陳婉
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大豆制品中胰蛋白酶抑制劑失活方法的研究進(jìn)展
陳婉
(福建中檢華日食品安全檢測有限公司,福建 福州 350002)
大豆胰蛋白酶抑制劑是大豆中主要的抗?fàn)I養(yǎng)因子,降低了大豆制品的營養(yǎng)質(zhì)量和食用安全性,在大豆制品加工過程中必須使其失活。介紹了通過熱處理、微波技術(shù)、壓力處理、超聲波處理、高壓脈沖電場、化學(xué)還原、酚類化合物絡(luò)合、酶法水解、微生物發(fā)酵及親和色譜分離等鈍化大豆胰蛋白酶抑制劑的方法。
大豆;胰蛋白酶抑制劑;失活
大豆(Glycine max (L.) Merr.)蛋白含量豐富,多年的研究發(fā)現(xiàn)大豆具有降低血漿膽固醇含量及預(yù)防癌癥、糖尿病和肥胖癥等疾病等保健功能,是人類日常飲食和動(dòng)物飼料的優(yōu)質(zhì)植物蛋白來源。大豆原產(chǎn)于我國,現(xiàn)今每年全世界的產(chǎn)量已經(jīng)超過24 000萬噸。然而生大豆中含有的一些抗?fàn)I養(yǎng)因子,如大豆胰蛋白酶抑制劑(Soybean trypsin inhibitor,STI)、外源凝集素和脲酶等大大降低了大豆制品的營養(yǎng)質(zhì)量和食用安全性。Osborne等在1917年首次報(bào)道了小鼠食用生大豆后,其生長受到了抑制。后續(xù)研究證明,動(dòng)物食用了未經(jīng)處理的生大豆可能會(huì)引起生長抑制、飼料轉(zhuǎn)化率降低、甲狀腺腫大、胰腺增大、低血糖和肝臟受損等反應(yīng)。為了改善大豆制品的營養(yǎng)質(zhì)量,抗?fàn)I養(yǎng)因子必須在其加工過程中通過熱處理或其它分離方法除去。在這些抗?fàn)I養(yǎng)因子中,STI降低了大豆蛋白的消化率,相對于凝集素和脲酶更能引起大豆?fàn)I養(yǎng)價(jià)值的下降。因而在加工中一般以STI的殘留活性來衡量大豆制品抗?fàn)I養(yǎng)因子的殘留活性。Hackler等的研究認(rèn)為,當(dāng)STI的活性損失90%以上,大豆制品才能達(dá)到其最高的營養(yǎng)價(jià)值,即最大的蛋白質(zhì)效率比值,方可認(rèn)為該制品是安全的。
目前,研究者已從大豆中分離出兩種類型的胰蛋白酶抑制劑,分別是Kunitz型胰蛋白酶抑制劑(Kunitz Soybean trypsin inhibitor,KSTI)和Bowman-Birk型胰蛋白酶抑制劑(Bowman-Birk trypsin inhibitor,BBTI)。KSTI在1945年由Kunitz首次從大豆中分離得到。KSTI在大豆中的含量約為1.4%,其分子量約為20 000Da,具有一個(gè)與胰蛋白酶直接結(jié)合的位點(diǎn)。KSTI的氨基酸序列首次由Koide等人測得。Kim等人發(fā)現(xiàn)KSTI由3種非常接近的亞型組成,它們都含有181個(gè)氨基酸殘基和2個(gè)分子內(nèi)二硫鍵。BBTI的分子量為6 000~12 000Da,在大豆中的含量約為0.6%,具有與胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶結(jié)合的位點(diǎn),含有7個(gè)分子內(nèi)二硫鍵[13]。Huang等的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,KSTI對胰蛋白酶的抑制活性強(qiáng)于BBTI[14]。
3.1.1熱處理
