劉軼秋，徐 磊，張瑞婷

(中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所，北京 100081)

近幾年，隨著獸藥市場(chǎng)需求的不斷加大，獸用生物制品的產(chǎn)量和品種也在持續(xù)增長(zhǎng)。支原體污染是獸用生物制品生產(chǎn)中的一個(gè)常見(jiàn)問(wèn)題，監(jiān)督抽檢對(duì)保障產(chǎn)品質(zhì)量有著重要作用。為了解全國(guó)獸用生物制品支原體污染情況，筆者匯總了近5年(2007-2011年)中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所抽檢的全國(guó)26家企業(yè)生產(chǎn)的22個(gè)品種141批制品的支原體檢驗(yàn)情況，并對(duì)抽檢結(jié)果進(jìn)行了分析，提出了提高生物制品支原體質(zhì)量監(jiān)測(cè)工作的幾點(diǎn)建議。

1 總體抽檢結(jié)果

1.1 各年度生物制品支原體檢驗(yàn)項(xiàng)合格率 各年度合格率見(jiàn)表1。抽檢的141批生物制品中支原體檢驗(yàn)項(xiàng)合格批數(shù)為113批，不合格28批，合格率為80.1%。

表1 各年度生物制品支原體檢驗(yàn)項(xiàng)抽檢情況

1.2 不同品種生物制品支原體檢驗(yàn)項(xiàng)合格率 抽檢的22種生物制品中有16種支原體檢驗(yàn)抽檢合格率100%，占抽檢品種的72.7%(表2)。

表2 不同品種生物制品支原體檢驗(yàn)項(xiàng)的抽檢情況

1.3 各年度生物制品企業(yè)支原體檢驗(yàn)項(xiàng)抽檢情況被抽檢的26家企業(yè)生產(chǎn)的141批生物制品中，有8家生產(chǎn)企業(yè)存在支原體檢驗(yàn)不合格項(xiàng)，不合格企業(yè)占被抽檢企業(yè)總數(shù)的30.8%。

2 結(jié)果分析

2.1 支原體檢驗(yàn)抽檢合格率逐年提高 2007-2011年，中監(jiān)所抽檢的生物制品企業(yè)覆蓋了全國(guó)17個(gè)省、市、自治區(qū)，包括北京、河北、山東、遼寧、黑龍江、吉林、江蘇、浙江、江西、湖北、湖南、四川、重慶、甘肅、福建、青海、新疆。2007-2010年抽檢的生物制品中，均有不同批次的支原體檢驗(yàn)項(xiàng)不合格制品，尤以2008年合格率最低，為63.3%。2009年開(kāi)始合格率有所提高，2009年、2010年、2011年制品合格率分別為75.0%、86.4%、100%。

2.2 支原體檢驗(yàn)抽檢覆蓋面有待提高(表3) 目前檢驗(yàn)項(xiàng)目中涉及支原體檢驗(yàn)的生物制品共82種，而2007-2011年共抽檢品種22種，抽檢品種僅占全部品種的26.8%。各年度抽檢產(chǎn)品種類(lèi)不多，禽、豬、羊和犬用疫苗抽檢比例不均衡，且有很多種類(lèi)產(chǎn)品多年未進(jìn)行監(jiān)督抽檢。

表3 生物制品抽檢品種統(tǒng)計(jì) 個(gè)

2.3 支原體檢驗(yàn)不合格品種較為集中 抽檢的141批生物制品中，禽用疫苗54批，全部合格。豬用疫苗37批，14批不合格;羊用疫苗14批，9批不合格;其他制品36批，5批不合格。支原體檢驗(yàn)不合格制品集中在豬用疫苗、羊用疫苗和其他類(lèi)制品上，共計(jì)6個(gè)品種:狂犬病活疫苗、水貂犬瘟熱活疫苗、豬乙型腦炎活疫苗、山羊痘活疫苗、豬偽狂犬病活疫苗(SA215株)、豬傳染性胃腸炎-流行性腹瀉二聯(lián)活疫苗(圖1)。因此，應(yīng)對(duì)此類(lèi)制品加強(qiáng)監(jiān)督抽檢。

圖1 6種不合格制品抽檢批數(shù)與合格批數(shù)比例圖

2.4 企業(yè)越來(lái)越重視生物制品支原體污染問(wèn)題2007年開(kāi)始出現(xiàn)不合格制品企業(yè)，被抽檢的6家企業(yè)中有1家企業(yè)存在不合格制品;2008年被抽檢的14家企業(yè)中有6家企業(yè)存在不合格制品，不合格企業(yè)占抽檢企業(yè)的42.8%，達(dá)到近幾年的最高峰。生物制品污染支原體會(huì)給企業(yè)帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)損失，越來(lái)越多的企業(yè)開(kāi)始重視支原體污染問(wèn)題。故自2008年之后被抽檢的生物制品不合格企業(yè)成下降趨勢(shì)，2009年不合格企業(yè)占被抽檢企業(yè)的40%，2010年不合格企業(yè)占被抽檢企業(yè)的12.5%，直至2011年被抽檢的10家企業(yè)中，不合格企業(yè)為0家。

