李 勇 孟艷莉 白修云 張甦寅 鄭紅松 劉旭明

(1.國家蛋品工程技術(shù)研究中心，北京 102115；2.北京德青源農(nóng)業(yè)科技股份有限公司，北京102115)

玉米和小麥是動物飼料原料中兩種主要的能量飼料。歐洲是小麥主產(chǎn)區(qū)，在歐洲動物日糧較多用小麥型日糧。在我國玉米和小麥同屬主產(chǎn)作物，但是由于玉米價格長期低于小麥，因而在我國玉米成為動物日糧中的主要能量飼料原料。但是，自2010年3月份以來，玉米和小麥價格出現(xiàn)倒掛，小麥價格開始低于玉米，同時由于小麥中粗蛋白含量較高，在動物日糧中應(yīng)用能夠較大程度地降低動物養(yǎng)殖成本，因而近來，小麥型日糧開始廣泛應(yīng)用。小麥與玉米雖然都屬能量飼料，但是小麥中富含抗營養(yǎng)因子——可溶性非淀粉多糖，研究顯示，其在動物腸道遇水后導致食糜變黏，進而能夠阻礙營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，降低營養(yǎng)物質(zhì)的消化率（Petersen 等，1999；Karimi等，2007），影響腸道黏膜結(jié)構(gòu)及微生物種類與數(shù)量，甚至能夠影響動物免疫功能(王金全等,2005；丁雪梅等,2009),為此使用小麥作為動物日糧能量飼料時，通常需要添加非淀粉多糖酶制劑以降低非淀粉多糖的抗營養(yǎng)作用。然而,目前市場上非淀粉多糖酶制劑種類較多,質(zhì)量參差不齊,因此,為了了解目前市場上主要酶制劑產(chǎn)品的效果,同時也為了篩選一種效果較好的酶制劑產(chǎn)品，本試驗選擇行業(yè)內(nèi)具有較大影響力的7家公司的小麥專用酶制劑產(chǎn)品,研究了小麥日糧添加不同酶制劑產(chǎn)品對4～9周齡蛋雞生產(chǎn)性能、免疫功能及營養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響,旨在為蛋雞生產(chǎn)中小麥日糧的應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 酶制劑產(chǎn)品

A、B、C、D、E、F、G 7 種酶制劑產(chǎn)品分別來自于 7家不同酶制劑公司，其中A、B、C、D為國產(chǎn)酶制劑產(chǎn)品，E、F、G為進口酶制劑產(chǎn)品，酶制劑添加量按照各公司推薦量添加，分別為 200、200、200、200、200、100、250 g/t。

1.2 試驗動物與分組

選擇體重相近的21日齡海蘭褐青年蛋雞1 120只，隨機分為8個處理，每個處理7個重復，每個重復20只雞。其中對照組蛋雞飼喂玉米-豆粕型基礎(chǔ)日糧，7個試驗組蛋雞分別飼喂小麥型基礎(chǔ)日糧+不同酶制劑產(chǎn)品的試驗日糧，酶制劑添加量參考各酶制劑供應(yīng)商推薦添加量。試驗周期為6周。

1.3 日糧配制

按照海蘭育種公司推薦的飼養(yǎng)標準分別配制4～6周和7～9周海蘭青年蛋雞玉米-豆粕型日糧和小麥型基礎(chǔ)日糧。小麥型基礎(chǔ)日糧中,小麥添加比例為70%,具體日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 日糧組成及營養(yǎng)水平

1.4 飼養(yǎng)管理

蛋雞飼養(yǎng)試驗在北京市延慶縣張山營鎮(zhèn)北京德青源生態(tài)園試驗雞場進行，蛋雞采用三層全重疊籠養(yǎng)方式全封閉飼養(yǎng)，舍內(nèi)配置風機、濕簾及自動清糞設(shè)備，飼養(yǎng)期間蛋雞自由采食和飲水，其它飼養(yǎng)管理及免疫程序按照海蘭育種公司推薦的常規(guī)飼養(yǎng)管理程序及免疫程序進行。

