馮艷鵬 魏月霞

(寧夏回族自治區(qū)第五人民醫(yī)院檢驗科 寧夏石嘴山 753000)

血小板檢測是研究止血與凝血障礙的重要指標之一，也是其他血小板參數(shù)可靠性的基礎，其檢測結果的可靠性至關重要?，F(xiàn)在各種自動化血細胞分析儀已廣泛使用，它不僅改善了實驗方法的特異性和敏感性，而且提供了許多新的實驗參數(shù)。本實驗室采用電阻抗法原理測血小板計數(shù)，它是根據(jù)脈沖高低測定每個血細胞的體積。由于其原理的限制及影響因素眾多，血細胞計數(shù)結果與實際值有一定的差異，特別是血小板體積小、易凝集、易破壞的特性和諸多影響因素，操作過程中如忽視影響因素，血小板計數(shù)結果與實際數(shù)值差異更顯著。還會引起醫(yī)療糾紛，已引起臨床廣泛關注［1］。本文就影響因素綜述如下。

1 引起血小板計數(shù)假性降低的影響因素

1．1 標本自身因素的影響 由于末梢采血穿刺太淺，擠壓過度，混入組織液或天氣寒冷采血部位血液循環(huán)差，采血不順利或靜脈采血經(jīng)過多次穿刺而引起局部水腫皮下出血時因組織損傷，組織凝血因子混入血標本中［2］，造成血小板假性降低。所以采血進針要準，要狠，要講究方法正確，避免過度擠壓和取血時間過長。未充分與抗凝劑混勻或混勻時間過短等，人為造成血小板的凝集，是引起血小板計數(shù)不準確的首要原因。采血量也是影響因素之一，血量最好達到抗凝管體積的1/3，不能超過2/3，否則可因抗凝劑相對不足使血小板發(fā)生聚集，導致血小板計數(shù)假性降低。應盡可能采用真空采血系統(tǒng)，減少干擾因素，保證生物安全。

1．2 抗凝劑的影響 用于血細胞分析儀的抗凝劑EDTA－K2為首選，而極少數(shù)患者體外的EDTA抗凝血，在室溫條件下可發(fā)生血小板EDTA依賴性凝集，此現(xiàn)象主要是EDTA－K2可導致血小板活化，部分血小板的形態(tài)從圓盤狀變成球狀，其膜表面的隱匿性抗原表位現(xiàn)象也會改變與血漿中的自身抗體結合，促使血小板與纖維蛋白原聚集成團，致使血小板假性降低［3］。還有文獻報道，肝素和雙草酸鹽作抗凝劑時，會導致血小板計數(shù)假性降低。

1．3 巨大血小板的影響 正?；蛟S多病理情況下，很多血小板的體積很大，而通常血細胞分析儀通過測定血液中細胞的直徑大小以區(qū)分血小板、紅細胞及白細胞，不能對巨大血小板進行識別，將大體積血小板誤計入其他成分。例如骨髓及骨髓外增生綜合征時，儀器很難鑒別白細胞大小的血小板，此類血小板可能被計入白細胞或紅細胞，而使血小板假性降低［1］。還有衛(wèi)星現(xiàn)象，因EDTA抗凝血中血小板黏附于分葉核粒細胞表面，出現(xiàn)巨大血小板所以計數(shù)沒有包括在內(nèi)，造成血小板的假性減少。

1．4 標本放置時間的影響 標本剛采集完結果不穩(wěn)定，待穩(wěn)定15分鐘后再測定，并盡快分析完［2］。因為血小板離體后其形態(tài)發(fā)生變化，其外膜形成的微小管游離端向外伸展形成絲狀偽足，數(shù)個偽足相互纏繞，形成血小板可逆聚集體，其體積和淋巴細胞大小相似，造成血小板的假性減少。經(jīng)文獻報道，標本放置時間越長，對血小板的影響越大。隨著時間的延長，血小板發(fā)生腫脹或產(chǎn)生構型改變，導致儀器不能正常識別，使血小板計數(shù)假性降低。

