艾地云 彭公寬 羅玲 王紅琳

摘要：湖北省漢川市某蛋鴨場發(fā)生了一起18日齡麻鴨精神沉郁、食欲減退、嗜睡、縮頸、拉稀及神經(jīng)癥狀為特點的疫病，經(jīng)流行病學調(diào)查、臨床癥狀觀察、病理剖檢、病原分離鑒定及動物回歸試驗確診為Ⅰ型鴨疫里默氏桿菌和O78型大腸桿菌混合感染。

關(guān)鍵詞：鴨疫里默氏桿菌；大腸桿菌；診斷

中圖分類號：S858.32文獻標識碼：B文章編號：1007-273X（2012）11-0025-02

鴨疫里默氏桿菌（Riemerella anatipestifer，RA）和致病性大腸埃希氏菌（Escherichia coli，E. coli）是鴨場最常見的2種致病性細菌，它們在臨床上常表現(xiàn)為混合感染，對養(yǎng)鴨業(yè)的危害較大[1-3]。禽類鴨疫里默氏桿菌存在多種血清型，致病性大腸埃希氏菌的血清型更多，且二者的血清型之間不存在交叉保護，均易產(chǎn)生耐藥性。而雛鴨感染這2種細菌后的臨床癥狀和病理變化極為相似，給臨床診斷和防治帶來困難，因此進行實驗室的鑒別診斷十分必要。

2011年6月湖北省漢川市某蛋鴨養(yǎng)殖場發(fā)生了一起疫病，以雛鴨出現(xiàn)精神沉郁、食欲減退、嗜睡、縮頸、拉稀及神經(jīng)癥狀為特點，發(fā)病率和病死率均較高，經(jīng)對發(fā)病鴨群進行臨床癥狀觀察、病理剖檢和實驗室診斷以及動物回歸試驗，診斷為Ⅰ型鴨疫里默氏桿菌與O78型大腸桿菌混合感染。

1發(fā)病情況

2011年6月，湖北省漢川市某蛋鴨養(yǎng)殖場的

6 000羽雛麻鴨于18日齡時先后發(fā)病，隨后陸續(xù)出現(xiàn)死亡，發(fā)病2 d后病鴨數(shù)達1 200羽，其中死亡860羽，發(fā)病率和死亡率分別為20.0%、14.3%。

2臨床癥狀

病鴨表現(xiàn)為精神沉郁、食欲不振、羽毛松亂、眼鼻有黏性分泌物、喜臥及縮頸、頭頸歪斜、步態(tài)不穩(wěn)以及共濟失調(diào)、拉稀或排黃綠色糞便。

3病理變化

對病死鴨進行病理解剖發(fā)現(xiàn)其心包積液增多，渾濁，心包膜增厚、外覆蓋一層灰黃色的纖維素性滲出物；氣囊壁增厚、覆蓋一層灰黃色的纖維素性滲出物；肝腫大，表面有黃白色纖維素膜，厚薄不均，易剝離；表現(xiàn)為典型的纖維素性心包炎、氣囊炎病變。腦膜出血或充血。

4實驗室診斷

4.1細菌學診斷

無菌取病、死鴨的腦、肝組織劃線接種于TSA（含5%小牛血清）平板培養(yǎng)基，37 ℃ 5% CO2培養(yǎng)24 h?？梢妶A形凸起、邊緣整齊、半透明、有光澤、奶油狀、直徑為0.5～1.5mm的菌落，用折射光觀察可見微弱的虹光，疑似為鴨疫里默氏桿菌。挑單個可疑菌落劃線接種于麥康凱瓊脂平板培養(yǎng)基，37 ℃ 5% CO2培養(yǎng)24 h，無細菌生長。挑單個可疑菌落進行革蘭氏染色，在油鏡下觀察呈陰性的短小桿菌，不運動，無芽孢，單個或成雙存在，偶見有長絲狀，符合RA形態(tài)特征。

同時無菌取病、死鴨的腦組織劃線接種于麥康凱瓊脂平板培養(yǎng)基，37℃培養(yǎng)24 h?？梢姵始t色、邊緣整齊、表面光滑、隆起、濕潤不透明的圓形菌落，直徑約1.0～3.0 mm，疑似為大腸桿菌。挑選單個可疑菌落進行革蘭氏染色，在油鏡下觀察呈陰性、兩端鈍圓的短桿菌，多呈單個或成雙存在，無芽胞，符合

E. coli形態(tài)特征。6份病料中分離并純化疑似RA、E. coli菌株各6株。

4.2生化試驗

分別將純化的6株疑似RA菌株接種到微量發(fā)酵管觀察其生化反應(yīng)。結(jié)果顯示，葡萄糖、蔗糖、木糖、肌醇、衛(wèi)茅醇、硫化氫、檸檬酸鹽反應(yīng)皆為陰性，符合RA生化特性。

