藍(lán)云飛 羅志峰

宮頸癌是我國(guó)婦女最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，發(fā)病率和病死率僅次于乳腺癌位居第二，它是感染性疾病，是可以預(yù)防、可以治愈的疾病[1]。近年來(lái)，我國(guó)宮頸癌的發(fā)生率有上升和年輕化趨勢(shì)[2-3]。宮頸液基薄層細(xì)胞學(xué)檢測(cè)（TCT）是細(xì)胞學(xué)發(fā)展里程碑式的突破，按照TBS（The Bethesda System）診斷標(biāo)準(zhǔn)，能為臨床早期診斷宮頸病變提供有力證據(jù)，尤其是CIN檢出率達(dá)到60%左右。宮頸細(xì)胞學(xué)是診斷和發(fā)現(xiàn)宮頸癌及其癌前病變的有效手段[7]。宮頸癌及癌前病變的早期診斷是提高宮頸癌治療率及生存率的關(guān)鍵。筆者所在醫(yī)院于2006年6月開(kāi)展TCT，用于宮頸病變的篩查檢測(cè)，因而大大提高了宮頸病變的檢出率，使患者得到早發(fā)現(xiàn)，早診斷，早治療，有效降低宮頸癌的發(fā)病率。2006年6月-2011年5月用膜式法TCT檢測(cè)，2011年6月開(kāi)始用離心法（Cytospin）TCT檢測(cè)。工作中筆者不經(jīng)意發(fā)現(xiàn)離心法TCT陽(yáng)性病例不少，隨意抽取兩個(gè)時(shí)段的相同病例數(shù)以兩種方法TCT檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行對(duì)比分析，探討不同方法對(duì)提高TCT檢出率的作用，現(xiàn)將分析結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2009年1-12月和2011年5-12月筆者所在醫(yī)院婦科門(mén)診分別有2000例患者接受TCT檢查。年齡17～73歲，平均年齡36歲，將4000例患者按時(shí)間段分成兩組，一組是用膜式法TCT檢測(cè)2000例，設(shè)為膜式組；另一組是用廣州柏嘉生物科技有限公司Cytospin TCT離心法檢測(cè)2000例，設(shè)為離心組。

1.2 方法 CytospinTCT離心法，取樣標(biāo)本保存液瓶、宮頸細(xì)胞刷、吸管和濾網(wǎng)薄膜是由廣州柏嘉生物科技有限公司提供，膜式法耗材是另外一家公司提供，標(biāo)本由清遠(yuǎn)市婦幼保健醫(yī)院婦科門(mén)診取材，病理科完成制片和同一醫(yī)生閱片。

1.3 取材方法 充分暴露宮頸后用宮頸刷緊貼宮頸管口順時(shí)針旋轉(zhuǎn)5圈，取宮頸管、宮頸移行帶及宮頸表皮細(xì)胞，然后將刷頭取下放入盛有固定液的標(biāo)本瓶中密封并送檢。取樣前若有過(guò)多黏液或分泌物必需用棉簽檫拭干凈然后再取樣，以保證取樣為宮頸細(xì)胞樣品。膜式法取材與離心法取材基本相同，只是各家細(xì)胞保存液和制片方法不同。膜式法是通過(guò)儀器高速打散標(biāo)本瓶?jī)?nèi)的細(xì)胞，然后通過(guò)負(fù)壓將細(xì)胞吸在過(guò)濾薄膜上，再將薄膜上細(xì)胞轉(zhuǎn)移印壓在玻片上，2 min制成1張薄片。而離心法是通過(guò)離心力分散、過(guò)濾、轉(zhuǎn)移等功能，精確使細(xì)胞貼附在限定區(qū)內(nèi)制成12 mm×20 mm的薄片，4 min制成6～12張薄片。兩種方法制定薄片均用95%酒精固定，巴氏染色。