1．5 高鎂血癥及脂類與蛋白聚集體的影響 臨床上常用Mg-SO4來預防控制妊高癥子癇的發(fā)作及用于治療先兆子癇［1］。高濃度的Mg2+有類似Ca2+的生理作用，通過改變血小板胞內(nèi)CAMP水平而引起血小板的聚集，造成血小板計數(shù)假性降低。脂類與蛋白的聚集體，如高膽固醇和高甘油三酯血癥時，低密度脂蛋白和載脂蛋白B100可促進血液高凝狀態(tài)，使凝固因子活性增強，血小板聚集性增高，纖溶性降低，引起假性血小板減少［1］。

1．6 臨床用藥的影響 臨床上用ATP(三磷酸腺苷)后血小板容易發(fā)生聚集，血小板計數(shù)降低，因ATP分解產(chǎn)生大量ADP(二磷酸腺苷)，ADP是一種血小板聚集功能的誘導劑，易使血小板發(fā)生聚集而影響血小板的假性減少。

2 引起血小板計數(shù)假性增高的影響因素

2．1 小紅細胞的影響 正常情況下血細胞分析儀對紅細胞體積的識別比較準確，當患者紅細胞大小不均時，尤其是體積＜70fL的小紅細胞居多時，部分極小紅細胞會計入血小板，引起血小板假性增高［4］。因血小板和紅細胞在統(tǒng)一檢測系統(tǒng)中，給儀器識別造成困難，因儀器只識別體積大小，而不能區(qū)別性質(zhì)，因而將小紅細胞誤計成血小板，使血小板假性增高。

2．2 紅細胞碎片的影響 血細胞分析儀對紅細胞及血小板同時進行計數(shù)，同一樣品即使溶血不完全對血小板計數(shù)也沒有影響，但在實際工作中發(fā)現(xiàn)溶血不完全影響下一例樣品的血小板計數(shù)，由于紅細胞碎片沖洗不徹底，能與血小板混淆，使血小板假性增高。

2．3 試劑及其他因素的影響 血小板的檢測結果直接反映試劑的質(zhì)量，原則上應使用與儀器相匹配的原裝試劑是在有效期內(nèi)和批號一致的稀釋液、溶血劑、洗滌液、染色液、校準品和質(zhì)控品。由于國產(chǎn)試劑不同程度存在質(zhì)量問題，如與儀器不匹配、過濾不徹底、細菌污染以及室溫低于15℃時，稀釋液容易出現(xiàn)結晶而使試劑空白增高，導致血小板計數(shù)結果偏高。另一原因是由于血細胞分析儀管道長時間不清潔造成管壁附著一些絮狀物或微小凝血塊，這些雜質(zhì)可隨血液進入計數(shù)池而使血小板結果假性偏高。

2．4 疾病因素 菌血癥患者血液中大量細菌可導致血小板計數(shù)結果增高，在多發(fā)性骨髓瘤、巨球蛋白血癥、淋巴系統(tǒng)增值性疾病、轉移癌、自身免疫性疾病、重度感染及某些不明原因血漿中冷球蛋白增加或白血病、妊娠、血栓性疾病、糖尿病等血漿中冷纖維蛋白增加，可使血中非晶體物質(zhì)聚集，引起血小板計數(shù)值假性增高，此時可將標本放置37℃水浴后計數(shù)。

以上關于血小板檢測的影響因素是在臨床工作中比較常遇到的，了解這些因素后，在日常工作中因嚴格按照規(guī)程操作，對儀器定期進行維護和保養(yǎng)，在保證儀器正常運行的同時，如檢測過程中出現(xiàn)血小板計數(shù)偏低或偏高的現(xiàn)象，在儀器提示有聚集時，應及時分析可能的影響因素，結合臨床資料，進行手工復查，必要時涂片染色觀察，以及得出準確的檢驗結果，為臨床提供正確的診治依據(jù)，以避免血小板假性異常造成臨床誤診。

［1］ 樸文花．假性血小板減少癥的最新研究進展［J］．寧夏醫(yī)學雜志，2012，34(1):78

［2］ 鄧宗奎．血液分析儀血小板計數(shù)的影響因素與全程質(zhì)量控制［J］．檢驗醫(yī)學與臨床，2009，6(19):1688

［3］ 劉惠蘭，黃美群，陳漢紅，等．EDTA－K2引發(fā)的血小板假性減少原因探討［J］．國際檢驗醫(yī)學雜志，2012，33(7):879

［4］ 李以貴，李 濤，顏保松．阻抗法小紅細胞致血小板假性增高分析［J］．海南醫(yī)學，2005，16(12):146