耿麗晶，周 圍，王 佳，王軍萍

(遼寧醫(yī)學(xué)院食品科學(xué)與工程學(xué)院，遼寧錦州 121001)

貯藏期間蘆薈果膠含量變化及影響果膠粘度因素的研究

耿麗晶，周 圍，王 佳，王軍萍

(遼寧醫(yī)學(xué)院食品科學(xué)與工程學(xué)院，遼寧錦州 121001)

果膠作為由植物中提取的天然添加劑，具有良好的膠凝化和穩(wěn)定化作用。從具有保健作用和藥用價(jià)值的蘆薈中提取果膠已廣泛應(yīng)用于食品工業(yè)、化妝品、醫(yī)藥等領(lǐng)域。本文對(duì)貯藏期間蘆薈果膠含量態(tài)變化進(jìn)行研究，并確定影響果膠粘度的因素，對(duì)蘆薈果膠提取具有指導(dǎo)意義。本文采用酸水解醇析法提取蘆薈中的果膠，確定提取果膠醇析過(guò)程中的最優(yōu)pH和溫度，并明確貯藏0～60d蘆薈中果膠含量，此外還確定各種影響因素對(duì)果膠成品粘度的影響。結(jié)果表明，醇析過(guò)程中的最佳pH3.5，最佳溫度為50℃。果膠成品的pH2.79(符合國(guó)標(biāo))，甲氧基含量為8.518%，屬于高甲氧基果膠。貯藏0～60d庫(kù)拉索蘆薈中的果膠含量在貯藏10d時(shí)達(dá)到峰值。而后果膠含量隨貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)而降低，并且在20d之后明顯下降。因此，最適宜蘆薈果膠提取和加工的時(shí)間為0～20d。所得蘆薈果膠粘度與溫度、檸檬酸和氯化鈉添加量呈負(fù)相關(guān)，而與果膠濃度和蔗糖添加量呈正相關(guān)。

蘆薈，果膠，提取，貯藏，粘度

果膠是一種植物多糖，存在于相鄰胞壁間的胞間層中，是植物細(xì)胞壁的成分之一。在食品領(lǐng)域，果膠是高檔的天然食品添加劑和保健品，可作膠凝劑、增稠劑、穩(wěn)定劑、懸浮劑、乳化劑、增香增效劑［1－2］。當(dāng)前我國(guó)果膠生產(chǎn)還處于開(kāi)發(fā)階段，所需果膠還主要依靠進(jìn)口［3］。蘆薈中含有豐富的果膠物質(zhì)，目前對(duì)其保健功能和藥用價(jià)值的研究較多，而對(duì)貯藏期間蘆薈果膠含量變化的研究尚未見(jiàn)報(bào)道［4－5］。本文在借鑒國(guó)內(nèi)外酸水解醇析法提取果膠的研究成果基礎(chǔ)上［6－7］，對(duì)貯藏0～60d蘆薈果膠含量態(tài)變化進(jìn)行研究，并確定影響果膠粘度的因素，旨在為蘆薈果膠貯藏時(shí)期的選擇和蘆薈加工、生產(chǎn)提供一定的理論和實(shí)踐價(jià)值［8］。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

庫(kù)拉索蘆薈(A loe barbadensis Mill) 遼寧醫(yī)學(xué)院食品科學(xué)與工程學(xué)院提供;鹽酸、乙醇、氨水、NaOH、檸檬酸、蔗糖、酚酞、氯化鈉等試劑 均為分析純。

JJ－2型組織搗碎機(jī) 江蘇金壇市環(huán)宇科學(xué)儀器廠;恒溫水浴鍋DK－98－11A型 天津市秦斯特儀器有限公司;FA2004N型電子天平、粘度計(jì) 上海精密科學(xué)儀器有限公司;PHS－3B型精密pH計(jì) 上海安亭昌吉路，雷磁牌;SHZ－型循環(huán)水真空泵、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 上海亞榮生化儀器廠;CS101－AB型電熱干燥箱