1.4 診斷標(biāo)準(zhǔn) 按TBS診斷標(biāo)準(zhǔn)專(zhuān)人分類(lèi)報(bào)告。分別報(bào)告為上皮內(nèi)低度病變（LSIL）、上皮內(nèi)高度病變（HSIL）、鱗癌（SCC）、非典型腺上皮（AGC）和腺癌（AIS）。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采取SPSS 11.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料采取字2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2009年2000例宮頸細(xì)胞標(biāo)本采用膜式法TCT檢測(cè)，標(biāo)本滿意例數(shù)1910例，滿意率為95.5%（1910/2000）。其中低度鱗狀上皮內(nèi)病變（LSIL）236例，檢出率為11.8%（236/2000）；高度鱗狀上皮內(nèi)病變（HSIL）27例，檢出率為1.35%（27/2000）；鱗癌1例，檢出率為0.05%（1/2000）；非典型腺上皮（AGC）0例，檢出率為0（0/2000）；腺癌0例，檢出率為0（0/2000）；2011年2000例宮頸細(xì)胞標(biāo)本采用離心法（Cytospin）TCT檢測(cè)，標(biāo)本滿意數(shù)有1997例，標(biāo)本滿意率為99.9%（1997/2000）。其中低度鱗狀上皮內(nèi)病變（LSIL）305例，檢出率為15.3%（305/2000）；高度鱗狀上皮內(nèi)病變（HSIL）40例，檢出率為2%（40/2000）；鱗癌（SCC）3例，檢出率為0.15%（3/2000）；非典型腺上皮（AGC）6例，檢出率為0.3%（6/2000）；腺癌（AIS）2例，檢出率為0.1%（2/2000）。LSIL、HSIL、SCC、AGC、AIS均有病理組織學(xué)證實(shí)。兩組宮頸病變檢出與標(biāo)本滿意情況見(jiàn)表1。

表1 兩組宮頸病變檢出與標(biāo)本滿意情況 例（%）

3 討論

宮頸癌的早診、早治是提高宮頸癌治愈率及生存率的關(guān)鍵，而細(xì)胞學(xué)檢測(cè)是宮頸癌早期病變篩查的主要手段。我國(guó)是一個(gè)有13 億人口的發(fā)展中國(guó)家，國(guó)民的生活水平在發(fā)達(dá)的東部沿海地區(qū)和人口眾多的西部欠發(fā)達(dá)地區(qū)之間很不一致，就是東部發(fā)達(dá)地區(qū)也有很大的差別，因此在考慮大眾的健康問(wèn)題時(shí)，必須要采用適宜的醫(yī)學(xué)技術(shù)，將一些經(jīng)濟(jì)實(shí)用型技術(shù)廣泛引入貧困人群的疾病篩查中[7]。Cytospin TCT細(xì)胞學(xué)技術(shù)其保存液能很好保存宮頸各類(lèi)病變細(xì)胞，在4 min內(nèi)可同時(shí)制作6～12張薄層長(zhǎng)方形的細(xì)胞片，細(xì)胞分布均勻，巴氏染色效果好，尤其適合工作量大或體檢任務(wù)多的單位使用，避免單張制片的繁瑣[4]。在實(shí)際工作中體會(huì)到柏嘉公司這一套儀器及耗材經(jīng)濟(jì)、實(shí)惠，制片簡(jiǎn)便快捷，細(xì)胞薄片達(dá)到TBS診斷標(biāo)準(zhǔn)的要求，非常實(shí)用于我國(guó)、尤其是西部欠發(fā)達(dá)地區(qū)開(kāi)展宮頸癌篩查使用，可替代傳統(tǒng)的宮頸細(xì)胞涂片，造福于廣大的婦女同胞。

TCT是近十年發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)新的檢測(cè)技術(shù)，檢測(cè)方法有膜式法、沉淀法和離心法。膜式法制片過(guò)程分為3個(gè)步驟：（1）分散：是儀器旋轉(zhuǎn)瓶?jī)?nèi)的過(guò)濾柱狀桶分離隨機(jī)聚合在一起的細(xì)胞微粒。（2）收集：輕微的負(fù)壓作用于濾膜上，將細(xì)胞吸附在濾膜表面。（3）轉(zhuǎn)送：過(guò)濾柱狀桶又轉(zhuǎn)到玻片上，由于細(xì)胞的自然吸附性和玻片的靜電作用，細(xì)胞對(duì)玻片比對(duì)濾膜更具附著力。玻片與濾膜分開(kāi)并放入固定液容器中[7]。我們隨意用膜式法TCT檢測(cè)2009年的病例2000例，用離心法TCT檢測(cè)2011年的病例2000例，檢測(cè)結(jié)果對(duì)比分析發(fā)現(xiàn)，對(duì)LSIL、HSIL、鱗癌、非典型腺上皮、腺癌陽(yáng)性檢出率和標(biāo)本滿意率存在差異。膜式法與離心法的臨床取材方法步驟相同，標(biāo)本保存都是濕保存，只是保存液的量不同，離心法的保存液10 ml量少使標(biāo)本細(xì)胞濃度高，同時(shí)保存液有一定去除血液、黏液、非診斷性雜質(zhì)的作用，而膜式法保存液20 ml量多使標(biāo)本細(xì)胞濃度低，我們認(rèn)為這可能是導(dǎo)致兩法制片的滿意度差異大的重要原因。