3 建議

3.1 制定合理的監(jiān)督計(jì)劃，加強(qiáng)監(jiān)督抽檢力度為了更好的監(jiān)測(cè)生物制品質(zhì)量，應(yīng)制定科學(xué)的抽檢計(jì)劃，加大抽檢的覆蓋面，使生物制品抽檢率上升到3%～5%。增加抽檢產(chǎn)品的種類(lèi)，使抽檢覆蓋品種達(dá)到80%以上。加強(qiáng)獸用生物制品流通環(huán)節(jié)的監(jiān)督抽檢。對(duì)抽檢不合格的企業(yè)重點(diǎn)監(jiān)督，對(duì)不合格的產(chǎn)品加大抽檢數(shù)量。定期召開(kāi)全國(guó)生物制品監(jiān)督抽檢結(jié)果分析會(huì)議，分析抽檢工作中存在的問(wèn)題，充分發(fā)揮監(jiān)督工作的技術(shù)效能。

3.2 建立并完善生物制品信息溯源監(jiān)督機(jī)制 將國(guó)內(nèi)各生物制品企業(yè)信息、生產(chǎn)基本情況組成獸藥監(jiān)管信息發(fā)布平臺(tái)，將產(chǎn)品抽檢結(jié)果及時(shí)在網(wǎng)上公布。對(duì)不合格產(chǎn)品、抽檢存在不合格產(chǎn)品的企業(yè)在網(wǎng)上公示，為生物制品行業(yè)提供及時(shí)準(zhǔn)確的監(jiān)控信息，及時(shí)反映全國(guó)獸用生物制品的整體質(zhì)量狀況，為增強(qiáng)政府宏觀調(diào)控能力提供參考。

3.3 提高獸用生物制品質(zhì)量，防止支原體污染 生物制品的支原體污染［1］是生產(chǎn)中比較常見(jiàn)的問(wèn)題，常給企業(yè)帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)損失。引起支原體污染的原因很多，如原材料本身受到污染、人員操作不慎、實(shí)驗(yàn)室交叉污染等因素。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)制定嚴(yán)格的管理制度，定期對(duì)質(zhì)檢部門(mén)檢驗(yàn)人員進(jìn)行培訓(xùn)，不斷提高檢驗(yàn)水平操作技能，強(qiáng)化無(wú)菌意識(shí)，嚴(yán)格按照GMP規(guī)定和實(shí)驗(yàn)室規(guī)范進(jìn)行操作。

3.4 開(kāi)展檢驗(yàn)新方法的研究 根據(jù)《中國(guó)獸藥典》規(guī)定，支原體檢驗(yàn)采用培養(yǎng)法［2-3］，此種方法是目前的“金標(biāo)準(zhǔn)”，但其檢驗(yàn)周期較長(zhǎng)，為29 d，操作也較繁瑣。因此很多生物制品企業(yè)在做相關(guān)產(chǎn)品檢驗(yàn)時(shí)，為了等待檢驗(yàn)結(jié)果，而不得不影響產(chǎn)品的銷(xiāo)售時(shí)間。為了使支原體檢驗(yàn)更及時(shí)、準(zhǔn)確，還應(yīng)不斷開(kāi)展其他方法的研究與驗(yàn)證。目前可供參考的方法如 DNA 熒光染色法［4-5］、PCR 法［6］、瓜氨酸檢驗(yàn)法［7］等，這些方法各有利弊，最終哪一種方法更及時(shí)、準(zhǔn)確，適于操作，并能最終取代培養(yǎng)法，還需進(jìn)行大量的實(shí)驗(yàn)研究來(lái)確證。

［1］朱慶虎，劉蘭剛，康二勇.生物制品中的支原體污染［J］.畜牧獸醫(yī)科技信息，2010，6:9-11.

［2］中國(guó)獸藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)獸藥典二○○五年版三部［S］.

［3］中國(guó)獸藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)獸藥典二○一○年版三部［S］.

［4］李晶梅，張 萍，秦紅剛，等.DNA熒光染色和 PCR技術(shù)在PRRSV凍干疫苗中支原體檢測(cè)的應(yīng)用［J］.中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2011，33(12):957-960.

［5］余 華，杜永鳳，嚴(yán)玉寶，等.DNA熒光染色法和培養(yǎng)法在支原體檢測(cè)中的比較［J］.安徽農(nóng)業(yè)科技，2010，38(8):4039-4041.

［6］李菁竹.支原體污染的巢氏PCR檢測(cè)法的摸索及其初步驗(yàn)證［D］.武漢:武漢生物制品研究所，2010.

［7］梁少東，黃小樂(lè)，嚴(yán) 媛，等.一種快速判定細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染的方法——瓜氨酸測(cè)定法［J］.生物技術(shù)通訊，2008，19(6):892-894.