盧利軍

（甘肅省天水市中醫(yī)醫(yī)院，甘肅 天水 741000）

正交法優(yōu)選芪參腸泰腸溶膠囊水提取工藝

盧利軍

（甘肅省天水市中醫(yī)醫(yī)院，甘肅 天水 741000）

目的對芪參腸泰腸溶膠囊的水提取工藝進(jìn)行優(yōu)選。方法以組方中五倍子的主要有效成分沒食子酸的轉(zhuǎn)移率及提取出膏率為評價指標(biāo)，用RP-HPLC 測定其含量，采用正交表設(shè)計試驗法對處方水提取工藝進(jìn)行優(yōu)選。結(jié)果最佳水提取工藝條件為按處方比例取藥材加8倍量水煎煮3次，每次2h。結(jié)論該工藝沒食子酸提取率較高，有較好的穩(wěn)定性，且工藝簡便經(jīng)濟(jì)，適合于生產(chǎn)。

芪參腸泰；五倍子；沒食子酸；提取工藝

芪參腸泰腸溶膠囊是由甘肅省天水市中醫(yī)醫(yī)院開發(fā)研制的純中藥制劑。主要成分有黃芪、太子參、五倍子、苦參、內(nèi)金、白花蛇舌草等17種中藥材。其功能主治為益氣健脾、澡濕化濁、澀腸止瀉，適用于證屬脾虛濕盛、氣滯瘀熱型的急慢性腸炎、潰瘍性結(jié)腸炎及功能性消化不良等。

本研究采用正交試驗設(shè)計優(yōu)選芪參腸泰腸溶膠囊中五倍子、山藥、訶子、土茯苓、白花蛇草、蒲公英等藥材的最佳提取工藝，這些藥材其有效成分多為水溶性，五倍子為芪參腸泰腸溶膠囊中水溶性藥材中的主要組分，因此選取五倍子有效成分沒食子酸為指標(biāo)，結(jié)合提取得膏率優(yōu)選芪參腸泰腸溶膠囊水提取工藝，為芪參腸泰腸溶膠囊的制備工藝提供科學(xué)依據(jù)。

1 儀器與試劑

Agilent 1100高效液相色譜儀，DAD檢測器，Ag-ilent 1100化學(xué)工作站；電子天平（Sartorius BP110S，Sartorius CP225D）。

藥材由天水康泰藥業(yè)有限公司提供，沒食子酸對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號：110770-2010110，HPLC≥98%）；甲醇（50%）、乙腈，其他試劑為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 提取液中沒食子酸含量測定方法

2.1.1 色譜條件[1]

色譜柱Kromasil C18色譜柱（4.6mm×250mm，5μm）；流動相：甲醇-0.1%磷酸溶液（15∶85）為流動相，流速1.0mL/min；進(jìn)樣量10μL；檢測波長273nm，理論塔板數(shù)按沒食子酸峰面積計算不少于3000。

2.1.2 對照品溶液的制備

取沒食子酸對照品適量，精密稱定，加入甲醇（50%）溶液制成1mL含40μg的溶液。

2.1.3 五倍子藥材含量測定[1]

按《中國藥典》2010年版一部五倍子測定項下沒食子酸含量測定法，平行3份，測定結(jié)果為54.62%、59.83%、60.59%，平均含量為58.35%。

2.2 水提取工藝研究

2.2.1 正交試驗設(shè)計

以加水量（4倍、6倍、8倍量水）、提取時間（2.0h、1.5h、1.0h）、提取次數(shù)（1次、2次、3次）為因素，采用3因素3水平正交設(shè)計表確定最終提取工藝。

2.2.2 正交試驗方法與結(jié)果

按處方比例取藥材，試驗安排及結(jié)果見表1，方差分析見表2。

由正交試驗結(jié)果及方差分析可知，影響沒食子酸轉(zhuǎn)移率及出膏率的因素大小順序為C ＞ A ＞ B，其中因素C對檢測指標(biāo)有顯著性影響，B因素的水平2和3相差不大，B因素整體對試驗設(shè)計無顯著影響，結(jié)合生產(chǎn)成本及節(jié)能，綜合考慮確定最佳提取工藝為A3B1C3。即取處方量五倍子、山藥、訶子、土茯苓、白花蛇草、蒲公英飲片，加8倍量水煎煮3次，每次2h。

表1 水提取工藝試驗安排及結(jié)果 %

表2 水提取工藝方差分析

2.2.3 3批中試試驗

按優(yōu)選的工藝進(jìn)行了3批樣品的驗證試驗，即按處方比例取五倍子、山藥、訶子、土茯苓、白花蛇草、蒲公英等藥材共15.0kg，加8倍量水煎煮2次，每次1h。測得提取液中沒食子酸的轉(zhuǎn)移率為64.11%，RSD為1.13%，出膏率17.41%，RSD為2.13%，按優(yōu)化工藝提取，沒食子酸轉(zhuǎn)移率和出膏率均取得較理想的結(jié)果。

3 討 論

為合理選擇因素水平，對加水量進(jìn)行了預(yù)試，由于藥材吸收溶劑，等倍量溶劑投料時，通常以第2次所能加入的量為準(zhǔn)，即第1次提取時提取罐內(nèi)的藥材與溶劑總量通常只能以罐容積的80% 為準(zhǔn)[2]。

對于提取時間，隨煎煮時間延長，沒食子酸的含量會增高，但沒食子酸的轉(zhuǎn)移率普遍較低，這是因為沒食子酸為鞣質(zhì)的結(jié)構(gòu)單元，隨著煎煮時間延長，沒食子酸中的鞣質(zhì)會分解為沒食子酸。五倍子藥材中沒食子酸是在原藥材煎煮3.5h時測定，藥材中鞣質(zhì)水解較完全，而本研究水提時間最高設(shè)計為2h，仍有部分沒食子酸不能從藥材中提出。

本文根據(jù)科研項目實際生產(chǎn)狀況，提取時間選擇了1.0、1.5、2.0h。色譜條件參考了中國藥典2010年版一部五倍子藥材項下含量測定方法，經(jīng)試驗用于本品提取液含量測定，沒食子酸峰尖銳，分離度＞1.5，且陰性無干擾。優(yōu)選提取工藝經(jīng)3批中試試驗，結(jié)果穩(wěn)定，沒食子酸轉(zhuǎn)移率高，說明該工藝穩(wěn)定、重復(fù)可行，適用于生產(chǎn)。

[1]國家藥典委員會.中國藥典[S].2010年版.一部.北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010:62.

[2]王德杭,黃有帶,景運(yùn)條,等.正交試驗法優(yōu)選金芍膠囊的水提取工藝[J].中國實驗方劑學(xué)雜志,2010,16(14):24.

R282.710.2

B

1671-8194（2011）33-0287-02