靳林溪，謝建春*，王 石，孫寶國(guó)

(北京工商大學(xué) 北京市食品風(fēng)味化學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，食品添加劑與配料北京市高等學(xué)校工程中心，北京 100048)

RP-HPLC-APCI MS和 RP-HPLC- ELSD法分析雞脂甘油酯組成及結(jié)構(gòu)

靳林溪，謝建春*，王 石，孫寶國(guó)

(北京工商大學(xué) 北京市食品風(fēng)味化學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，食品添加劑與配料北京市高等學(xué)校工程中心，北京 100048)

利用反相高效液相色譜-大氣壓化學(xué)電離質(zhì)譜(RP-HPLC-APCI MS)及反相高效液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測(cè)(RP-HPLC- ELSD)分析雞脂甘油酯組成及結(jié)構(gòu)。C18色譜柱，乙腈-二氯甲烷(60:40，V/V)為流動(dòng)相，APCI MS正離子模式。根據(jù)APCI一級(jí)質(zhì)譜的準(zhǔn)分子離子及二?；视退槠x子鑒定出26種甘油酯，包括4種甘油二酯和22種甘油三酯。根據(jù)二?；视退槠x子的豐度高低及離子阱碰撞誘導(dǎo)解離產(chǎn)生的二級(jí)/三級(jí)碎片離子的豐度高低，判定各甘油酯中脂肪酸的位置分布。采用RP-HPLC-ELSD分析，面積歸一化法定量，甘油三酯占總甘油酯的99.88%，含量最高的為1-棕櫚酸-2,3-二油酸甘油酯(23.65%)，其次為1-棕櫚酸-2-油酸-3-亞油酸甘油酯(19.37%)、1-亞油酸-2,3-二油酸甘油酯(16.02%)。

雞脂；甘油酯；高效液相色譜；大氣壓化學(xué)電離質(zhì)譜；蒸發(fā)光散射檢測(cè)

油脂的甘油三酯組成，不僅包括脂肪酸組成信息，還包括脂肪酸在甘油分子上的位置分布等結(jié)構(gòu)性信息。油脂的質(zhì)量與營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，不僅與脂肪酸組成有關(guān)，還與甘油酯的化學(xué)結(jié)構(gòu)有關(guān)。脂肪酸在甘油三酯中的位置分布，決定甘油三酯在體內(nèi)的吸收代謝情況。Sn-2位脂肪酸在人體內(nèi)吸收利用率比Sn-1(3)位的脂肪酸高[1]，即使脂肪酸組成相同，若脂肪酸在甘油三酯中的分布位置不同，在機(jī)體內(nèi)的吸收和利用也不同。

已有報(bào)道采用高溫氣相色譜、高效液相色譜、薄層色譜、超臨界流體色譜等技術(shù)可分析油脂的甘油酯組成[2-6]，其中反相高效液相色譜(reverse- phase high performance liquid chromatography，RP-HPLC)因可實(shí)現(xiàn)常溫和低溫下各種甘油三酯的有效分離，應(yīng)用最為廣泛。蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(evaporative light-scattering detector，ELSD)是20世紀(jì)90年代出現(xiàn)的一種通用型質(zhì)量檢測(cè)器，具有靈敏度高、受溫度等實(shí)驗(yàn)條件影響小和線性范圍寬等優(yōu)點(diǎn)，是檢測(cè)甘油三酯等具有紫外吸收缺陷化合物的有力工具[7]。劉濤等[8]采用RP-HPLC-ELSD外標(biāo)法測(cè)定了棕櫚油、烏桕脂中9種甘油三酯和1種甘油二酯的含量；耿文飛等[9]采用RP-HPLC-ELSD測(cè)定了所合成三油酸甘油酯的含量；安廣杰等[10]采用超高效液相色譜(ultra performance liquid chromatography，UPLC)-蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(ELSD)面積歸一化法測(cè)定了雙低菜籽油中7種甘油三酯及橄欖油中4種甘油三酯的含量。但對(duì)于復(fù)雜的甘油三酯，還需借助于色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)準(zhǔn)確地確認(rèn)結(jié)構(gòu)。

