天津市南開(kāi)醫(yī)院(300100)馬順英
綠原酸為茵陳中抗菌、消炎、利膽的主要有效成分。綠原酸提取方法主要有水提、水提醇沉、水提石灰乳沉淀法、醇提等[1]。本實(shí)驗(yàn)中比較不同濃度水提乙醇沉淀對(duì)茵陳中綠原酸提取率的影響。
植物茵陳為菊科植物濱蒿Artemisia scoparia Waldst.et Kit.或茵陳蒿Artemisiacapillaries Thunb.的干燥的地上部分,綠原酸對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所,批號(hào):1110753-200413),LC-10A型高效液相色譜儀;島津SPD-10A紫外檢測(cè)器;威瑪龍色譜數(shù)據(jù)工作站;AGT C18柱(4.6mm×250mm,5μm),分析天平(島津AEG-120)。
附表 對(duì)照品與樣品溶液的測(cè)定結(jié)果
2.1 樣品的制備 取茵陳0.1kg加水1L和0.8L煎煮兩次,每次1h,過(guò)濾液濃縮至0.1L清膏,均分成4份各加入95%乙醇28mL、43mL、70mL、133mL,使藥液含乙醇濃度分別為50%、60%、70%、80%,靜置24h,過(guò)濾,回收乙醇,殘?jiān)舾?,研?xì)備用。
2.2 總固體測(cè)定 取上述固體適量,相當(dāng)于茵陳10g,置干燥至恒重的蒸發(fā)皿中,于105℃干燥5h至恒重后取出,置干燥器中冷卻30min后稱(chēng)重,以干燥品計(jì)算樣品中固形物的含量(%)。
2.3 色譜條件 色譜柱為AGT C18柱,乙 腈-1 %醋 酸-水(9∶51∶40)為流動(dòng)相,流速1mL/min。
2.4 對(duì)照品溶液及供試品制備 精密稱(chēng)取綠原酸適量,加甲醇溶解并加流動(dòng)相稀釋得66μg /μL對(duì)照品溶液,精密取樣品適量,用甲醇溶解,轉(zhuǎn)移至50mL量瓶中稀釋至刻度,搖勻,即得供試品溶液。
2.5 結(jié)果 分別取對(duì)照品及樣品溶液10μL,進(jìn)樣依次測(cè)定,結(jié)果見(jiàn)附表。
綠原酸提取量:水提醇沉70%乙醇沉淀>60%乙醇沉淀>80%乙醇沉淀>50%乙醇沉淀,故采用水提醇沉法工藝,用70%濃度乙醇醇沉。80%乙醇沉淀比:70%乙醇沉淀綠原酸含量低,且綠原酸易分解,故在生藥樣品提取物分析過(guò)程中應(yīng)注意避光。由于綠原酸分子中含有5個(gè)羥基,使得綠原酸具有一定的水溶性,選擇水提乙醇沉淀為精制茵陳的有效方法。