深圳市恒普科技有限公司;離心機(jī) 湘潭通用離心機(jī)有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 實(shí)驗(yàn)流程 原料的預(yù)處理→酸水解→趁熱過(guò)濾→乙醇沉淀→抽濾→干燥→稱重→果膠→果膠成品性質(zhì)的測(cè)定

1.2.2 果膠提取工藝的操作要點(diǎn)［7］

1.2.2.1 原料的預(yù)處理 取貯存于4℃冰箱敞口塑料袋中的蘆薈鮮樣外皮20.0g，沸水漂燙3m in進(jìn)行滅酶。用30℃的蒸餾水漂洗3～5次，用濾紙過(guò)濾。再按料液比蘆薈樣∶蒸餾水(m∶V)為1∶20添加蒸餾水后，放入組織搗碎機(jī)中攪打，3m in后倒入清潔的三角瓶中，備用。

1.2.2.2 酸水解 向樣液中加入1.000mol/L鹽酸，調(diào)節(jié)樣液pH 2.5，蓋上瓶塞，在90℃恒溫水浴鍋里保溫90m in。期間不時(shí)用玻璃棒攪拌水解液，促進(jìn)原果膠水解。

1.2.2.3 過(guò)濾 水解液應(yīng)趁熱過(guò)濾，以降低果膠液黏性使其溶液更易濾出。故本實(shí)驗(yàn)濾渣用90℃蒸餾水洗滌，直至不粘稠為止。待濾液冷卻后，加入pH11.0的氨水調(diào)節(jié)至所需的醇析pH，備用。

1.2.2.4 乙醇沉淀 若濾液體積較大，加入乙醇溶液的用量較大，成本較高。故本實(shí)驗(yàn)將濾液經(jīng)適當(dāng)濃縮處理，即放入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮后，冷卻至室溫再進(jìn)行沉淀。向?yàn)V液中加入95%乙醇調(diào)節(jié)至50%～60%，將所得果膠混合物靜置于所需的醇析溫度恒溫水浴鍋中12h。3000 r/m in離心10m in，獲得粗果膠再用95%酒精洗滌2～3次，抽濾。

1.2.2.5 精制果膠 將抽濾所到的濾餅溶解于20倍熱蒸餾水中后過(guò)濾，濾液需用氨水調(diào)節(jié)pH為3.5，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀進(jìn)行濃縮后用95%乙醇沉析，所得濾餅再用無(wú)水乙醇洗滌，干燥后得到精制的果膠。

1.2.2.6 干燥稱重 將所得果膠和濾紙置于45℃恒溫干燥箱中干燥約4～6h，直至恒重后稱重。果膠產(chǎn)量采用重量法，計(jì)算公式如下:果膠產(chǎn)量(g/20g)=

W(稱含恒重干燥果膠紙重量)－W0(空白紙重量)。

1.2.3 醇析pH和醇析溫度對(duì)蘆薈果膠產(chǎn)量的影響

1.2.3.1 醇析pH對(duì)蘆薈果膠產(chǎn)量的影響 稱取21份20.0g蘆薈(分以下7組，每組重復(fù)3次)，按照前述的實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行原料的預(yù)處理、酸水解和過(guò)濾后，用氨水調(diào)節(jié)濾液的pH分別為2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5、5.0，然后在50℃下加入乙醇進(jìn)行醇析12h，精制并干燥后分別測(cè)量果膠產(chǎn)量，根據(jù)果膠產(chǎn)量確定最優(yōu)醇析pH。

1.2.3.2 醇析溫度對(duì)蘆薈果膠產(chǎn)量的影響 稱取21份20.0g蘆薈(分以下7組，每組重復(fù)3次)，按照前述的實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行原料的預(yù)處理、酸水解、過(guò)濾、調(diào)節(jié)濾液pH為3.5后，再加入乙醇，在溫度分別為35、40、45、50、55、60、65℃下進(jìn)行醇析12h后，進(jìn)行精制和干燥，分別測(cè)量果膠產(chǎn)量，根據(jù)果膠產(chǎn)量確定最適醇析溫度。

