王艷 高旭靈 陳新 呂秀娟 呂洪博 郭阿垚

瘦素受體在乳腺癌組織中的表達(dá)及其與臨床預(yù)后的關(guān)系

王艷 高旭靈 陳新 呂秀娟 呂洪博 郭阿垚

目的檢測瘦素受體(ObR)在人乳腺癌組織中的表達(dá)情況,探討其與HER-2以及臨床病理之間的關(guān)系,并分析它們對預(yù)后的影響。方法用免疫組織化學(xué)的方法檢測124例乳腺癌組織中ObR的表達(dá),回顧分析相關(guān)的臨床病理資料和隨訪情況。結(jié)果ObR在大多數(shù)乳腺癌組織中均有表達(dá),陽性率為82.3%。ObR表達(dá)與患者的年齡、絕經(jīng)狀態(tài)、腫瘤大小、腫瘤病理學(xué)分型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均無關(guān)(P>0.05);與ER、PR、P53的表達(dá)狀態(tài)也無關(guān)(P>0.05); ObR的表達(dá)與HER-2相關(guān)(P=0.011); ObR陽性者與陰性者的總生存率檢驗(χ2=0.048，P=0.827)及無病生存率檢驗(χ2=2.829，P=0.093)差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論ObR與HER-2在乳腺癌中的表達(dá)具有相關(guān)性,可能是導(dǎo)致乳腺癌預(yù)后不良的因素。

乳腺癌;瘦素受體;HER-2;臨床病理特征; 預(yù)后

近年來，乳腺癌作為女性最常見的惡性腫瘤之一,有明顯增多趨勢，肥胖被認(rèn)為是絕經(jīng)后婦女乳腺癌的一個危險因素并與預(yù)后不良及耐藥相關(guān),其具體的機(jī)制仍未闡明, 可能的機(jī)制包括增強(qiáng)脂肪細(xì)胞因子(如瘦素OB)與類固醇激素的生物有效性。瘦素蛋白(ObR)是肥胖基因(Leptin)編碼的蛋白產(chǎn)物,主要由脂肪組織分泌,部分也可由胃、胎盤及肝等器官合成和分泌。OB與其受體(ObR)結(jié)合后,作用于下丘腦、胰腺和甲狀腺等部位,通過降低食欲,增加能量消耗,從而減輕體重。OB和ObR在多種腫瘤組織中均有表達(dá),如乳腺癌、結(jié)腸癌、胃癌、前列腺癌和肝癌等[1]近來有文獻(xiàn)報道,可通過反式激活HER-2從而促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞的增殖[2]。本文旨在探討ObR在人乳腺癌組織中表達(dá)的臨床意義以及其與預(yù)后的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1標(biāo)本 全部病例來自沈陽市第四人民醫(yī)院，2006年～2012年女性乳腺癌臨床手術(shù)標(biāo)本。根據(jù)乳腺癌組織學(xué)分類標(biāo)準(zhǔn),浸潤性導(dǎo)管癌103例(83.1%),導(dǎo)管內(nèi)癌12例(9.7%),浸潤性小葉癌9例(7.2%)。患者的平均年齡為54.0歲,其中年齡34～77歲,絕經(jīng)期后占67.7%,絕經(jīng)期前32.3%。所有標(biāo)本均經(jīng)10%福爾馬林固定,石蠟包埋、切片,經(jīng)HE染色,病理醫(yī)師按標(biāo)準(zhǔn)共同確認(rèn)并行病理診斷和組織學(xué)分型,并采用國際抗癌聯(lián)盟(IUCC)1987年公布的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行腫瘤分期。

1.2主要試劑 瘦素受體羊抗人多克隆抗體和二胺基聯(lián)苯氨顯色試劑盒。

1.3免疫組織化學(xué)法檢測組織中ObR的表達(dá),將切片常規(guī)脫蠟水化,滅活內(nèi)源性酶,熱修復(fù)抗原,阻斷非特異性染色,滴加一抗,滴加二抗,顯色,蘇木精輕度復(fù)染。脫水、透明、封片、鏡檢。