1.5 樣品采集與指標測定

1.5.1 生產(chǎn)性能指標測定

分別于蛋雞 21、28、35、42、49、56、63 日齡早 8:00，以重復為單位對雞只進行空腹稱重，同時記錄雞只采食量，計算雞只平均體重、日增重、日采食量及料重比。

1.5.2 免疫功能指標測定

分別于蛋雞35、49、63日齡早8:00，每個重復選取試雞2只，翅下靜脈采血2 ml促凝制備血清，-20℃保存，待測新城疫、禽流感H5-4及H9抗體滴度，抗體滴度采用血紅細胞凝集抑制試驗測定；另外，于63日齡早8:00，每個重復選取試雞2只，采血2 ml抗凝制備全血，4 h內(nèi)分離T淋巴細胞培養(yǎng)，測定T淋巴細胞轉(zhuǎn)化率，具體測定方法參考劉永祥等（2012）方法。具體如下：將100 μl淋巴細胞懸液加入96孔細胞培養(yǎng)板，再加入含絲裂原伴刀豆球蛋白（ConA，終濃度45 μg/ml）,對照組則加等體積的不含絲裂原的培養(yǎng)液,培養(yǎng)體系每孔共200 μl，3個重復。于 5%CO2、37 ℃條件下培養(yǎng)68 h。在培養(yǎng)結(jié)束后，每孔加入20 μl CCK溶液，繼續(xù)培養(yǎng)2 h。之后用酶標儀于420 nm波長下測定OD值。

1.5.3 粗蛋白消化率測定

消化試驗于蛋雞57日齡開始進行，預(yù)試3 d，正試4 d。粗蛋白消化率采用TiO2作為外源指示劑的方法測定。試驗日糧中TiO2的添加量為0.4%。正試期前禁飼12 h，以盡可能排空雞只腸道食糜。糞樣收集于蛋雞60、61、62、63日齡早8:00以重復為單位進行，糞樣采用活動糞盤墊塑料布的方法收集，具體如下：取出糞盤后先噴灑10%稀HCl，之后以重復為單位混勻糞樣，并按一定比例取樣，期間揀出羽毛廢料等雜物,4 d收集的糞樣混合均勻后，于65℃烘干制備風干樣，待測TiO2及粗蛋白含量等指標。TiO2測定參考鄧雪娟等（2008）方法，粗蛋白含量采用凱氏定氮儀測定。粗蛋白消化率計算公式如下：

粗蛋白消化率(%)=[1-（日糧TiO2含量×糞粗蛋白含量）/(糞 TiO2含量×日糧粗蛋白含量)]×100。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計

利用統(tǒng)計軟件SPSS16.0中One-Way ANOVA模塊對試驗數(shù)據(jù)進行單因素方差分析,數(shù)據(jù)以“Mean±SE”表示，顯著水平設(shè)為P＜0.05。

2 結(jié)果

2.1 不同酶制劑產(chǎn)品對青年蛋雞生產(chǎn)性能的影響（見表2）

表2 不同酶制劑產(chǎn)品對蛋雛雞生產(chǎn)性能的影響

由表2可知，對照組及各酶制劑添加組青年蛋雞4～6周齡及7～9周齡平均體重、日增重、日耗料量及料重比均無顯著差異(P＞0.05)。

2.2 不同酶制劑產(chǎn)品對青年蛋雞免疫功能的影響（見表 3、表 4）

由表3可知，對照組及不同酶制劑添加組青年蛋雞5、7及9周齡末的ND、禽流感H5-4及H9抗體水平均無顯著差異（P＞0.05）。由表4可知，對照組及不同酶制劑添加組青年蛋雞9周齡末外周血液T淋巴細胞轉(zhuǎn)化率無顯著差異（P＞0.05）。

2.3 不同酶制劑產(chǎn)品對青年蛋雞小麥型日糧粗蛋白消化率的影響（見表5）

由表5可知，對照組及酶制劑添加組之間青年蛋雞日糧粗蛋白消化率存在顯著差異，其中，A酶制劑組青年蛋雞日糧粗蛋白消化率顯著低于對照組粗蛋白消化率（P＜0.05），而其它各組與對照組相比青年蛋雞日糧粗蛋白消化率無顯著差異（P＞0.05）；不同酶制劑組之間，D、E、F酶制劑組日糧粗蛋白消化率無顯著差異（P＞0.05），D和E酶制劑組日糧粗蛋白消化率顯著高于A、B、C、G酶制劑組（P＜0.05），B、C、F、G 酶制劑組間粗蛋白消化率無顯著差異（P＞0.05），而F、G組粗蛋白消化率顯著高于A組（P＜0.05），A、B、C 酶制劑組間粗蛋白消化率無顯著差異（P＞0.05）。