對(duì)宮頸癌及癌前病變的檢出率Cytospin TCT離心法明顯高于膜式法TCT，許多病理界同道從不同方向研究得出類(lèi)似結(jié)果。尤燕等研究認(rèn)為Cytospin離心式液基薄層細(xì)胞學(xué)檢測(cè)（TCT）對(duì)宮頸癌和CIN的陽(yáng)性檢出率高，因此可以把TCT作為首選的宮頸癌普查方法，不僅適用于體檢，而且具有重要的臨床實(shí)用價(jià)值[4]。孫藝等研究亦認(rèn)為Cytospin TCT細(xì)胞技術(shù)能明顯提高宮頸異常細(xì)胞的檢出率，且與病理診斷有較高的一致性，是宮頸病變篩查的有效方法，具有重要的臨床實(shí)用價(jià)值[5-6]。任麗芳等用改良CytospinTCT作免疫組化得出改良cytospin法優(yōu)于TP （液基薄層制片法，Thinprep，TP）法行免疫細(xì)胞化學(xué)染色[5]。筆者完全贊同支持上述論文的觀點(diǎn)，20世紀(jì)中葉，第一臺(tái)Cytospin問(wèn)世，作為液基細(xì)胞薄片制片儀，開(kāi)創(chuàng)了細(xì)胞離心涂片機(jī)的先河。迄今，世界各地逾16 000多所實(shí)驗(yàn)室在使用Cytospin。Cytospin以其獨(dú)特的制片原理，精確地控制細(xì)胞離心力并在限定區(qū)域內(nèi)作薄層制片，成為近40年來(lái)細(xì)胞學(xué)薄層制片技術(shù)倍受信賴的儀器。馬博文[7]教授亦撰文指出“離心法即Cytospin離心機(jī)式制片裝置，又稱細(xì)胞離心涂片機(jī)（Cytospin），是利用離心旋轉(zhuǎn)的原理制備細(xì)胞學(xué)涂片的一種儀器，由于其兼有離心、過(guò)濾、旋轉(zhuǎn)、轉(zhuǎn)送等綜合功能，成為細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)室必備的儀器設(shè)備”。

為何兩種方法在非典型腺上皮和腺癌的檢出率上存在明顯差異（P<0.05），筆者認(rèn)為是制片方法不同所致，膜式法是通過(guò)儀器高速旋轉(zhuǎn)打散標(biāo)本瓶?jī)?nèi)的細(xì)胞，然后通過(guò)負(fù)壓將細(xì)胞吸在過(guò)濾薄膜上，再將薄膜上細(xì)胞印壓在玻片上。在儀器高速作用下，對(duì)腺上皮細(xì)胞的結(jié)構(gòu)容易破壞，這樣不利于對(duì)非典型腺上皮和腺癌細(xì)胞的辨認(rèn)。而離心法是通過(guò)離心力分散、過(guò)濾、轉(zhuǎn)移標(biāo)本中的細(xì)胞成分，使其在一限定范圍12 mm×20 mm形成細(xì)胞薄片，因此對(duì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)破壞少，宮頸腺上皮病變比較容易發(fā)現(xiàn)（圖1、2）。因此，離心法TCT技術(shù)對(duì)診斷宮頸非典型腺上皮和腺癌病變有一定優(yōu)勢(shì)。從兩組研究結(jié)果分析可以看出，離心法TCT標(biāo)本滿意率亦比膜式法高。宮頸癌及癌前病變陽(yáng)性檢出率明顯優(yōu)于膜式法TCT。

圖1 左下圖腺細(xì)胞輕度異形

圖2 腺細(xì)胞明顯異形，組織活檢為腺癌

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