徐創(chuàng)新

(通城縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖北 通城 437400)

我們對(duì)我院常用的2種HBsAg診斷試劑盒的性能進(jìn)行比較，以篩選高質(zhì)量的診斷試劑。

1 材料與方法

1.1 血清樣本

收集2010年3月份通城縣人民醫(yī)院401例門(mén)診及住院患者血清樣本，清晨空腹采靜脈血2ml，血漿分離后－20°冰凍保存。

1.2 儀器與試劑

酶標(biāo)儀為英國(guó)2010，洗板機(jī)為江蘇全自動(dòng)洗板機(jī)。2種試劑盒均為國(guó)內(nèi)市市場(chǎng)上常見(jiàn)品牌，英科新創(chuàng)(廈門(mén))科技有限公司(批號(hào)2010015113)，上?？迫A生物工程股份有限公司(批號(hào)20100112)。確證試劑為珠海的珠廈藥集團(tuán)股份有限公司提供(批號(hào)20100205);質(zhì)控品為湖北省臨檢中心提供的濃度1ng/ml質(zhì)控血清。

1.3 檢測(cè)方法

嚴(yán)格遵守試劑盒操作說(shuō)明書(shū)進(jìn)行檢測(cè)，收集到的血清標(biāo)本HbsAg，孵育時(shí)間均為1h，每一批標(biāo)本均設(shè)定三孔陽(yáng)性對(duì)照，兩孔陰性對(duì)照和兩孔空白對(duì)照，同時(shí)設(shè)定1孔弱陽(yáng)性質(zhì)控，并進(jìn)行確證試驗(yàn)，初檢吸光度值＞2.0的樣本進(jìn)行1∶100稀釋后進(jìn)行確證試驗(yàn)，每批并設(shè)陽(yáng)性對(duì)照，陰性對(duì)照和空白對(duì)照各一孔。

1.4 結(jié)果判讀標(biāo)準(zhǔn)

樣本吸光度/陰性對(duì)照吸光度均值＞2.1為HBsAg陽(yáng)性，否則為陰性，如果陰性對(duì)照均值＜0.05按0.05 計(jì)算，

1.5 確證試驗(yàn)判讀標(biāo)準(zhǔn)

以中和率＞50%判讀結(jié)果為陽(yáng)性，否則為陰性，如果樣本對(duì)照吸光度值小于樣本檢測(cè)孔吸光度值，不計(jì)算中和率而直按判讀為陰性，中和率等于樣本對(duì)照孔吸光度值/樣本檢測(cè)吸光度值/樣本對(duì)照孔吸光度值。

2 結(jié)果

2種試劑盒檢測(cè)401例血清樣本，檢測(cè)結(jié)果完全一致共計(jì)379例占94.5%，其中陰性201例，陽(yáng)性191例，檢測(cè)結(jié)果不一致為22例(占5.5%)，對(duì)已檢測(cè)201例陰性標(biāo)本和191陽(yáng)性標(biāo)本進(jìn)行確證試驗(yàn)均符合結(jié)果，22例不一致標(biāo)本僅有1例經(jīng)確證試驗(yàn)為陽(yáng)性，其余21例為陰性。

3 討論

國(guó)內(nèi)生產(chǎn)的檢測(cè)HbsAg的ELISA試劑盒廠家較多，由于不同的廠家使用的包被單克隆抗體不同，對(duì)不同亞型的親和力不同，所生產(chǎn)的試劑質(zhì)量仍存在差異，其檢測(cè)HBsAg的能力也有所不同?，F(xiàn)對(duì)我科常用的試劑盒進(jìn)行評(píng)價(jià)，發(fā)現(xiàn)這科華、新創(chuàng)HbsAg-ELISA試劑盒的診斷準(zhǔn)確度等性能符合臨床檢測(cè)HbsAg的要求，但2種試劑盒均有假陽(yáng)性或假陰性出現(xiàn)。當(dāng)前我實(shí)驗(yàn)室并不對(duì)初檢結(jié)果為陽(yáng)性的樣本進(jìn)行確證試驗(yàn)，依次來(lái)看這不恰當(dāng)，應(yīng)當(dāng)對(duì)每天的初檢結(jié)果陽(yáng)性樣本進(jìn)行確證試驗(yàn)，特別初檢吸光度＜1.0陽(yáng)性樣本，以排除假陽(yáng)性。