STI本身是一種蛋白質(zhì),通過加熱使其發(fā)生不可逆變性、失去抑制活性是大豆制品傳統(tǒng)加工中降低STI活性的方法。生大豆中STI活性下降的程度與多方面因素有關(guān),如加熱的溫度、時(shí)間、加熱過程使用的壓力、空氣濕度和大豆顆粒的大小等。顯然,加熱溫度、含水量和壓力越高,加熱時(shí)間越長,顆粒越小則抗?fàn)I養(yǎng)因子的破壞程度越大。Plahar等將大豆置于沸水處理20min后發(fā)現(xiàn)大豆中STI活性有效降低,并除去了大豆中的豆腥味[15]。Qin等發(fā)現(xiàn)大豆經(jīng)100℃處理40min后,STI活性下降至原來的11.7%;而經(jīng)118℃加熱10min后STI活性下降至10.7%;以136℃處理5min后,STI活性僅保留2.4%[16]。黃惠華等研究了豆奶中熱處理對STI活性的影響,結(jié)果發(fā)現(xiàn)熱處理導(dǎo)致豆奶中蛋白質(zhì)巰基的變化從而引起蛋白質(zhì)組分的變化,在95~140℃范圍內(nèi),溫度提高30℃,鈍化90% STI的熱處理時(shí)間縮短為原來的1/10;以95℃加熱使90%的STI失活需要35 min,120℃需7 min,而140℃只需1min左右[1]。
干熱處理與濕熱處理相比,由于水蒸氣比空氣對熱的傳遞具有更強(qiáng)的穿透性,濕熱處理更有利于鈍化STI的活性,因而一般的熱處理均會(huì)采用濕熱的方法進(jìn)行。曹志華等將大豆粉置于110℃(0.05MPa)下進(jìn)行濕熱處理,5 min即可使STI活性下降96%[2]。Radha等對白豆片進(jìn)行干熱條件,處理30min后STI活性沒有發(fā)生明顯改變;而經(jīng)121℃ 15psi處理10min后,STI活性下降至原來的15.6%,而處理30min后,STI活性僅為2.6%[19]。陳秋東等從節(jié)約能源和簡化工藝的角度出發(fā),先對大豆(不浸水不破碎組織)進(jìn)行90℃干熱處理15min,待浸水破碎后立即以125℃熱處理10min,結(jié)果發(fā)現(xiàn),大豆中致甲狀腺腫素、外源凝集素和STI的去除率均可達(dá)95%以上[3]。
在STI中,KSTI和BBTI具有不同的熱穩(wěn)定性。由于BBTI含有更多的分子內(nèi)二硫鍵,因而具有更強(qiáng)的熱穩(wěn)定性。BBTI在大多數(shù)食品基質(zhì)(不同的pH范圍)中是穩(wěn)定的,在沸水中加熱10min或在胃腸道內(nèi)受多種蛋白酶的作用均能保持活性。Magdi等研究了KSTI和BBTI在不同pH值下的熱穩(wěn)定性。結(jié)果發(fā)現(xiàn),BBTI在中性和酸性條件下經(jīng)沸水長時(shí)間加熱后仍能保持75%以上的活性,同等條件下KSTI僅保留25%以下的活性;但在堿性條件下,兩者經(jīng)沸水加熱后其活性均迅速下降;在pH 7的條件下,對BBTI和KTI進(jìn)行121℃ 15psi處理60min后,BBTI約保留50%的活性,而此時(shí)KSTI損失將近96%的活性[17]。
為了減少熱處理對大豆蛋白及大豆的一些具有生物活性物質(zhì)的損害,研究者采用超高溫瞬時(shí)加熱(UHT)的方法對豆奶進(jìn)行處理,以期在殺菌的同時(shí)鈍化STI。Kwok等采用了間接UHT對豆奶進(jìn)行殺菌,研究發(fā)現(xiàn)在143℃加熱約60s可使STI活性下降至原來的10%。雖然經(jīng)此處理后產(chǎn)品在微生物指標(biāo)方面達(dá)到要求,但是后續(xù)研究發(fā)現(xiàn)有部分產(chǎn)品STI活性的殘留量超過了10%[18]。Yuan等發(fā)現(xiàn)采用傳統(tǒng)的蒸汽殺菌,使豆奶在100℃保持20min可使STI活性降至原來的13%;而采用經(jīng)80℃浸泡2min的大豆進(jìn)行加工,最后采用UHT殺菌,可使STI活性下降至10%左右;與傳統(tǒng)產(chǎn)品相比,經(jīng)過80℃浸泡處理后,脂肪氧化酶被鈍化,產(chǎn)品的豆腥味更少[19]。