1.2.4 果膠特性研究

1.2.4.1 果膠定性鑒定［9］加熱鑒定:取1.0g果膠加入6m L蒸餾水，于水浴鍋加熱90℃使其溶解，觀察冷卻后現(xiàn)象。乙醇鑒定:制備1%的果膠水溶液，加入等體積95%的乙醇，觀察現(xiàn)象。酸堿鑒定:取5m L 1%果膠水溶液，加入2mol/L NaOH 1m L，室溫放置15m in，觀察現(xiàn)象。將得到的凝膠用10%稀鹽酸試液進(jìn)行酸化并充分搖勻后，觀察現(xiàn)象。再將所得液進(jìn)行煮沸，觀察現(xiàn)象。添加劑鑒定:取0.4g樣品加入30m L水，加熱并不斷攪拌，使之完全溶解，加蔗糖35.6g，繼續(xù)加熱濃縮至54.7g，倒入盛有0.8m L 1.25%的檸檬酸溶液的燒杯中冷卻，觀察現(xiàn)象。

1.2.4.2 果膠成品pH的測(cè)定［10］取1.25g果膠用蒸餾水溶解、過(guò)濾，并定容至50m L，得到2%的果膠水溶液，在25℃下測(cè)其pH。平行測(cè)定3次，取平均值。

1.2.4.3 果膠成品甲氧基含量測(cè)定［9］配制5%的果膠液 25.00m L，以酚酞為指示劑，用已標(biāo)定的1.000mol/L NaOH溶液滴定，滴定至溶液由淡黃色變?yōu)榉奂t即為終點(diǎn)，然后加入過(guò)量的NaOH(V1，m L)，室溫皂化10m in，再用已標(biāo)定的1.000mol/L HCl溶液，滴至粉紅剛好退去，即為滴定終點(diǎn)，記錄HCl消耗量(V2，m L)。平行測(cè)定三次，取平均值。

甲氧基含量計(jì)算式如下:

式中:m為甲氧基質(zhì)量，單位為g;CNaOH為NaOH溶液摩爾濃度，單位為mol/L;CHCl為HCl溶液摩爾濃度，單位為mol/L;數(shù)字31.034為甲氧基(CH3O)分子量，單位為 g/mol;C0為果膠試樣的濃度，單位為g/m L;V0為吸取果膠試樣液的體積，單位為m L。

1.2.5 貯藏期間蘆薈果膠含量動(dòng)態(tài)變化的確定 分別取貯存于4℃冰箱敞口塑料袋中0、10、20、30、40、50、60d的蘆薈鮮樣，按實(shí)驗(yàn)方法1.2.3所得最優(yōu)醇析pH和醇析溫度提取蘆薈果膠，計(jì)算出果膠含量，確定貯藏期間蘆薈果膠含量的動(dòng)態(tài)變化。

1.2.6 影響果膠成品粘度的研究［11］

1.2.6.1 溫度對(duì)果膠粘度的影響 測(cè)量在60、70、80、90、100℃條件下100m L 1%蘆薈果膠水溶液的粘度值。

1.2.6.2 果膠濃度對(duì)粘度的影響 測(cè)量0.2%、0.6%、1.0%、1.4%、1.8%蘆薈果膠水溶液的粘度值。

1.2.6.3 蔗糖對(duì)果膠粘度的影響 測(cè)量80m L 1%蘆薈果膠水溶液中分別添加5%、15%、25%、35%、45%蔗糖20m L后的粘度值。