近年來，反相高效液相色譜-大氣壓化學(xué)電離質(zhì)譜(reversed-phase-high performance liquid chromatographyatmospheric pressure chemical ionization mass spectrometry,RP-HPLC-APCI MS)已成功地用于油脂的甘油酯分析。向智敏等[11]采用RP-HPLC-APCI MS(三重四極桿質(zhì)譜儀)從薏苡仁油中分析鑒定出12種甘油三酯；Lisa等[12]采用RP-HPLC-APCI MS(離子阱質(zhì)譜儀)分析了60種植物油中的甘油三酯組成。APCI MS不僅可提供準(zhǔn)分子離子信息推斷分子量，還可根據(jù)形成的少量碎片離子及其豐度比，判斷脂肪酸的結(jié)構(gòu)及脂肪酸在甘油三酯中的位置分布，如傅偉昌等[13]根據(jù)準(zhǔn)分子離子信息及二?；视碗x子的豐度比鑒定桐油中主要甘油三酯組成和結(jié)構(gòu)。目前，RP-HPLC-APCI MS應(yīng)用在分析甘油酯的報(bào)道中，多是關(guān)于植物油的甘油酯分析[11-16]。本實(shí)驗(yàn)采用RPHPLC-APCI MS分析雞脂的甘油酯結(jié)構(gòu)及脂肪酸在甘油酯中的位置分布，并進(jìn)而采用RP-HPLC-ELSD面積歸一化定量，建立一種分析動(dòng)物脂肪中復(fù)雜甘油酯組成和結(jié)構(gòu)的方法。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

雞脂 安徽牧洋油脂有限公司；乙腈、二氯甲烷(色譜純) 北京迪馬科技公司。

1.2 儀器與設(shè)備

LCQ Deca XP Max液相色譜-離子阱質(zhì)譜聯(lián)用儀(配有大氣壓化學(xué)電離源(APCI)) 美國(guó)Thermo公司；1200高效液相色譜儀(配有G1379A脫氣機(jī)、G1312A二元泵、G1313A自動(dòng)進(jìn)樣器、G1316A柱溫箱) 美國(guó)Agilent公司；SEDEX 75蒸發(fā)光散射檢測(cè)器 法國(guó)Sedere公司；XWK-Ⅲ無油空氣泵 天津市華生分析儀器廠。

1.3 方法

1.3.1 樣品制備

取10mg雞脂，加入5mL溶劑(二氯甲烷-乙腈，40:60，V/V)溶解，0.45μm膜過濾，待分析。

1.3.2 HPLC-MS分析

Dikma C18色譜柱(4.6mm×250mm，5μm)；流動(dòng)相：二氯甲烷-乙腈(40:60，V/V)，流速1mL/min，柱溫25℃，進(jìn)樣10μL。

APCI離子源，正離子模式，噴霧電壓3000V，毛細(xì)管溫度250℃，汽化溫度400℃，Corona電流4μA。質(zhì)量掃描范圍300～1000u，掃描時(shí)間1s，Q1峰寬0.7，鞘氣(氮?dú)?壓力75bar，輔助氣(氦氣)壓力20bar。二級(jí)碰撞：隔離寬度2.0，碰撞能量30%。

1.3.3 HPLC-ELSD分析

液相色譜柱、進(jìn)樣等操作條件同1.3.2節(jié)。ELSD：霧化氣空氣，壓力3.2bar，漂移管溫度30℃。將各色譜峰的保留時(shí)間與HPLC-APCI MS總離子流色譜中各色譜峰的保留時(shí)間比較定性，面積歸一化法定量。

2 結(jié)果與分析

2.1 RP-HPLC-MS分析

HPLC-MS分析的總離子流色譜圖及RP-HPLC-ELSD色譜圖見圖1，分析鑒定結(jié)果見表1。

圖1 雞脂的HPLC-APCI-MS 總離子流圖(A)和HPLC-ELSD色譜圖(B)Fig.1 HPLC-APCI-MS Total ion current chromatogram (A) and HPLC-ELSD (B)chromatogram glycerides in chicken fat