雖然有報(bào)道指經(jīng)熱處理后STI被鈍化,同時(shí)大豆的營養(yǎng)質(zhì)量在某些程度上得到了改善。但是大豆富含蛋白質(zhì),經(jīng)過熱處理后大豆蛋白會(huì)發(fā)生聚集和變性,從而導(dǎo)致大豆蛋白的溶解度、消化率及一些功能特性下降,而與STI一樣具有生物活性的物質(zhì)也會(huì)失去活性。如果要使STI完全失活,則必然導(dǎo)致對大豆的過度加熱,除了會(huì)引起上述提及的大豆蛋白變性,還會(huì)使大豆蛋白中的一些必須氨基酸如蛋氨酸、賴氨酸、色氨酸、精氨酸和半胱氨酸等的損失。若采用熱處理使大豆制品中STI失活,必須平衡STI在高溫下被鈍化和熱對大豆蛋白及活性物質(zhì)的破壞之間的關(guān)系,既使大豆制品達(dá)到安全的要求,同時(shí)最大程度保留大豆的營養(yǎng)。顯然熱處理很難同時(shí)達(dá)到這兩方面的要求,但是熱處理仍是目前大豆加工中所使用的最廣泛的方法。
3.1.2微波處理
采用微波加熱技術(shù)進(jìn)行食品加工具有傳熱快速、均勻,表面溫度低,物料能選擇性吸收能量等優(yōu)點(diǎn),可較大程度地保持食品的質(zhì)量,提高生產(chǎn)效率。Rajko等利用微波對大豆進(jìn)行處理,經(jīng)過優(yōu)化工藝參數(shù),STI活性最低可下降至原來的4.28%,該研究認(rèn)為微波技術(shù)用于鈍化STI具有快速、高效等優(yōu)點(diǎn)[20]。Barac等將大豆破碎后,用2 450MHz的微波進(jìn)行處理,STI活性下降至原來的13.33%,大豆的溶解性蛋白含量和多肽組成受到了明顯的影響[21]。
3.1.3壓力處理
超高壓技術(shù)已被用于殺死微生物、鈍化酶活和使蛋白質(zhì)變性的研究中。Van Der Ven等利用超高壓技術(shù)處理經(jīng)浸泡的大豆和豆?jié){,結(jié)果發(fā)現(xiàn)兩者的STI活性均有下降。當(dāng)以豆?jié){為原料,起始溫度在77~90℃之間,壓力在525~750 MPa之間處理時(shí)間少于2min,STI的活性可下降至10%以下[22]。
Haddad等采用一套瞬時(shí)降壓系統(tǒng)(instantaneous controlled pressure drop,DIC)對大豆進(jìn)行處理。DIC是一種用于處理生物材料的水-熱-機(jī)械處理系統(tǒng)。此系統(tǒng)將潤濕的原料置于處理腔內(nèi),用水蒸汽進(jìn)行升溫加壓(可達(dá)170 ℃,8×105 Pa)處理一段相對短的時(shí)間(數(shù)秒至1分鐘),然后馬上打開連通一個(gè)體積至少是樣品處理腔50倍的真空罐(50×102 Pa)的閥門,使處理腔的壓力迅速下降,并導(dǎo)致樣品中部分水分氣化而形成多孔性結(jié)構(gòu)。短時(shí)的處理和處理后溫度隨著壓力下降而迅速下降,減少了熱對產(chǎn)品品質(zhì)的破壞,而且DIC可用于處理完整的大豆。大豆在此系統(tǒng)中經(jīng)1min處理,STI活性下降94%,而處理6min后,STI活性下降99%[23]。
3.1.4超聲波處理
由于具有獨(dú)特的物理化學(xué)作用,超聲波處理已被應(yīng)用于蛋白質(zhì)和酶的鈍化,因此這種處理方法也可作為一種協(xié)同的工藝應(yīng)用于鈍化大豆制品中的STI。Liang等利用20 kHz的超聲波處理豆奶中的STI,結(jié)果表明,當(dāng)處理溫度為80℃、功率為150W、pH值為7.0下處理5min后,STI的活性下降了73%。由于剩余的STI活性是由BBTI提供,而BBTI對熱和20 kHz的超聲波比較穩(wěn)定,所以此時(shí)STI難以被完全鈍化[24]。黃惠華等采用頻率為20 kHz、振幅為65%的超聲波場分別處理KSTI和BBTI。結(jié)果發(fā)現(xiàn),處理后KSTI活性下降55%,圓二色譜結(jié)果顯示其β轉(zhuǎn)角和無規(guī)卷曲的含量分別下降至10.8%和54%,而β折疊的含量則增加至35.2%,同時(shí)有約71.5%的二硫鍵轉(zhuǎn)變成巰基;而BBTI的二級(jí)結(jié)構(gòu)則表現(xiàn)穩(wěn)定,其β折疊、無規(guī)卷曲結(jié)構(gòu)以及對胰蛋白酶的抑制活性基本不受影響,僅有5.29%的二硫鍵轉(zhuǎn)化成巰基;由此認(rèn)為超聲波可能是通過影響KSTI的二硫鍵,使其二級(jí)結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,從而影響其活性[4]。
