劉麗娜，牛曉東，李 偉，李艷霞

熱休克蛋白27在前列腺癌中的表達(dá)及臨床意義

劉麗娜，牛曉東，李 偉，李艷霞

目的 探討熱休克蛋白27(HSP27)在前列腺癌組織中的表達(dá)及臨床意義。方法 應(yīng)用免疫組化(En-Vision)法分別檢測(cè)前列腺增生和前列腺上皮內(nèi)瘤變各30例及前列腺癌70例組織中HSP27的表達(dá)情況。結(jié)果HSP27表達(dá)陽性率前列腺增生組為6．67%，前列腺上皮內(nèi)瘤變組中為26．67%，前列腺癌組中為60．00%，3組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0．01)。HSP27的表達(dá)水平低分化組高于高－中分化組，Ⅲ-Ⅳ組高于Ⅰ-Ⅱ組，有骨轉(zhuǎn)移組高于無骨轉(zhuǎn)移組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0．01，P＜0．05)。結(jié)論 HSP27可能參與了前列腺癌發(fā)生發(fā)展的演變過程，其過表達(dá)不僅預(yù)示患者預(yù)后差，而且也為臨床的綜合治療提供理論依據(jù)。

前列腺腫瘤;熱休克蛋白質(zhì)類;免疫組織化學(xué)

前列腺癌的發(fā)生、發(fā)展是一個(gè)多步驟、多因素相互作用的復(fù)雜過程，各種刺激都有可能導(dǎo)致機(jī)體細(xì)胞的應(yīng)激反應(yīng)。有資料顯示，熱休克蛋白27(HSP27)不僅能使細(xì)胞免受應(yīng)激損傷，而且還參與細(xì)胞增殖、分化及細(xì)胞凋亡的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)等［1］。本研究探討HSP27在不同前列腺病變中的表達(dá)，分析其與前列腺癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本來源及病例資料 選擇我院2009年2月—2010年3月經(jīng)臨床病理醫(yī)生診斷為前列腺增生和前列腺上皮內(nèi)瘤變各30例及前列腺癌70例。前列腺增生組年齡42～73歲，平均57歲;前列腺上皮內(nèi)瘤變組年齡45～75歲，平均60歲;前列腺癌組年齡55～76歲，平均65歲。術(shù)前均未接受化療、激素治療及放療。依據(jù)前列腺癌Gleason分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)［2］，本組高 －中分化 34例，低分化 36例;臨床pTNM 分期［2］:Ⅰ-Ⅱ期31 例，Ⅲ-Ⅳ期 39 例;骨轉(zhuǎn)移38例，無骨轉(zhuǎn)移32例。組織經(jīng)甲醛溶液常規(guī)固定，石蠟包埋，連續(xù)切片4 μm，裱于經(jīng)烷基酚聚乙烯醚(APES)處理的載玻片上，65℃烤箱烤片過夜，防止脫片、備用。

1.2 試劑和方法 HSP27鼠抗人即用型單克隆抗體、免疫組化試劑盒及DAB底物顯色劑均購自福州邁新生物技術(shù)有限公司。采用EnVision兩步法，步驟參照檢測(cè)試劑盒說明書進(jìn)行。

1.3 免疫組化結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn) HSP27染色為棕色顆粒，定位于胞漿，少數(shù)位于胞核內(nèi)。在高倍鏡下隨機(jī)取10個(gè)不同視野，各計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞，結(jié)果進(jìn)行半定量分析。對(duì)細(xì)胞染色強(qiáng)度進(jìn)行評(píng)分:無色為0分，淡黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分;對(duì)著色細(xì)胞所占百分比進(jìn)行評(píng)分:0分為無細(xì)胞著色，1分為著色細(xì)胞≤10%，2分為著色細(xì)胞占11% ～50%，3分為著色細(xì)胞占51% ～75%，4分為著色細(xì)胞＞75%;結(jié)果取兩者評(píng)分之乘積，染色強(qiáng)度與陽性細(xì)胞百分比的乘積＞3分為免疫反應(yīng)陽性，0～3分判為陰性［3］。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 17．0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料以率(%)表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，α =0．05 為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。