APCI是一種氣相離子化軟電離過程，適合具有一定揮發(fā)性的中等極性和弱極性的分子離子化。APCI質(zhì)譜圖通常具有很好的規(guī)律性，一般包括準(zhǔn)分子離子峰和一定量的碎片離子峰，準(zhǔn)分子離子峰可提供未知物質(zhì)的分子量信息，碎片離子峰可提供更詳細(xì)的結(jié)構(gòu)信息[17-18]。本實(shí)驗(yàn)甘油三酯在APCI質(zhì)譜中離子化過程如圖2所示。

表1 雞脂的RP-HPLC-APCI MS分析鑒定結(jié)果Table 1 Results obtained for analysis of chicken fat by HPLC-APCI MS

圖2 甘油三酯在APCI 質(zhì)譜中的離子化Fig.2 Ionization of triacylglycerols in APCI analysis

檢測(cè)到的甘油三酯的一級(jí)質(zhì)譜圖中存在信號(hào)強(qiáng)度較大的準(zhǔn)分子離子峰[M＋H]＋和準(zhǔn)分子離子失去1個(gè)脂肪酸的碎片離子峰[M＋H－脂肪酸]＋(即二?；视碗x子):[M＋H－R1COOH]＋或[M＋H－R2COOH]＋、[M＋HR3COOH]＋，根據(jù)這些可推斷甘油酯組成。

例如，表1中tR為14.06min的色譜峰所對(duì)應(yīng)的一級(jí)質(zhì)譜如圖3A所示，其準(zhǔn)分子離子[M＋H]＋為m/z879.7，碎片離子只有[M＋H－亞油酸]＋(m/z599.8)，由此推斷此譜峰對(duì)應(yīng)的組分為三亞油酸甘油酯。

同樣，tR為17.50min的色譜峰所對(duì)應(yīng)的一級(jí)質(zhì)譜如圖3B所示，其準(zhǔn)分子離子[M＋H]＋為m/z881.8，碎片離子為[M＋H－油酸]＋(m/z599.8)和[M＋H－亞油酸]＋(m/z601.8)。同時(shí)含油酸與亞油酸的甘三酯可為二亞油酸油酸甘油酯、或二油酸亞油酸甘油酯，但只是二亞油酸油酸甘油酯的[M＋H]＋為m/z881.8、[M＋H－油酸]＋為m/z599.8、[M＋H－亞油酸]＋為m/z601.8，由此推斷此譜峰對(duì)應(yīng)的組分為二亞油酸油酸甘油酯。

tR為23.67min的色譜峰所對(duì)應(yīng)的一級(jí)質(zhì)譜如圖3C所示，其準(zhǔn)分子離子[M＋H]＋為m/z857.7，碎片離子為[M＋H－棕櫚酸]＋(m/z601.7)、[M＋H－亞油酸]＋(m/z577.7)、[M＋H－油酸]＋(m/z575.9)，由此推斷此譜峰對(duì)應(yīng)的組分為棕櫚酸油酸亞油酸甘油酯。

tR為29.25min的色譜峰所對(duì)應(yīng)的一級(jí)質(zhì)譜如圖3D所示，其準(zhǔn)分子離子[M＋H]＋為m/z885.7，碎片離子為[M＋H－硬脂酸]＋(m/z601.9)、[M＋H－油酸]＋(m/z603.8)、[M＋H－亞油酸]＋(m/z605.7)，由此推斷此譜峰對(duì)應(yīng)的組分為硬脂酸油酸亞油酸甘油酯。

