孔翠萍 柴 川 崔小兵

1.南京瑞爾醫(yī)藥有限公司，江蘇 南京 210000;2.南京中醫(yī)藥大學(xué)，江蘇 南京 210029

山藥不同炮制品對(duì)小腸收縮及對(duì)消化酶活性的影響

孔翠萍1柴 川2崔小兵2

1.南京瑞爾醫(yī)藥有限公司，江蘇 南京 210000;2.南京中醫(yī)藥大學(xué)，江蘇 南京 210029

目的:觀察山藥的不同炮制品對(duì)家兔小腸收縮及其對(duì)唾液淀粉酶活性的影響。方法:通過離體回腸法觀察山藥不同炮制品對(duì)小腸收縮作用的影響。以紫外分光光度法觀察山藥的不同炮制品其對(duì)消化酶活性的影響。結(jié)果:麩炒山藥對(duì)小腸收縮抑制作用最強(qiáng)，具有明顯的抑制小腸收縮作用。山藥不同炮制品對(duì)體外唾液淀粉酶活力的作用無顯著變化。說明麩炒山藥的健脾作用與唾液淀粉酶的活性無關(guān)。結(jié)論:麩炒山藥對(duì)小腸的收縮有明顯的抑制作用。

麩炒山藥，小腸收縮抑制，消化酶活性

山藥為薯蕷科多年生宿根蔓草植物山藥 (Dioscorea opposita Thunb.)的塊根，又名白苕、土薯、大薯、薯藥，具有補(bǔ)脾、益肺、固腎、益精的作用，原名薯蕷，首見于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為上品?！侗静菥V目》云:“山藥性溫味甘平無毒、健脾胃、益肺腎、止瀉痢，化痰涎，潤皮毛”。山藥的炮制方法有麩炒、清炒等，不同的炮制方法對(duì)山藥的活性有顯著影響。本文通過離體回腸及體外唾液淀粉酶的活性的測(cè)定，比較山藥生品、山藥麩炒品、山藥清炒品的作用機(jī)制，為山藥炮制提供了一個(gè)客觀的評(píng)價(jià)方法，同時(shí)為山藥焦香健脾理論提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 藥品與試劑

1.1 山藥的炮制［1］

依據(jù)中藥炮制的相關(guān)理論，本實(shí)驗(yàn)將山藥 (Rhizoma Dioscoreae)加工為凈制山藥、炒山藥、麩炒山藥三個(gè)品種。

炒山藥 稱取適量凈制山藥片，置燒熱的平底鍋中，用文火加熱，炒至深黃色，有香氣，取出放涼。

麩炒山藥 稱取適量麥麩，置燒熱的平底鍋中，炒至冒煙，放入凈制山藥片，不斷翻炒，炒至深黃色，篩去麩皮，山藥和麩皮各冷涼備用。每100kg藥物，用麥麩10kg。

1.2 試劑

NaCl、 KCl、 NaH2PO4、 NaHCO3、 MgCl2、 CaCl2、NaOH、可溶性淀粉、Na2HPO、苯酸鉀、KI、KIO3、HCl都是AR級(jí)。

1.3 藥物水提液的制備

山藥水提液 凈制山藥，炒黃山藥，麩炒山藥各3g于燒杯中，加水 30ml，煮沸 0.5h，冷卻，過濾，留取上清液。

1.4 動(dòng)物

大耳白家兔，清潔級(jí)，體重2.0－2.5 kg，2月齡，南京中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，生產(chǎn)許可證號(hào):SCXK(滬)2007－0005。

1.5 儀器

多功能生理藥理記錄儀Power Lab，Power Lab/8s，澳大利亞AD儀器公司。水浴恒溫振蕩器，上海躍進(jìn)醫(yī)療器械廠。754型紫外分光光度計(jì)，上海光譜儀器有限公司。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 對(duì)小腸收縮作用的影響［2－3］

取禁食24h的家兔，以擊斃法處死，立即常規(guī)剖腹。取出回腸，去除附著的系膜或脂肪等組織。迅速浸入在4℃充氧 的 臺(tái) 氏 液［4］(NaCl 8.00g，KCl 0.20g，NaH2PO40.05g，NaHCO31.00g，MgCl20.10g，CaCl20.20g，葡萄糖1.00g，定容至1L)溶液中。取回腸一段，懸掛于盛有臺(tái)氏液的麥?zhǔn)显〔壑?，一端系在L型通氣管上，加以固定，供給含有5%CO2的氧氣，另一端固定在壓力換能器上，基礎(chǔ)張力1g，浴槽溫度37.0℃，穩(wěn)定1h。用Power lab進(jìn)行描記。待自發(fā)性節(jié)律恢復(fù)后，描記基線，然后開始用藥，記錄張力均值，計(jì)算收縮百分率。