分別將純化的6株疑似E. coli菌株接種到微量發(fā)酵管觀察其生化反應(yīng)。結(jié)果顯示，葡萄搪、麥芽糖、甘露醇、木糖、阿拉伯糖反應(yīng)皆為陽性，肌醇、蔗糖、水楊苷、棉子糖、明膠、硫化氫、淀粉、檸檬酸鹽、氧化酶反應(yīng)皆為陰性，衛(wèi)茅醇不確定，符合E. coli生化特性。

根據(jù)以上培養(yǎng)特性、形態(tài)特征及生化特性，初步確定分離菌為鴨疫里默氏桿菌和大腸桿菌。

4.3血清學鑒定

用鴨疫里默氏桿菌標準陽性血清做玻板凝集試驗確定其血清型[1，3]。結(jié)果顯示6株鴨疫里默氏桿菌血清型皆為Ⅰ型。

用大腸桿菌標準陽性血清，先通過玻板凝集試驗進行初步血清學鑒定，再通過試管凝集試驗確定大腸桿菌的O型血清型[1，4]。結(jié)果顯示6株大腸桿菌血清型皆為O78型。

5動物回歸試驗

分別將純化培養(yǎng)的6株RA菌株、6株E. coli菌株混合接種到TSB（含10% FCS）培養(yǎng)液中，37℃，120r/min培養(yǎng)20 h，根據(jù)平均數(shù)法計算細菌數(shù)，再分別將病原菌懸液稀釋到109CFU/mL，以備攻毒動物用。將18只14日齡健康麻鴨分為3組，6只/組，其中2個為試驗組，1個為對照組。試驗1組每只鴨胸肌注射0.5 mL RA懸液，試驗2組每只鴨胸肌注射0.5 mL E. coli懸液，對照組每只鴨胸肌注射0.5 mL TSB（含10%FCS）培養(yǎng)液。結(jié)果發(fā)現(xiàn)攻毒后24 h試驗組鴨精神沉郁，行動遲緩，排綠色稀糞，共濟失調(diào)，頭頸震顫和昏迷。感染后48 h內(nèi)試驗1組鴨全部死亡，試驗2組鴨死亡5只。解剖病、死鴨，可見其心包積水、渾濁，心包壁增厚、氣囊壁增厚、肝腫大、腦腫大，無菌取試驗組鴨腦組織可分別分離到RA和E. coli。對照組鴨全部健活。說明分離菌為本次發(fā)病鴨的病原。

6討論

根據(jù)雛鴨發(fā)病情況、臨床癥狀、實驗室診斷及動物回歸試驗可確診該病例為Ⅰ型鴨疫里默氏桿菌和O78型大腸桿菌混合感染。

鴨疫里默氏桿菌病和鴨大腸桿菌病是臨床上最常見的2種細菌性疾病，一年四季均可發(fā)生，鴨舍及周邊衛(wèi)生條件差、外界環(huán)境變化大時更易誘發(fā)。預防該病應(yīng)做好以下幾點：①加強飼養(yǎng)管理，保障飼料營養(yǎng)，保持鴨舍通風良好，防潮濕，勤換墊草。②堅持嚴格的衛(wèi)生防疫、消毒措施和全進全出制，對發(fā)病場所及各種污染物用生石灰進行徹底消毒。③采用疫苗預防。雛鴨在5～7日齡時注射1次鴨疫里默氏桿菌-大腸桿菌二聯(lián)滅活疫苗，其保護率達85%以上[5]。因RA和E. coli各血清型之間無交叉保護性，最好選用與病原菌相同血清型的菌株做疫苗效果較好。目前湖北省農(nóng)業(yè)科學院畜牧獸醫(yī)研究所已研制出鴨疫里默氏桿菌-大腸桿菌二聯(lián)滅活疫苗，對雛鴨有較高的保護率。

治療該病應(yīng)注意：①通過藥敏試驗篩選敏感藥物進行治療，以避免無效用藥。②采取聯(lián)合、輪換、交叉等用藥形式，以避免細菌產(chǎn)生耐藥性，達到好的治療效果。

參考文獻：

[1]SAIF Y M. 禽病學[M].第十一版.蘇敬良，高福，索勛，譯.北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2005.

[2]施少華，李文揚，程龍飛，等.番鴨大腸桿菌和鴨疫里默氏菌混合感染的診治[J].中國獸醫(yī)雜志，2005，41（1）：61-62.

[3]言天久，潘懿，韋平，等.鴨疫里默氏桿菌病病原分離、血清型鑒定及病例防治報告[J].中國畜牧獸醫(yī)，2007，34（12）：99-100.

[4]于學輝，程安春，汪銘書，等.鴨源致病性大腸桿菌的血清型鑒定及其相關(guān)毒力基因分析[J].畜牧獸醫(yī)學報，2008，39（1）：53-59.

[5]蔡家利，詹曉慶.鴨疫里氏桿菌和大腸桿菌二聯(lián)滅活疫苗研究[J].中國家禽，2004，26（20）：10-12.