1.4結(jié)果判斷 ObR為細(xì)胞質(zhì)表達(dá),呈黃色或棕黃色為陽性,計數(shù)計算染色陽性細(xì)胞的所占比率0:陽性細(xì)胞<10%；陽性(+):陽性細(xì)胞10%～50%；強(qiáng)陽性(++):陽性細(xì)胞>50%,染色強(qiáng)度弱；強(qiáng)陽性(+++):陽性細(xì)胞>50%,染色強(qiáng)度強(qiáng)。

1.5統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 13處理，用χ2檢驗Fisher’s確切概率法和Spearman等級相關(guān)分析;生存曲線采用Kaplan-meier法,生存比較用Log-Rank檢驗。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1ObR的陽性率 82.3%(102/124)的標(biāo)本ObR呈陽性表達(dá)。其中強(qiáng)陽性為19例(15.3%);17.7% (22/124)的標(biāo)本ObR呈陰性表達(dá)。

2.2臨床病理特點 ObR的陽性組中HER-2陽性者共38例, HER-2陽性率 37.2%(38/102); ObR陰性組22例, HER-2陽性率9.0%(2/22)。兩組間HER-2陽性率差異有統(tǒng)計學(xué)意義，P=0.011(P<0.05)。ObR的陽性組的HER-2陽性率更高，而兩組間發(fā)病年齡、絕經(jīng)狀態(tài)、腫瘤大小、病理分型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)ER、PR、P53差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

2.3生存率 124例乳腺癌患者的中位生存時間(OS)為50.2個月，ObR陽性組與陰性組總生存率檢驗(χ2=0.048，P=0.827)及無病生存率檢驗(χ2=2.829，P=0.093)差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。

3 討論

Garofalo等[3]用免疫組化染色法對90例乳腺良性病變進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)ObR在乳腺癌良惡性腫瘤中的表達(dá)有顯著性差異.本研究在中國人群中證實了ObR在乳腺癌組織中廣泛表達(dá),陽性率為82.3%, ObR的表達(dá)與患者的年齡、絕經(jīng)狀態(tài)、腫瘤大小、腫瘤病理學(xué)分型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均無關(guān)(P>0.05),與ER、PR及P53的表達(dá)狀態(tài)亦無相關(guān)性(P>0.05)，提示其參與了各種病理類型乳腺癌組織的增殖過程；顯示其在乳腺癌早期病變時已有高表達(dá),并且貫穿于乳腺癌的發(fā)生發(fā)展過程之中,提示ObR有可能作為乳腺癌診斷的實驗檢測的指標(biāo)之一,而拮抗ObR亦可能作為將來臨床治療乳腺癌的一種手段。

對于ObR與HER2的關(guān)系,相關(guān)研究比較少。Suimacz等[4]對人乳腺癌多個細(xì)胞系及59例人乳腺癌組織研究后發(fā)現(xiàn), HER2與OB和ObR共同表達(dá)可能增強(qiáng)了HER2的活性,并降低了對抗HER2治療的敏感性。本研究結(jié)果提示ObR與HER2表達(dá)具有相關(guān)性(P=0.011)。 HER2是乳腺癌的一個重要的治療靶點。HER2的單克隆抗體曲妥珠單抗的應(yīng)用提高了HER2高表達(dá)的晚期轉(zhuǎn)移性乳腺癌及早期乳腺癌患者的總生存率。但常出現(xiàn)原發(fā)或繼發(fā)性的耐藥,耐藥機(jī)制可能是其他信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的激活。比如IGF2I受體的高表達(dá), EGF或TGF合成增加,PTEN磷酸酯酶突變最終導(dǎo)致PINK通路的激活。Suimacz等[4]推測酪氨酸激酶是中介物質(zhì),如JAK2(通常與激活的ObR1結(jié)合)或src(可能與ObR1 和ObRs都有關(guān)系)。