2.2 對(duì)唾液淀粉酶活性的影響［5］

取50ml刻度試管數(shù)只，a、b、c、d。一只作對(duì)照管，其余作測(cè)定管。各管內(nèi)加0.04%可溶性淀粉溶液 (可溶性淀粉 0.2g，加蒸餾水 5ml，搖成混懸液，稱取無水Na2HPO413.3g，加蒸餾水250ml，煮沸后加入淀粉溶液，繼續(xù)煮沸1min，冷卻后加蒸餾水稀釋至500ml)5ml。將測(cè)定管置于37℃水浴內(nèi)預(yù)溫5min。b及唾液淀粉酶溶液 (1∶1000)0.5ml混勻，c管加入待測(cè)樣品液0.1ml混勻，再置于37℃水浴15min后取出;于各管中加入0.01mol/L碘應(yīng)用液(碘酸鉀3.56g及碘化鉀45g，置于1L容量瓶中，加蒸餾水約800ml，緩緩加入濃鹽酸9ml，搖勻，再加蒸餾水定容，使用時(shí)按1:10稀釋，盛于棕色瓶中保存)5ml，并用蒸餾水稀釋至50ml刻度;立即混勻，在570nm處進(jìn)行比色測(cè)定，以PBS緩沖液 (NaH2PO4約8.0g，加生理鹽水至1L，用10%NaOH調(diào)PH值至8.0)校正光密度到零點(diǎn)，讀取各管光密度值。通過a管光密度值－b管光密度值計(jì)算酶的作用，通過－c管光密度值－d管光密度值比計(jì)算樣品溶液干預(yù)下酶的作用，比較兩次酶的作用效果，觀察樣品溶液對(duì)酶活性的響。

2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 數(shù)據(jù)均以Excel統(tǒng)計(jì)，以±SD表示，進(jìn)行t檢驗(yàn)。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 山藥的不同炮制品對(duì)小腸收縮作用的影響

參照2.1方法對(duì)山藥不同炮制品進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1，柱狀分析圖見1。

表1 山藥不同炮制品水提液對(duì)離體小腸收縮作用的影響 (±SD，n=5)

表1 山藥不同炮制品水提液對(duì)離體小腸收縮作用的影響 (±SD，n=5)

注:*P＜0.05。

組別 抑制收縮百分率 (%)1.1±0.9凈制山藥 1.47±0.29*炒黃山藥 1.54±0.24*麩炒山藥 1.8±1.1空白*

圖1 山藥不同炮制品水提液對(duì)離體小腸收縮作用的影響

實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:凈制山藥水提液、炒黃山藥水提液、麩炒山藥水提液對(duì)離體小腸有顯著抑制收縮作用 (*P＜0.05)。麩炒后麥麩中健脾作用的物質(zhì)可能轉(zhuǎn)移進(jìn)入了山藥。

3.2 對(duì)消化酶活性的影響

參照2.2方法對(duì)山藥不同炮制品進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2。

表2 不同山藥炮制品提取液對(duì)唾液淀粉酶活性的影響 ±SD，n=5)

表2 不同山藥炮制品提取液對(duì)唾液淀粉酶活性的影響 ±SD，n=5)

組別 酶活力抑制百分率 (%)15±10麩炒山藥 25±19炒黃山藥 31±21凈制山藥空白48±38

本實(shí)驗(yàn)方案下，山藥不同炮制品對(duì)體外唾液淀粉酶活力的促進(jìn)作用無顯著意義。說明麩炒山藥的健脾作用與體外唾液淀粉酶的活性無關(guān)?？赡苁軐?shí)驗(yàn)方法限制，是否有該方面功效仍待進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。

4 結(jié)論

通過紫外分光測(cè)光度法觀察山藥麩炒前后對(duì)消化酶的活性的影響，用離體回腸法觀察其對(duì)小腸收縮作用的影響。結(jié)果提示山藥經(jīng)麩炒后可增強(qiáng)其健脾作用，其健脾作用增強(qiáng)可能與調(diào)節(jié)小腸收縮作用有關(guān);山藥不同炮制品對(duì)體外唾液淀粉酶活力的促進(jìn)作用無顯著影響，說明麩炒山藥的健脾作用與體外唾液淀粉酶的活性無關(guān)。

［1］龔千鋒.中藥炮制學(xué)［M］.北京:中國中醫(yī)藥出版社，2003:62.

［2］岳嶺，華永慶，崔小兵，李偉.炒焦麥麩健脾有效部位初探［J］.時(shí)珍國醫(yī)國藥，2011，22(2):388－389.

［3］李偉，文紅梅，崔小兵，等.白術(shù)健脾有效成分研究［J］.南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2006，22(6):366.

［4］徐叔云.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)［M］.第3版.北京:人民衛(wèi)生出版社，2002:1834，1311.

［5］岳嶺，華永慶，崔小兵，李偉.不同炮制方法對(duì)麥麩健脾功效的影響［J］.現(xiàn)代中藥研究與實(shí)踐，2010，24(3):41－44.

R965.2

A

1007－8517(2012)15－0062－02

南京中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)一級(jí)學(xué)科開放課題資助，項(xiàng)目編號(hào):2011ZYX2－004;南京中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)研究與重點(diǎn)培育專項(xiàng)基金資助，項(xiàng)目編號(hào):10XJC07。

孔翠萍，女，主要從事藥物制劑研究。E－mail:kcp116@126.com。

崔小兵 (1975－)，男，江蘇如皋人，博士，高級(jí)實(shí)驗(yàn)師，主要從事新藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究。E－mail:xiaobingcui@163.com。

2012.05.17)