離子阱檢測(cè)器是靈敏度很高的質(zhì)量分析器，在分析離子源產(chǎn)生離子的同時(shí)還可以把離子阱當(dāng)成碰撞室，使阱內(nèi)的離子碰撞誘導(dǎo)解離(collision-induced dissociation，CID)。在一次數(shù)據(jù)采集中，離子阱檢測(cè)器可獲得一級(jí)及多級(jí)質(zhì)譜信息[19]。本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)的某些色譜峰對(duì)應(yīng)的一級(jí)質(zhì)譜，除了準(zhǔn)分子離子[M＋H]＋外，二?；视退槠x子[M＋H－R1COOH]＋、[M＋H－R2COOH]＋、[M＋H－R3COOH]＋沒有出現(xiàn)或豐度很低，此時(shí)可選擇準(zhǔn)分子離子為母離子，通過碰撞誘導(dǎo)解離使形成二?；视碗x子或單?；视碗x子進(jìn)行推斷。此外，對(duì)于一級(jí)質(zhì)譜中二?；视碗x子豐度較高的組分，還可通過碰撞誘導(dǎo)解離再次確認(rèn)鑒定結(jié)果。

表1中tR為14.06min的色譜峰根據(jù)一級(jí)質(zhì)譜圖推斷為三亞油酸甘油酯。設(shè)[M＋H]＋(m/z879.7)為母離子，通過碰撞誘導(dǎo)解離獲得二級(jí)質(zhì)譜(圖4A)，此時(shí)碎片離子為[M＋H－亞油酸]＋(m/z599.4)；再設(shè)m/z599.4為母離子，通過碰撞誘導(dǎo)解離獲得三級(jí)質(zhì)譜(圖4B)，此時(shí)只得到碎片離子[M＋H－2×亞油酸]＋(m/z319.3)，由此可進(jìn)一步證明其為三亞油酸甘油酯。

同樣，tR為21.89min的色譜峰根據(jù)一級(jí)質(zhì)譜圖推斷為二油酸亞油酸甘油酯。設(shè)[M＋H]＋(m/z883.8)為母離子，通過碰撞誘導(dǎo)解離獲得二級(jí)質(zhì)譜(圖4C)，此時(shí)碎片離子為[M＋H－亞油酸]＋(m/z603.5)和[M＋H－油酸]＋(m/z601.6)；再設(shè)m/z601.6為母離子，通過碰撞誘導(dǎo)解離獲得三級(jí)質(zhì)譜(圖4D)，此時(shí)得到碎片離子[M＋H－2×油酸]＋(m/z319.3)，由此進(jìn)一步證明其為二油酸亞油酸甘油酯。

圖3 4種甘油三酯的一級(jí)質(zhì)譜圖Fig.3 APCI mass spectra of four triacylglycerols

甘油三酯中不同位置的脂肪酸在質(zhì)譜中斷裂所需能量不同，研究[20]表明酯化在Sn-1/3位的脂肪酸要比酯化在Sn-2位的脂肪酸容易斷裂，因而從甘油骨架Sn-2位上斷裂一個(gè)脂肪酸后形成的1,3-二?；视碗x子的豐度要比從Sn-1/3位上斷裂一個(gè)脂肪酸后形成1,2-二?；视碗x子或2,3-二酰基甘油離子豐度低。根據(jù)甘油三酯在APCI質(zhì)譜中形成二酰基甘油離子豐度的高低可判斷脂肪酸在甘油骨架上的位置分布。

圖4 兩種甘油三酯的碰撞誘導(dǎo)解離質(zhì)譜圖Fig.4 Mass spectra of two triacylglycerols by collision induced dissociation (CID)

例如，表1中tR為17.50min的色譜峰按照上述方法鑒定為二亞油酸油酸甘油酯，從一級(jí)質(zhì)譜中[M＋H－油酸]＋(m/z599.8)和[M ＋ H－亞油酸]＋(m/z601.8)的兩二酰基甘油碎片離子的豐度接近(圖3B)可推斷出，分布于Sn-2位為亞油酸，分布于Sn-1/3位為油酸，此甘油酯為1-油酸-2,3-二亞油酸甘油酯。