3.1.5高壓脈沖電場
高壓脈沖電場是一種中低溫食品加工和保藏方法,以高電壓、短脈沖時(shí)間及溫和的溫度條件處理液態(tài)或半固態(tài)食品。在高壓脈沖電場下,微生物會(huì)被殺死,一些蛋白質(zhì)、酶被鈍化。與傳統(tǒng)的熱殺菌相比,由于處理時(shí)間短、食品成分受到熱的破壞較少,因而能較大程度保存食品原有的風(fēng)味、口感和營養(yǎng)價(jià)值。李迎秋等研究了高壓脈沖電場對STI的鈍化效果。結(jié)果顯示,隨著脈沖強(qiáng)度和脈沖處理時(shí)間的延長,STI活性有所下降,但效果不太顯著,由此可知單獨(dú)的高壓脈沖電場處理并不能徹底鈍化STI活性。當(dāng)脈沖電場和加熱聯(lián)合使用時(shí),可以顯著地鈍化STI的活性,尤其是先進(jìn)行脈沖處理后進(jìn)行加熱,鈍化效果更為顯著,STI活性可下降74%。
3.2.1還原劑處理
由于KSTI和BBTI均含有分子內(nèi)二硫鍵,在大豆粉中添加還原劑,打斷這些二硫鍵,改變其構(gòu)型,使其不能與胰蛋白酶結(jié)合,是鈍化STI的方法之一。Herkelman等在大豆中添加偏亞硫酸氫鈉,使鈍化STI的加熱時(shí)間減少一半[25]。Friedman等發(fā)現(xiàn)當(dāng)有半胱氨酸或乙酰半胱氨酸存在下,STI更容易在熱處理下失活,該研究認(rèn)為控制二硫鍵交換可能有助于使含二硫鍵的有毒蛋白質(zhì)失活[26]。Faris等通過NADP-硫氧還蛋白系統(tǒng)處理白豆粉,以還原其蛋白質(zhì)中的二硫鍵,從而提高胰蛋白酶和胰酶對豆粉中蛋白質(zhì)的消化率。經(jīng)處理后,胰蛋白酶和胰酶對其消化率分別提高29.3%和60.6%,兩種酶對豆粉中蛋白質(zhì)的水解程度與硫氧還蛋白對白豆粉的還原程度有關(guān)[27]。王向陽等在大豆餅粕中分別添加偏重亞硫酸鈉、亞硫酸鈉、維生素C和硫酸銅以鈍化大豆中的STI,結(jié)果表明STI活性殘存率分別為23.47%、30.86%和39.36%[5]。萬娟等研究了二硫蘇糖醇、亞硫酸鈉和半胱氨酸對STI活性的影響,三者對STI的相對失活率分別達(dá)80.14%、77.98%和71.85%,而熱處理僅為11.20%;凝膠排阻色譜的結(jié)果也印證了還原劑使STI的二硫鍵斷裂,從而改變其結(jié)構(gòu)使其失活[6]。
3.2.2酚類化合物對STI活性的影響
由于酚類化合物對蛋白質(zhì)具有極強(qiáng)的絡(luò)合作用,因而可利用此特性,在大豆制品中添加適量酚類化合物使STI與其結(jié)合降低STI的抑制活性。周春暉等研究了茶多酚對STI的影響,該研究認(rèn)為添加化學(xué)試劑難免存在一些化學(xué)物質(zhì)殘留的問題,從而影響食品的安全性;茶多酚作為茶中的一種天然化合物,安全性更好。該研究發(fā)現(xiàn)茶多酚能有效絡(luò)合STI,使其對胰蛋白酶的抑制作用減弱,同時(shí)研究表明茶多酚絡(luò)合鈍化STI還受溫度的影響[7]。Huang等發(fā)現(xiàn)茶多酚可使KSTI和BBTI失活,抑制效果與茶多酚和STI的比例有關(guān);當(dāng)STI與胰蛋白酶結(jié)合后再添加茶多酚可使STI迅速失活;茶多酚使KSTI失活的效果比BBTI明顯,但同時(shí)茶多酚能使胰蛋白酶失活,但只能抑制其小部分活性[28]。
3.3.1酶法水解