2 結(jié)果

2.1 HSP27在不同前列腺病變組織中表達(dá)情況

前列腺增生組中，HSP27呈現(xiàn)棕黃色染色2例，陽性率為6．67%(2/30);前列腺上皮內(nèi)瘤變組中，HSP27呈現(xiàn)棕黃色染色8例，陽性率為26．67%(8/30);前列腺癌組中，HSP27呈現(xiàn)棕黃色染色42例，陽性率為60．00%(42/70)，3組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=27．78，P ＜0．01)。見圖1。

2.2 HSP27表達(dá)與前列腺癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系 HSP27的表達(dá)低分化組高于高－中分化組，Ⅲ-Ⅳ組高于Ⅰ-Ⅱ組，有骨轉(zhuǎn)移組高于無骨轉(zhuǎn)移組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＜0．01，P ＜0．05);HSP27的表達(dá)在＞65歲組中的表達(dá)高于≤65歲組，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0．05)。見表1。

表1 熱休克蛋白27表達(dá)與前列腺癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系

3 討論

HSP又稱應(yīng)激蛋白，根據(jù)同源性以及相對(duì)分子質(zhì)量的大小可分為 HSP110、HSP90、HSP70、HSP60、HSP27等小分子HSP及泛素等幾個(gè)家族［4-5］。其在體內(nèi)可與多種蛋白質(zhì)形成復(fù)合體，陪伴蛋白分子在細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)、跨膜，參與蛋白質(zhì)的折疊與伸展、多聚復(fù)合體的組裝，發(fā)揮其調(diào)節(jié)靶蛋白的作用，但又不改變靶蛋白的結(jié)構(gòu)，故HSP又被稱作分子伴侶［6］。有資料顯示，HSP27分為構(gòu)成型和誘導(dǎo)型兩種，而構(gòu)成型在生理狀態(tài)下低水平表達(dá)，維持細(xì)胞的基本活動(dòng)并與細(xì)胞的增殖、分化，特別是神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育密切相關(guān);誘導(dǎo)型主要在外界環(huán)境的刺激下表達(dá)，具有保護(hù)細(xì)胞的功能［7］。本研究結(jié)果顯示，HSP27在前列腺癌組中的表達(dá)陽性率高于前列腺上皮內(nèi)瘤變組和前列腺增生組，且在前列腺上皮內(nèi)瘤變組中的表達(dá)陽性率又高于前列腺增生組，提示隨著前列腺病變的演變，HSP27的表達(dá)陽性率不斷升高，進(jìn)一步推測(cè)，HSP27有可能參與了前列腺癌的演變過程。有研究表明，HSP27在高分化舌鱗癌組織中的表達(dá)水平最高，低分化組織中表達(dá)水平最低;不同臨床分期以及是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與HSP27的表達(dá)無明顯相關(guān)［8］。李冠雄等［9］研究發(fā)現(xiàn)，HSP27 的表達(dá)與胃癌的分化程度相關(guān)，但與性別、年齡和浸潤(rùn)深度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關(guān)。在肝細(xì)胞癌組織中，HSP27的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤分化程度有關(guān)［10］。本研究結(jié)果顯示，HSP27的表達(dá)陽性率低分化組高于高－中分化組，Ⅲ-Ⅳ組高于Ⅰ-Ⅱ組，有骨轉(zhuǎn)移組高于無骨轉(zhuǎn)移組。其機(jī)制可能有以下幾方面:①低分化組癌細(xì)胞大量增生、分化程度低易造成組織缺血、缺氧等，進(jìn)一步刺激了 HSP27的表達(dá);②HSP27通過抑制Caspase而發(fā)揮抑制細(xì)胞凋亡的作用［11］;③腫瘤組織中過表達(dá)的HSP27對(duì)腫瘤細(xì)胞有保護(hù)作用，如可增加某些腫瘤細(xì)胞的抵御能力并逃離免疫系統(tǒng)介導(dǎo)的凋亡過程［12］。

總之，HSP27在一定程度參與了前列腺癌的發(fā)生發(fā)展，同時(shí)又與其他細(xì)胞因子相互作用進(jìn)一步加速了癌細(xì)胞的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，所以，用藥物阻斷HSP27的過表達(dá)也許能在一定程度緩解癌細(xì)胞的生物學(xué)行為。有關(guān)HSP27疫苗的研究及HSP-肽復(fù)合物用于腫瘤的免疫治療的報(bào)道，但這些成果還有待進(jìn)一步深入研究。