同樣，tR為23.67min的色譜峰按照上述方法鑒定為棕櫚酸油酸亞油酸甘油酯，一級(jí)質(zhì)譜中二?；视退槠x子為[M＋H－棕櫚酸]＋(m/z601.7)、[M＋H－亞油酸]＋(m/z577.7)、[M＋H－油酸]＋(m/z575.9)，其中[M＋H－油酸]＋(m/z575.9)豐度最低(圖3C)，可推斷出油酸分布于Sn-2位，棕櫚酸及亞油酸分布于Sn-1/3位。設(shè)母離子為[M＋H]＋(m/z857.7)，經(jīng)過一級(jí)碰撞，得到的二?；视退槠x子中仍然是m/z575.9的豐度最低，進(jìn)一步說明Sn-2位為油酸，此甘油酯為1-棕櫚酸-2-油酸-3-亞油酸甘油酯。

tR為29.25min的色譜峰按照上述方法鑒定為硬脂酸亞油酸油酸甘油酯，一級(jí)質(zhì)譜中二?；视退槠x子為[M＋H－硬脂酸]＋(m/z601.9)、[M＋H－油酸]＋(m/z603.8)，[M＋H－亞油酸]＋(m/z605.7)，其中[M＋H－亞油酸]的豐度最低(圖3D)，可推斷出亞油酸分布于Sn-2位，油酸及硬脂酸分布于Sn-1/3位，此甘油酯為1-硬脂酸-2-亞油酸-3-油酸甘油酯。

綜上，采用HPLC-MS從雞脂中共鑒定出26種甘油酯，并給出脂肪酸位置分布(表1)。包括4種甘油二酯和22種甘油三酯，4種甘油二酯為1-油酸-2-亞油酸甘二酯、1-棕櫚酸-2-亞油酸甘二酯、1,2-二油酸甘二酯、1-棕櫚酸-2-油酸甘二酯；22種甘油三酯為1-亞油酸-2,3-二油酸甘油酯、1,2-二亞油酸-3-油酸甘油酯、1-棕櫚酸-2-油酸-3-亞油酸甘油酯、1,2,3-三油酸甘油酯等。從甘油酯的構(gòu)成可知，本實(shí)驗(yàn)所用雞脂的脂肪酸組成主要為油酸、亞油酸、棕櫚酸、硬脂酸等，這與田穎剛等[21]所報(bào)道的烏雞脂的脂肪酸組成分析結(jié)果一致。

甘油酯在RP-HPLC中洗脫分離時(shí)，其保留時(shí)間與碳原子數(shù)和雙鍵數(shù)有關(guān)，各甘油酯按照等價(jià)碳原子數(shù)(ECN＝甘油三酯脂肪?；紨?shù)之和－2×雙鍵數(shù))從小到大順序洗脫出來，等價(jià)碳原子數(shù)相同時(shí)，以雙鍵數(shù)較高的甘油酯先流出，雙鍵數(shù)較少的后流出[22-23]。表1中所列甘油酯的出峰順序與甘油酯在RP-HPLC上的等價(jià)碳原子數(shù)原則相一致。

雞脂的甘油酯組成比較復(fù)雜，一些等價(jià)碳原子數(shù)相同，但脂肪酸不同的甘油三酯，在RP-HPLC上表現(xiàn)為共流出峰，此時(shí)可通過選擇特征離子，利用提取離子色譜解析，確定共流出甘油酯的準(zhǔn)確保留時(shí)間及脂肪酸的位置分布狀況。