雖然STI能與胰蛋白酶結(jié)合并抑制其活性,但是STI本質(zhì)上仍是蛋白質(zhì),在某些蛋白酶的作用下,STI會(huì)被分解。許多研究者正是利用蛋白酶的水解作用去除大豆制品中的STI。相對于熱處理,酶法降解STI節(jié)省能源,既保護(hù)了熱敏性必需氨基酸不被破壞,還可以水解外源凝集素和致敏因子等其它抗?fàn)I養(yǎng)因子,同時(shí)使豆制品中的蛋白質(zhì)水解生成短肽,更好地提高豆制品的營養(yǎng)價(jià)值。Azarkan等的研究發(fā)現(xiàn)木瓜蛋白酶、木瓜凝乳蛋白酶、氨基乙酰內(nèi)肽酶、嗜熱菌蛋白酶和枯草桿菌蛋白酶等酶均能水解STI[29]。楊曉泉等添加堿性內(nèi)切蛋白酶Alcalase對大豆蛋白進(jìn)行水解;經(jīng)該酶的最適條件水解后,殘留STI活性為對照的20%,可溶性蛋白含量達(dá)27 mg/mL,游離氨基酸含量為7.1 mg/mL,大豆蛋白的水解度為8.9%。該研究還發(fā)現(xiàn)Alcalase蛋白酶可同時(shí)水解大豆蛋白和STI,但Alcalase僅能水解STI中的KSTI,而不能水解BBTI[8]。李艷麗等在豆粕中添加由米曲霉(Aspergillus oryzae)發(fā)酵所得的中性蛋白酶,結(jié)果發(fā)現(xiàn)豆粕中STI活性下降40%,金屬離子的加入普遍抑制蛋白酶對STI的水解,酶解時(shí)間在30 min就能達(dá)到最大的抑制效果[9]。陳中等從萌發(fā)的綠豆種子中分離純化出一種可水解STI的蛋白酶,該酶在50℃、pH 8.0、相對酶活力為5000 BAEE/mL和4 h的反應(yīng)時(shí)間下可將脫脂大豆粉中的STI活性鈍化90.91%,該研究還對該蛋白酶進(jìn)行進(jìn)一步的分離純化,將其制備成聚丙烯酰胺固定化酶[10]。
3.3.2微生物發(fā)酵去除
吳非等的研究發(fā)現(xiàn),目前市場上部分大豆制品的STI失活不徹底。其中水解蛋白、乳用蛋白、組織蛋白、水豆腐及干豆腐中STI活性均下降了90%以上,以組織蛋白中STI活性最低。部分經(jīng)現(xiàn)代加工方法生產(chǎn)的豆制品如某些豆粉、豆?jié){以及內(nèi)酯豆腐中STI的失活處理不夠充分。而我國傳統(tǒng)豆制品中STI的失活效果較好,腐乳及豆醬中STI活性都為不可檢出。這一部分的產(chǎn)品均經(jīng)過了微生物發(fā)酵,因而STI活性較低。該研究直接利用微生物對豆乳進(jìn)行發(fā)酵,結(jié)果表明乳酸菌和霉菌發(fā)酵都能使豆乳中的STI失活,其中以米黑毛霉和米根霉發(fā)酵鈍化效果最好[11]。孫常燦等采用乳酸菌和枯草芽胞桿菌發(fā)酵大豆粉,兩者均能去除大豆粉中的STI[12]。Hong等添加米曲霉發(fā)酵大豆粉,經(jīng)發(fā)酵后,大分子多肽降解為小分子多肽,蛋白質(zhì)含量有所提高,同時(shí)鈍化了大部分STI活性。反芻動(dòng)物能食用未經(jīng)處理的全脂大豆而不會(huì)出現(xiàn)不適的癥狀,這是由于反芻動(dòng)物的瘤胃中存在一些能使STI失活的微生物[30]。因此,Hoffmann等人取牛瘤胃液對全脂大豆和粗飼料混合物進(jìn)行體外發(fā)酵,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,經(jīng)發(fā)酵后大豆中的STI失去活性并被降解[31]。
大豆中的STI具有與胰蛋白酶結(jié)合進(jìn)而降低大豆蛋白的營養(yǎng)價(jià)值,因而在大豆制品加工過程中需將其除去。但是隨著近期研究的深入,體內(nèi)及體外的系統(tǒng)模型中已證明了STI對多種腫瘤細(xì)胞具有防止轉(zhuǎn)移及抑制的作用,可見STI具有一定的藥用價(jià)值。如果在去除STI的同時(shí),將這部分的STI收集起來,并將此作為藥品或保健食品利用,可一舉兩得。基于親和配體與目標(biāo)蛋白間強(qiáng)烈的相互作用,親和色譜能將具生物活性的大分子從混合物中高特異、高效地分離出來。Zhang等(2008)用固定了胰蛋白酶的殼聚糖微球從大豆乳清中回收STI,活力回收率達(dá)69.25%,經(jīng)SDS-PAGE檢測,回收產(chǎn)物只出現(xiàn)了一條分子量約為8.3kDa的條帶,認(rèn)為此帶應(yīng)為BBTI,具有較高特異性[32]。