表3 不同酶制劑產(chǎn)品對青年蛋雞抗體水平的影響

表4 不同酶制劑產(chǎn)品對9周齡末蛋雞外周

血液T淋巴細胞轉(zhuǎn)化率(SI)的影響(%)

表5 不同酶制劑產(chǎn)品對蛋雞日糧粗蛋白消化率的影響(%)

3 討論

盡管小麥在動物日糧中的應(yīng)用目前已有較多的研究，然而由于小麥在動物日糧中的應(yīng)用效果受多種因素的影響，如動物種類、品種、年齡、健康狀況、飼養(yǎng)環(huán)境及酶制劑質(zhì)量等，為了確定市場上主要小麥酶制劑產(chǎn)品的應(yīng)用效果,本試驗以4～9周海蘭褐青年蛋雞為研究對象，研究了小麥添加70%，同時添加不同酶制劑產(chǎn)品對青年蛋雞生長性能、免疫功能及日糧粗蛋白消化率的影響，旨在為小麥在青年蛋雞日糧中應(yīng)用奠定理論基礎(chǔ)。

3.1 不同酶制劑產(chǎn)品對青年蛋雞生產(chǎn)性能的影響

玉米、小麥在動物飼料中同屬能量飼料，較多的研究表明，在使用酶制劑的前提下利用小麥替代玉米作為動物日糧的能量來源，不僅能夠使動物生長性能達到與飼喂玉米同樣的效果，甚至能超過使用玉米作為能量來源的日糧的飼喂效果。何艷平等(2006)、孫永剛等（2010）在肉仔雞上的研究均表明，小麥日糧添加木聚糖酶后，其在生產(chǎn)性能方面的效果超過了玉米-豆粕型日糧的飼喂效果。王繼強等（2004）在蛋雞上的研究也表明，日糧中小麥添加量達到70%，在使用酶制劑的條件下，飼喂小麥日糧蛋雞的生產(chǎn)性能等于甚至高于玉米對照組蛋雞的生產(chǎn)性能。本試驗在4～9周齡海蘭褐青年蛋雞上的研究結(jié)果顯示，日糧中小麥添加量達到70%，幾乎完全替代玉米，同時使用7種公司小麥專用酶制劑產(chǎn)品，按照推薦量添加，飼喂小麥日糧蛋雞的體重、日增重、日耗料量及料重比指標均與飼喂玉米-豆粕型日糧蛋雞的各項指標無顯著差異，一方面表明在使用酶制劑的前提下，小麥日糧可以達到與玉米-豆粕型日糧同樣的飼喂效果，而且小麥幾乎可以完全替代玉米；另一方面也表明，國產(chǎn)小麥酶制劑在蛋雞小麥日糧上應(yīng)用的促生長效果與進口酶制劑的應(yīng)用效果沒有差異。