［1］Latchman D S．HSP27 and cell survival in neurons［J］．Int J Hyperthermia，2005，21(5):393-402．

［2］馮曉莉，何群，陸敏，等．泌尿系統(tǒng)及男性生殖器官腫瘤病理學(xué)和遺傳學(xué)［M］．北京:人民衛(wèi)生出版社，2006:176．

［3］許良中，楊文濤．免疫組織化學(xué)反應(yīng)結(jié)果的判斷標(biāo)準(zhǔn)［J］．中國(guó)癌癥雜志，1996，6(4):229-231．

［4］劉濤，田聆，魏于全，等．熱休克蛋白與腫瘤的研究進(jìn)展［J］．華西醫(yī)學(xué)，2004，19(3):495-497．

［5］彭曉峰，余志金，許岸高．HSP27表達(dá)與胃腺癌預(yù)后相關(guān)性研究［J］．中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)生，2011，49(14):1-3．

［6］屈英嬌，蘇然，席如月，等．熱休克蛋白與腫瘤治療［J］．臨床薈萃，2011，26(4):367-368．

［7］宋鐵芳，楊婷，李佩玲．熱休克蛋白27與惡性腫瘤關(guān)系的研究進(jìn)展［J］．實(shí)用腫瘤學(xué)雜志，2008，22(5):474-477．

［8］張寧寧，盛士虎，陳丹，等．HSP27在舌鱗癌中的表達(dá)及意義［J］．北京口腔醫(yī)學(xué)，2010，18(3):146-148．

［9］李冠雄，李萍，楊中民，等．HSP27與Survivin在胃癌中的表達(dá)及意義［J］．陜西醫(yī)學(xué)雜志，2010，39(1):93-96．

［10］郭威，陳謙，李淑群，等．肝細(xì)胞癌組織中HSP27、VEGF的表達(dá)變化及意義［J］．山東醫(yī)藥，2011，51(30):13-14．

［11］Rocchi P，Jugpal P，So A，et al．Small interference RNA targeting heat shock protein 27 inhibits the growth of prostatic cell lines and induces apoptosis via caspase-3 activation in vitro［J］．BJU Int，2006，98(5):1082-1089．

［12］Xu L，Chen S，Bergan R C．MAPKAPK2 and HSP27 are downstream effectors of p38 MAP kinase-mediated matrix metalloproteinase type 2 activation and cell invasion in human prostate cancer［J］．Oncogene，2006，25(21):2987-2998．

Expression and Clinicopathological Significance of HSP27 in Adenocarcinoma of Prostate Tissue

LIU Li-naa，NIU Xiao-dongb，LI Weib，LI Yan-xiaa(The 251stHospital of PLA a．Medical Examination Center;b．Department of Pathology，Zhangjiakou，Hebei 075000，China)

Objective To explore the expressions and clinicopathological significance of HSP27 in adenocarcinoma of prostate tissue．Methods The expression of HSP27 was respectively detected on prostatic hyperplasia(30 cases)，prostatic intraepithelial neoplasm(30 cases)and adenocarcinoma of prostate(70 cases)by immunohistochemisty(EnVision)．Results The positive rate of HSP27 in prostatic hyperplasia was 6．67%，in prostatic intraepithelial neoplasm 26．67%and in adenocarcinoma of prostate 60．00%，and the differences were statistically significant(P ＜0．01)．The expression of HSP27 in poorly differentiated group was higher than that of well-moderately differentiated group，Ⅲ-Ⅳgroup higher thanⅠ-Ⅱ group，bony metastasis group higher than nobony metastasis group，and the differences were statistically significant(P ＜0．01，P ＜0．05)．Conclusion HSP27 takes a part in the occurrence and development of adenocarcinoma of prostate，and its over expression is not only prognosticates the poorprognosis，but also provides theoretical basis for clinical combined modality therapy．

Prostatic neoplasms;Heat-Shock proteins;Immunohistochemistry

R737．25;R365

A

2095-140X(2012)08-0020-03

10．3969/j．issn．2095-140X．2012．08．006

2012-05-11 修回時(shí)間:2012-06-07)

075000河北張家口，解放軍251醫(yī)院體檢中心(劉麗娜、李艷霞)，病理科(牛曉東、李偉)

李偉，電話:18932738821;E-mail:liwei-324@163．com