圖1中tR14.57min色譜峰對(duì)應(yīng)的質(zhì)譜存在m/z879.7和m/z853.8兩個(gè)準(zhǔn)分子離子，屬于共流出峰。選擇離子m/z879.7和m/z853.8獲得提取離子色譜圖(圖5)，包括tR為14.49min(m/z879.7)和14.64min (m/z853.8)兩個(gè)色譜峰。與準(zhǔn)分子離子m/z879.7相關(guān)聯(lián)＝的碎片離子為[M＋H－亞麻酸]＋(m/z601.8)、[M＋H－亞油酸]＋(m/z599.8)、[M＋H－油酸]＋(m/z597.8)，豐度分別為5.0、14、3.8，其中[M＋H－油酸]＋(m/z597.8)的豐度最低，說明Sn-2位為油酸，據(jù)此推斷tR＝14.49min對(duì)應(yīng)的組分為1-亞麻酸-2-油酸-3-亞油酸甘油酯。與準(zhǔn)分子離子m/z853.8相關(guān)聯(lián)的碎片離子為[M＋H－十六烯酸]＋(m/z599.9)、[M＋H－亞油酸]＋(m/z573.8)，豐度最低的為[M＋H－亞油酸]＋碎片離子，說明Sn-2位為亞油酸，據(jù)此推斷tR為14.64min對(duì)應(yīng)的組分為1,2-二亞油酸-3-十六烯酸甘油酯。

圖5 總離子流圖中tR＝14.57min色譜峰的提取離子色譜圖Fig.5 Extraction ion chromatograms for peak tR14.57min in total ion current chromatogram

通過提取離子色譜鑒定tR為14.57min色譜峰所得的兩種甘油三酯1-亞麻酸-2-油酸-3-亞油酸甘油酯和1,2-二亞油酸-3-十六烯酸甘油酯的等價(jià)碳數(shù)(ECN)相同(均為42)，這可能是造成它們?cè)赗P-HPLC上沒有得到分離的主要原因。兩種甘油三酯在表1中的出峰順序與甘油酯在RP-HPLC上的ECN出峰原則相符。

2.2 HPLC-ELSD分析

離子阱質(zhì)譜的靈敏度很高，由于可以進(jìn)行多級(jí)質(zhì)譜研究，對(duì)于化合物的定性很有幫助。但APCI-MS是選擇性檢測(cè)器，對(duì)于離子化程度不同的物質(zhì)響應(yīng)不同，因此其不適于定量研究。ELSD是一種可以檢測(cè)所有非揮發(fā)性和半揮發(fā)性物質(zhì)的通用檢測(cè)技術(shù)，它不依賴于被檢測(cè)物的光學(xué)吸收特性，也不受溶劑光學(xué)特性的影響，因此在檢測(cè)過程中，對(duì)各物質(zhì)幾乎具有相同的響應(yīng)因子，適于定量分析。

HPLC-ELSD的色譜圖見圖1，通過與HPLC-APCI MS總離子流圖中各譜峰的保留時(shí)間比對(duì)定性、面積歸一化法定量，分析結(jié)果見表2。

表2 雞脂中甘油酯的HPLC-ELSD分析結(jié)果Table 2 Results of triacylglycerols in chicken fat analyzed by HPLC-ELSD

由表2可知，采用HPLC-APCI-MS分析，面積歸一化法，含量較高的為1-亞油酸-2,3-二油酸甘油酯(16.97%)、1,2-二亞油酸-3-油酸甘油酯(14.33%)、1-棕櫚酸-2-油酸-3-亞油酸甘油酯(11.63%)、1,2,3-三油酸甘油酯(8.72%)。甘油三酯占總甘油酯的99.42%，含量大于3%的甘油三酯有10種，占總甘油酯的88.17%。

采用HPLC-ELSD，面積歸一化法，含量較高甘油酯為1-棕櫚酸-2,3-二油酸甘油酯(23.65%)、1-棕櫚酸-2-油酸-3-亞油酸甘油酯(19.37%)、1-亞油酸-2,3-二油酸甘油酯(16.02%)。甘油三酯占總甘油酯的99.88%，含量大于3%的甘油三酯有7種，占總甘油酯的87.16%。

