常組肝臟有組織彈性，色澤紅，質(zhì)地緊密;高脂組肝臟表面色澤蒼白或帶灰黃色，壓時(shí)現(xiàn)凹陷或易碎;金花葵籽油不飽和脂肪酸中、高劑量組肝臟形態(tài)則近似于正常組。Herxheimer油紅O脂肪染色法觀察到高脂組肝細(xì)胞間隙以及細(xì)胞內(nèi)堆積了大量脂滴，正常組切片則沒有發(fā)現(xiàn)明顯脂滴，金花葵籽不飽和脂肪酸中、高劑量組切片中脂滴明顯少于高脂組。見圖1。

3 討論

圖1 肝臟冰凍切片油紅O染色(×600)

高血脂是導(dǎo)致心腦血管疾病的一個(gè)重要原因。大量動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和臨床實(shí)驗(yàn)表明，不飽和脂肪酸具有調(diào)血脂作用而降低心血管疾病發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)［5-6］。在與血脂水平密切相關(guān)的心血管疾病發(fā)病率逐年攀升的今天，不飽和脂肪酸的應(yīng)用前景十分廣闊。動(dòng)物血清TC、TG、LDL-C和HDL-C水平是反映機(jī)體脂質(zhì)代謝重要指標(biāo)。其中HDL-C可逆向轉(zhuǎn)運(yùn)TC，從而降低血清TC水平，因此，高水平HDL-C是心血管的保護(hù)因素［7］，而HDL-C水平降低成為誘發(fā)早發(fā)性冠心病的危險(xiǎn)因素之一［8］。本研究結(jié)果表明，金花葵籽油不飽和脂肪酸中、高劑量組能降低大鼠血清TC、TG、LDL-C水平(P＜0.05或P＜0.01)，高劑量組升高血清 HDL-C水平(P ＜0.05)，顯示具有明顯的調(diào)血脂作用。

肝臟在營養(yǎng)代謝中起到非常重要的作用，是脂質(zhì)和脂蛋白代謝的中心，過量的脂質(zhì)攝入常引起肝損傷的發(fā)生［9-12］。血液中蛋白的含量可以反映肝臟功能，一旦肝臟合成功能下降，蛋白在血液中濃度隨之降低，其降低程度與肝臟合成功能損害程度呈正相關(guān)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示高脂組與正常組相比，血清TP和ALB明顯降低，表明此造模方法可使實(shí)驗(yàn)大鼠肝功能下降;轉(zhuǎn)氨酶是反應(yīng)肝臟損傷的靈敏指標(biāo)，與高脂組比較，金花葵籽不飽和脂肪酸中、高劑量組血清GPT水平明顯降低(P＜0.05或P＜0.01)，高劑量組血清GOT水平明顯降低(P＜0.05)，表明金花葵籽不飽和脂肪酸能抑制因高血脂造成的肝功能下降。從肝脂堆積的觀察結(jié)果來看，金花葵籽不飽和脂肪酸中、高劑量組肝臟形態(tài)好于高脂組，且切片中脂滴明顯少于高脂組，這也說明金花葵籽不飽和脂肪酸能有效逆轉(zhuǎn)高血脂對肝臟的影響，促進(jìn)肝臟脂質(zhì)分解，減少大鼠肝臟脂質(zhì)堆積，保護(hù)肝細(xì)胞的正常功能，發(fā)揮護(hù)肝效果。

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