3.2 不同酶制劑產(chǎn)品對青年蛋雞免疫功能的影響

玉米中富含亞油酸,許多研究顯示,亞油酸能夠增強動物機體免疫功能(劉永祥等,2012；趙占宇等,2009；賴長華等，2004)，而小麥中亞油酸含量極少，因此小麥替代玉米，有可能對動物免疫功能產(chǎn)生不利影響，基于此，本試驗研究了小麥替代玉米對青年蛋雞免疫功能的影響。動物機體特異性免疫在動物免疫功能上具有極其重要的意義，能夠直接反映動物機體的免疫功能。而動物特異性免疫主要包括兩個方面，一方面是動物特異性體液免疫，可以通過檢測血清抗體免疫水平來反映，另一方面是動物特異性細胞免疫，可以通過檢測動物外周血液T淋巴細胞轉(zhuǎn)化率來反映。本試驗分別研究了小麥日糧對海蘭褐青年蛋雞的抗體水平和T淋巴細胞轉(zhuǎn)化率產(chǎn)生的影響,結(jié)果顯示,小麥日糧添加酶制劑與玉米-豆粕型日糧相比，對海蘭褐青年蛋雞 5、7、9周齡末 ND、H5-4、H9抗體水平及 9周齡末外周血T淋巴細胞轉(zhuǎn)化率均無顯著影響。這一結(jié)果與前人研究結(jié)果不盡一致。王金全等（2005）、丁雪梅等（2009）在肉仔雞上的研究結(jié)果顯示，小麥日糧添加酶制劑能使肉雞免疫功能優(yōu)于玉米對照組肉雞免疫功能，分析可能是由于酶制劑提高了動物營養(yǎng)物質(zhì)消化率進而改善了動物免疫功能，而本試驗結(jié)果并未顯示小麥日糧添加酶制劑與玉米對照組相比能夠提高蛋雞免疫功能，但是結(jié)果表明，與對照組相比，使用酶制劑條件下，小麥日糧對蛋雞免疫功能無不利影響。之所以造成與王金全等（2005）、丁雪梅等（2009）研究結(jié)果不完全一致，分析原因可能是由于本試驗中蛋雞在新建雞舍中飼養(yǎng)，同時完善的風機、濕簾及自動清糞等環(huán)控設(shè)備保證了蛋雞生長在良好的飼養(yǎng)環(huán)境中，因此未能完全體現(xiàn)出酶制劑的使用效果所致。

3.3 不同酶制劑產(chǎn)品對青年蛋雞日糧粗蛋白消化率的影響

目前，市場上所使用的小麥日糧專用酶制劑多為復合型酶制劑，除了含有能消除非淀粉多糖的主要酶制劑木聚糖酶成分外，多數(shù)還包括了蛋白酶、淀粉酶甚至甘露聚糖酶等酶制劑，因此，小麥日糧中添加酶制劑提高日糧營養(yǎng)成分消化率的功能大大增強，本研究結(jié)果顯示，除A酶制劑外，其余6種酶制劑使小麥日糧粗蛋白消化率達到甚至超過了對照組日糧粗蛋白消化率，上述結(jié)果表明，除A酶制劑外，其它6種酶制劑均能消除小麥中非淀粉多糖造成的腸道食糜變黏，進而阻止營養(yǎng)物質(zhì)在腸道內(nèi)消化的不利影響。這一結(jié)果也與多數(shù)研究報道的結(jié)果一致，如王金全等(2005)、王永偉等(2010)分別報道小麥日糧添加木聚糖酶能夠提高日糧粗蛋白和能量的表觀消化率。本試驗中A酶制劑組蛋雞日糧粗蛋白消化率未達到與對照組同樣的水平可能與其包含的成分有關(guān)。另外，盡管研究結(jié)果顯示與對照組相比，D和E兩種酶制劑提高了小麥日糧粗蛋白消化率，但并未最終提高蛋雞生產(chǎn)性能，分析可能與兩方面原因有關(guān)，一方面與消化吸收后營養(yǎng)物質(zhì)的代謝效率有關(guān)；另一方面也與本試驗良好的飼養(yǎng)環(huán)境及雞群健康狀況有關(guān)。

4 小結(jié)

本試驗研究了小麥替代玉米，同時使用7家公司不同的小麥專用酶制劑產(chǎn)品對4～9周齡海蘭褐青年蛋雞生產(chǎn)性能、免疫功能及日糧粗蛋白消化率的影響，結(jié)果表明，日糧中70%添加小麥同時使用酶制劑能夠達到與玉米-豆粕型日糧幾乎同樣的飼喂效果；另外，7種酶制劑產(chǎn)品中，就對青年蛋雞生產(chǎn)性能及免疫功能影響效果而言，A、B、C、D 4種國產(chǎn)酶制劑與E、F、G 3種進口酶制劑效果無顯著差異，就日糧粗蛋白消化率而言，B、C國產(chǎn)酶制劑和F、G進口酶制劑無顯著差異，D國產(chǎn)酶制劑和E進口酶制劑無顯著差異，表明國產(chǎn)小麥專用酶制劑基本能達到與進口酶制劑相同的使用效果。

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