1.2.6.4 檸檬酸對(duì)果膠粘度的影響 測(cè)量80m L 1%蘆薈果膠水溶液中分別添加2%、4%、6%、8%、10%檸檬酸20m L后的粘度值。

1.2.6.5 氯化鈉對(duì)果膠粘度的影響 測(cè)量80m L 1%蘆薈果膠水溶液中分別添加2%、4%、6%、8%、10%氯化鈉20m L后的粘度值。

2 結(jié)果與討論

2.1 醇析pH和醇析溫度對(duì)果膠產(chǎn)量的影響

2.1.1 醇析pH對(duì)果膠產(chǎn)量的影響 醇析pH對(duì)果膠產(chǎn)量的影響結(jié)果如圖1(A)所示，表明醇析pH在2.0～3.5區(qū)間時(shí)，果膠產(chǎn)量逐漸上升，在醇析pH3.5時(shí)，果膠產(chǎn)量為最大值。當(dāng)醇析pH繼續(xù)增加時(shí)，果膠平均產(chǎn)量呈下降趨勢(shì)。醇析過(guò)程中pH對(duì)果膠產(chǎn)量影響的原因是由于溶液酸度過(guò)大，將促使果膠分解、氧化;溶液酸度過(guò)小，果膠分子在溶液中電離，溶解在水中過(guò)濾時(shí)易隨溶液被濾掉，使產(chǎn)量降低。因此，在本實(shí)驗(yàn)最適醇析pH應(yīng)為3.5。

圖1 醇析過(guò)程中pH和溫度對(duì)果膠產(chǎn)量的影響Fig.1 Effect of pH and temperature on pectin production during Alcohol precipitation process

2.1.2 醇析溫度對(duì)果膠產(chǎn)量的影響 結(jié)果如圖1 (B)所示，表明醇析溫度為在35～50℃區(qū)間，果膠產(chǎn)量逐漸上升，到50℃時(shí)，果膠產(chǎn)量達(dá)到最高。隨著醇析溫度繼續(xù)增加，產(chǎn)量反而降低，分析其原因可能是醇析溫度較高，促進(jìn)乙醇的揮發(fā)，乙醇濃度降低，導(dǎo)致果膠產(chǎn)量降低。因此本實(shí)驗(yàn)最適醇析溫度為50℃。

2.2 果膠成品定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.2.1 果膠定性鑒定結(jié)果 加熱鑒定結(jié)果:果膠在加熱過(guò)程中逐漸溶解，冷卻后呈凝膠狀;乙醇鑒定結(jié)果:果膠水溶液在加入乙醇后形成淡黃色半透明凝膠沉淀;酸堿鑒定結(jié)果:果膠水溶液加入NaOH后形成淡黃色半透明凝膠。經(jīng)酸化后得到淡黃色脹潤(rùn)凝膠沉淀，再煮沸可使淡黃色脹潤(rùn)凝膠沉淀變?yōu)榈S色絮狀物;添加劑鑒定結(jié)果:果膠加蔗糖經(jīng)加熱濃縮后，再添加檸檬酸溶液至冷卻可形成柔軟有彈性的膠凍。

2.2.2 果膠成品的pH測(cè)定結(jié)果 25℃下2%的果膠水溶液pH的結(jié)果見(jiàn)表1所示，表明果膠成品的平均pH 2.79，符合國(guó)標(biāo)規(guī)定(2.8±0.2)。

表1 果膠成品的pHTable 1 The pH of pectin

2.2.3 果膠成品甲氧基含量測(cè)定 經(jīng)鄰苯二甲酸氫鉀滴定法測(cè)定所得果膠成品的甲氧基含量值，結(jié)果見(jiàn)表2。經(jīng)計(jì)算得果膠甲氧基平均含量為8.518%。通常將果膠甲氧基含量大于7%的果膠成為高甲氧基果膠，故本實(shí)驗(yàn)所提取的蘆薈果膠為高甲氧基果膠。