STI是大豆中主要的抗?fàn)I養(yǎng)因子,降低了大豆制品的營養(yǎng)價(jià)值及食用安全性,在大豆制品加工過程中必須使其失活?,F(xiàn)今的大豆制品加工大多采用熱處理的方法,通過高溫的作用使STI變性,使其失去抑制胰蛋白酶的活性。這種方法設(shè)備簡單,操作方便,成本較低,能有效使STI活性下降至食用的安全范圍,但是高溫處理同時(shí)降低了大豆蛋白及其它一些生物活性物質(zhì)的利用價(jià)值。為了在鈍化STI的同時(shí)減少對大豆蛋白等破壞,研究者提出了一些非熱的方法,如:壓力處理、超聲波處理、高壓脈沖電場、化學(xué)還原、酚類化合物絡(luò)合、酶法水解和微生物發(fā)酵等方法。這些方法雖然同樣能使STI活性大幅下降,但由于設(shè)備、成本等問題仍未能廣泛應(yīng)用于實(shí)際的加工中。隨著近年研究的深入,研究者發(fā)現(xiàn)原來作為抗?fàn)I養(yǎng)因子的STI還具有一定的藥用價(jià)值。在大豆制品加工過程中,把STI從大豆中分離出來,既能除去產(chǎn)品中的抗?fàn)I養(yǎng)因子,同時(shí)回收了大豆中的生物活性物質(zhì),從而提高了大豆的綜合利用程度。利用高效、高特異性的親和色譜從大豆中分離STI正是朝著這一方向發(fā)展,但是這一方法同樣還需要解決工業(yè)化生產(chǎn)的問題。
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A Review on the Inactivating Methods of Trypsin Inhibitor in Soybean Products
CHEN Wan
(Fujian CCIC-Fairreach Food Safety Testing Co. Ltd, Fujian Fuzhou 350002)
As the main antinutriton factor in soybean, soybean trypsin inhibitor decreases the nutritional value and edible security of the soybean products. Soybean trypsin inhibitor must be inactivated during the processing of the soybean products. In this review, the methods that inactivated the soybean trypsin inhibitor, including heat treatment, microwave technique, pressure treatment, ultrasonic treatment, high intensity pulsed electric field, chemical reduction, phenol complexation, enzyme hydrolysis, microbe fermentation and affinity chromatography, were introduced.
Soybean;Trypsin Inhibitor;Inactivation
2013-01-20
陳婉(1982-),女,福建漳州人,助理工程師,本科,主要研究方向:食品檢測與加工。
Q503
A
1673-1417(2013)02-0024-06
(責(zé)任編輯:季 平)