對于ObR與預(yù)后的關(guān)系,Kim等[5]發(fā)現(xiàn)OB和ObR的表達(dá)與DFS無關(guān)；我們的研究結(jié)果顯示，兩組的總生存率和無病生存率差異無統(tǒng)計學(xué)意義，在無病生存率比較中，P=0.093，接近于0.05，不排除隨著樣本量增加和隨訪時間延長，兩組差異出現(xiàn)統(tǒng)計學(xué)意義的可能性。提示ObR在預(yù)測預(yù)后方面有一定價值。進(jìn)一步推測ObR可能與HER2有相互作用,從而加速腫瘤進(jìn)展以及誘發(fā)耐藥,導(dǎo)致預(yù)后不良。

綜上所述,乳腺癌組織ObR與HER2表達(dá)具有相關(guān)性;并且, ObR可能是導(dǎo)致乳腺癌預(yù)后不良的因素。這提示我們在ObR高表達(dá)的病例中,針對ObR的靶向治療可能是乳腺癌治療的一種新方法,特別是在對抗HER2治療耐藥的病例中。

[1] Cecilia G, Eva S Leptin and Cancer. Joumal of Cellular Physiology,2006,207:12-22.

[2] Soma D, Kitayama J, Yamashita H, et al. Leptin augments pro liferation of breast cancer cells via transactivation of HER2. J Surg Res,2008,149:9-14.

[3] Garofalo C, Koda M, Cascio S, et al Increased expression of leptin and the leptin receptor as a marker of breast cancer progression:possible role of obesityrelated stimuli. Clin Cancer Res,2006,12(5):1447-1453.

[4] Surmacz E, Fiorio E, Mercanti A. Leptin/HER2 crosstalk in breast cancer.in vitro study and preliminary in vivo analysis. BMC Cancer,2008,8:305.

[5] Kim Y， KimSY， Lee JJ. Effects of the expression of leptin and leptin receptor(OBR) on the prognosis of earlystage breast cancers. Cancer Res Treat,2006,38(3):126-132.

Theexpressionofleptinreceptorinbreastcancerandtherelationshipwithclinicalprognosis

WANGYan，CHENGXin，LVXiu-juan，etal.

DepartmentofcadrecliniqueTheFourthPeople’sHospitalofShenyang，Shenyang110031,China

ObjectiveTo detect clinicopathologic factors and prognosis of leptin receptor (ObR) expression in breast cancer tissue, and to investigate the relationship between HER-2 as well as the clinical and pathological, and analyze their impact on prognosis.MethodsBy using immunohistochemistry method to detect the ObR in 124 cases of breast cancer expression related to clinical and pathological data and follow-up were analyzed retrospectively.ResultsObR were expressed in most breast cancer tissues, the positive rate was 82.3%. ObR expression had no relationship with the age of patients, the transfer of menopausal status, tumor size, histological type, lymph node (P>0.05), it had nothing to do with the expression of ER, PR, P53 (P>0.05),the expression of ObR was correlated with HER-2 (P=0.011); between the survival rate test of patients with positive ObR and negative ObR (χ2=0.048,P=0.827) and disease free survival rate test (χ2=2.829,P=0.093),there were no significant differences.ConclusionThe expression of ObR and HER-2 were associated in breast cancer, may be the factors that lead to poor prognosis of breast cancer.

Breast cancer; Leptin receptor; HER-2; Clinical Pathology; Prognosis

遼寧省沈陽市科技計劃項目(項目編號：F11-262-9-44)

110031 沈陽市第四人民醫(yī)院干診科(王艷 高旭靈 陳新 呂秀娟 呂洪博);中國醫(yī)科大學(xué)第一臨床醫(yī)院乳腺外科(郭阿垚)