表2 果膠的甲氧基含量測(cè)定Table 2 Determination ofmethoxyl content in pectin

2.3 貯藏期間蘆薈果膠含量動(dòng)態(tài)變化

由于環(huán)境條件對(duì)果實(shí)貯藏期間的生理變化影響甚大，且品種間存在差異，因此不同品種的蘆薈在不同貯藏條件下的果膠含量的變化就可能有所不同。故本實(shí)驗(yàn)研究4℃貯存0、10、20、30、40、50、60d的蘆薈鮮樣外皮中果膠產(chǎn)量的動(dòng)態(tài)變化，結(jié)果如圖2所示。從結(jié)果可知，新鮮蘆薈中的果膠含量較高，在10d果膠含量出現(xiàn)峰值，20d后果膠含量明顯下降。蘆薈在貯藏期間果膠產(chǎn)量呈下降趨勢(shì)，其原因是蘆薈含有豐富的果膠酶，貯存過(guò)程中會(huì)分解果膠，從而導(dǎo)致果膠提取量下降。因此，建議對(duì)于蘆薈果膠的加工和提取應(yīng)在采摘后0～20d之內(nèi)進(jìn)行。

圖2 蘆薈在貯藏期間果膠含量變化趨勢(shì)Fig.2 Aloe pectin content trends during storage

2.4 影響蘆薈果膠成品粘度因素的研究

2.4.1 溫度對(duì)蘆薈果膠粘度的影響 測(cè)定100m L 1%蘆薈果膠在60、70、80、90、100℃下的粘度值，結(jié)果如圖3。表明果膠粘度在60℃時(shí)達(dá)到最大，隨著溫度的進(jìn)一步升高，果膠粘度呈下降趨勢(shì)，其原因是因?yàn)殡S著溫度的升高，熱運(yùn)動(dòng)加強(qiáng)，分子間斥力增加，電離度減少，導(dǎo)致粘度減小。在90℃以上，果膠粘度下降幅度較緩。

2.6.2 果膠濃度對(duì)蘆薈粘度的影響 分別測(cè)定0.2%、0.6%、1.0%、1.4%、1.8%的蘆薈果膠水溶液的粘度，結(jié)果如圖4所示。表明蘆薈果膠粘度隨果膠質(zhì)量濃度的升高而增大，濃度在0.2%～0.6%區(qū)間，果膠粘度的增幅較為明顯。其原因是隨著果膠溶液濃度的增加，大分子數(shù)量增加，分子間聯(lián)合和纏結(jié)程度大大增加，溶液粘度急劇變大。

圖3 溫度對(duì)果膠粘度的影響Fig.3 Effect of temperature on the viscosity of Aloe pectin

圖4 果膠濃度對(duì)粘度的影響Fig.4 Effect of pectin concentration on the viscosity of Aloe pectin

2.6.3 蔗糖添加量對(duì)蘆薈果膠粘度的影響 分別測(cè)定添加5%、15%、25%、35%、45%蔗糖的果膠溶液粘度，結(jié)果如圖5所示。表明蘆薈果膠粘度隨著蔗糖添加量的增加而增大，特別是加入25%的蔗糖溶液后，果膠粘度的增幅較為明顯。原因是由于蔗糖含有很多羥基，為一種強(qiáng)親水物質(zhì)，與果膠競(jìng)爭(zhēng)水分子，導(dǎo)致果膠分子脫水結(jié)合。此外，果膠分子自身帶有疏水基團(tuán)甲氧基，具有促進(jìn)果膠分子間脫水的作用。因此，隨著蔗糖濃度的增加，粘度也隨著增加。

圖5 蔗糖添加量對(duì)果膠粘度的影響Fig.5 Effect of sucrose amount on the viscosity of Aloe pectin

2.6.4 檸檬酸添加量對(duì)蘆薈果膠粘度的影響 分別測(cè)定添加2%、4%、6%、8%、10%檸檬酸的果膠溶液粘度，結(jié)果如圖6所示。表明蘆薈果膠的粘度隨著檸檬酸添加量的增加而降低，在添加2%檸檬酸的果膠溶液粘度為最大。其原因是由于檸檬酸量的增加，酸度增強(qiáng)，抑制了果膠分子的電離，使果膠分子間作用力減弱，粘度也隨之下降。