APCI-MS與ELSD基于不同檢測(cè)原理，對(duì)甘油酯的響應(yīng)值不同，因而檢測(cè)到的各甘油酯的含量不同。例如，HPLC-APCI-MS分析中，1-亞油酸-2,3-二油酸甘油酯、1,2-二亞油酸-3-油酸甘油酯所占比例居于前兩位，但在ELSD中，1-棕櫚酸-2,3-二油酸甘油酯、1-棕櫚酸-2-油酸-3-亞油酸甘油酯所占比例居于前兩位。這可能是由于APCI對(duì)由油酸、亞油酸等不飽和脂肪酸構(gòu)成的甘油酯的響應(yīng)高，它們更易離子化。而ELSD是通用型質(zhì)量檢測(cè)器，對(duì)任何物質(zhì)響應(yīng)基本相同，因而定量結(jié)果更為準(zhǔn)確。

3 結(jié) 論

采用RP-HPLC-APCI MS定性及RP-HPLC-ELSD定量，從雞脂中分析鑒定出26種甘油酯，并判斷了脂肪酸在各甘油酯中的位置分布。包括4種甘油二酯和22種甘油三酯，主要為甘油三酯，占99.88%。含量較高的為1-棕櫚酸-2,3-二油酸甘油酯、1-棕櫚酸-2-油酸-3-亞油酸甘油酯、1-亞油酸-2,3-二油酸甘油酯。構(gòu)成雞脂的甘油酯的脂肪酸主要為棕櫚酸、油酸、亞油酸和硬脂酸，其中硬脂酸含量較少。采用RP-HPLC-APCI MS結(jié)合RP-HPLC-ELSD有效地分析了雞脂的甘油酯結(jié)構(gòu)及組成，為動(dòng)物脂肪甘油酯分析方法的建立提供了參考。

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Composition and Structural Analysis of Glycerides in Chicken Fat by HPLC-MS and HPLC-ELSD

JIN Lin-xi，XIE Jian-chun*，WANG Shi，SUN Bao-guo
(Beijing Key Laboratory of Food Flavor Chemistry, Beijing Higher Institution Engineering Research Center of Food Additives and Ingredients, Beijing Technology and Business University, Beijing 100048, China)

The composition and structure of glycerides in chicken fat were analyzed by reversed-phase high performance liquid chromatography-atmospheric pressure chemical ionization mass spectrometry (RP-HPLC-APCI MS) and reversed-phase high performance liquid chromatography with an evaporative light-scattering detector (RP-HPLC-ELSD). The chromatographic separation was performed on a C18 using a mobile phase of acetonitrile-methylene chloride (60:40,V/V). Glycerides were monitored by APCI MS in positive mode. According to [M+H]＋and [M+H－ RCOOH]＋, 26 glycerides were identified. Based on the abundance of [M+H－RCOOH]＋and ion fragments from collision induced dissociation (CID) of ion trap, the distribution of fatty acids in glycerides was deduced. Triacylglycerols represented 99.88% of total glycerides as demonstrated through RP-HPLCELSD analysis and quantification by peak area normalization. Among these triacylglycerols, 1-palmitoyl-2,3-di-oleoyl-glycerol revealed the highest content (23.65%), followed by 1-palmitoyl-2-oleoyl-3-linoleoyl-glycerol (19.37%), and 1-linoleoyl-2,3-dioleoyl-glycerol (16.02%).

chicken fat；glyceride；RP-HPLC；APCI MS；ELSD

TS201.2

A

1002-6630(2012)18-0149-07

2011-11-01

國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(31171755)；北京市自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(2122013)；

北京市教委科技發(fā)展計(jì)劃重點(diǎn)項(xiàng)目(KZ20101001011)；“十二五”國(guó)家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(2011BAD23B01)；

北京市教委科研基地-科技創(chuàng)新平臺(tái)-香料化學(xué)研究開發(fā)平臺(tái)項(xiàng)目(201149)；北京工商大學(xué)研究生創(chuàng)新基金項(xiàng)目

靳林溪(1986—)，女，碩士研究生，研究方向食品香料化學(xué)。E-mail：jinlinxi156@163.com

*通信作者：謝建春(1967—)，女，教授，博士，研究方向食品香料化學(xué)。E-mail：xjchun@th.btbu.edu.cn