圖6 檸檬酸添加量對(duì)果膠粘度的影響Fig.6 Effect of citric acid amount on the viscosity of Aloe pectin

2.6.5 氯化鈉添加量對(duì)蘆薈果膠粘度的影響 分別測(cè)定添加2%、4%、6%、8%、10%氯化鈉的果膠溶液粘度，結(jié)果如圖7所示。表明蘆薈果膠的粘度隨著氯化鈉添加量的增加而下降，但氯化鈉添加量對(duì)果膠粘度的影響不顯著。其原因是由于隨著氯化鈉的增加，溶液離子濃度增大，果膠電離度減小，粘度減小。

圖7 氯化鈉添加量對(duì)果膠粘度的影響Fig.7 Effect of sodium chloride amount on the viscosity of Aloe pectin

本實(shí)驗(yàn)庫(kù)拉索蘆薈果膠的定性實(shí)驗(yàn)、溫度、果膠濃度、添加劑對(duì)果膠粘度影響的結(jié)果與其他文獻(xiàn)資料相近［9，11－12］。

3 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，庫(kù)拉索蘆薈果膠提取過(guò)程中的醇析pH3.5為宜，醇析溫度為50℃時(shí)所得果膠產(chǎn)量最高。新鮮蘆薈中果膠的含量較高，在10d左右果膠含量達(dá)到最大值，20d后果膠含量明顯下降，因此對(duì)于庫(kù)拉索蘆薈果膠的加工和提取應(yīng)在蘆薈采摘后0～20d進(jìn)行。溫度、檸檬酸和氯化鈉添加量與蘆薈果膠粘度呈負(fù)相關(guān)，而果膠濃度和蔗糖添加量和蘆薈果膠粘度呈正相關(guān)。

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Study on change of pectin content from Aloe and the effect factors of pectin viscosity during storage

GENG Li－jing，ZHOU W ei，WANG Jia，WANG Jun－ping
(Food Science and Processing College，Liaoning Medical University，Jinzhou 121001，China)

As a kind of natural add itives，pec tin can be extrac ted from p lants and has good gelation and stabilization.To extract pectin from a health and medicinalvalue of Aloe has been w idely used in the food industry，cosmetics，med icine and other fields.The changes of Aloe pectin content had been stud ied during Aloe d ifferent storage states and the fac tors which could affec t the pectin viscosity had been determ ined.All works would be significantly guid ing extrac tion of Aloe pectin.In this artic le，pectin was extracted from Aloe by the acid hyd rolysis of alcohol p recip itation methods.Pec tin extrac tion op timum pH and tem perature during alcohol p recip itation p rocess were determ ined，and pectin contents of store 0～60d aloes were c leared.In add ition，the im pac ts of various fac tors on pec tin p roduct viscosity effec t were determ ined.The result showed that，during the p rocess of alcohol the op timal pH3.5 and the op tim al tem perature was 50℃.Finished pec tin was pH2.79，methoxyl g roup content of 8.518%，belong to high methoxylpectin.Pectin contents of storage 0～60d Aloe has a peak in storage 10d.Then the pectin contents decreased w ith storage time，and dec reased obviously after 20d.Therefore，the most suitab le Aloe pectin extraction and p rocessing time was 0～20d.The temperature，the add ing amount of citric acid and sod ium chloride was negatively correlated w ith pec tin viscosity，pectin concentration and adding amount of sucrose was positively correlated w ith pec tin viscosity.

Aloe;pec tin;extrac tion;storage;viscosity

TS255.1

A

1002－0306(2012)19－0117－05

2012－03－22

耿麗晶(1981－)，女，博士，副教授，研究方向:食品營(yíng)養(yǎng)與安全。

遼寧省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(201102137);遼寧醫(yī)學(xué)院“奧鴻”大學(xué)生科技創(chuàng)新課題(2011D03)。