蔣林祥

四川省西昌市涼山州第一人民醫(yī)院中藥房，四川 西昌 615000

紅外光譜分析技術(shù)在中藥定性檢測(cè)中的研究

蔣林祥

四川省西昌市涼山州第一人民醫(yī)院中藥房，四川 西昌 615000

目的：分析紅外光譜分析技術(shù)在中藥定性檢測(cè)中的應(yīng)用情況以及價(jià)值。方法：以黃連作為研究藥材，分別采用紅外光譜分析技術(shù)以及高效液相色譜分析技術(shù)對(duì)黃連進(jìn)行定性試驗(yàn)測(cè)定。結(jié)果：紅外光譜分析技術(shù)以及高效液相色譜分析技術(shù)均能準(zhǔn)確對(duì)黃連進(jìn)行定性檢測(cè)。但紅外光譜分析技術(shù)的樣品前處理時(shí)間以及定性檢測(cè)的總體耗時(shí)時(shí)間均要短于高效液相色譜分析技術(shù)。結(jié)論：紅外光譜分析技術(shù)在中藥定性檢測(cè)中有較高的應(yīng)用價(jià)值，可用作于快速檢驗(yàn)，其檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確率高，操作簡(jiǎn)便，耗時(shí)短。

紅外光譜；分析技術(shù)；中藥定性

紅外光譜是利用樣品收到紅外波長(zhǎng)照射時(shí)產(chǎn)生的振動(dòng)能級(jí)躍遷而產(chǎn)生相應(yīng)的振動(dòng)光譜，由于不同物質(zhì)具有不同結(jié)果，當(dāng)紅外光線照射時(shí)能夠發(fā)出不通過的能級(jí)躍遷，因此紅外光譜分析技術(shù)能夠提供樣品的分子結(jié)果信息［1］，從而具有一定的定性作用。我國(guó)是中醫(yī)中藥的發(fā)源國(guó)，中草藥的資源豐富。由于本身性質(zhì)特點(diǎn)，中藥本身是一個(gè)極為復(fù)雜的混合物體系，不同的活性部位其所含的成分不用，同一活性部位其里面含的成分復(fù)雜。因此中藥的定性分析一直是中醫(yī)中藥中的難題。傳統(tǒng)上對(duì)于中藥的定性分析主要依靠中藥的形狀、顯微鏡結(jié)構(gòu)特征、理化性質(zhì)、薄層鑒別等。以上的定性鑒別方法多數(shù)依賴于檢測(cè)人員的經(jīng)驗(yàn)，因此其主觀判斷性相對(duì)較大，不能客觀準(zhǔn)確對(duì)中藥進(jìn)行鑒別定性分析［2］。紅外光譜分析方法能夠?yàn)橹兴幎ㄐ蕴峁┒嘁环N選擇，本文主要是研究紅外光譜分析技術(shù)在中藥定性檢測(cè)中的應(yīng)用情況，以及對(duì)比紅外光譜分析技術(shù)與高效液相分析技術(shù)的應(yīng)用價(jià)值。

1 設(shè)備與方法

1.1.1 儀器 高效液相色譜：采用島津公司的高效液相色譜儀，泵采用LC－10ATVP，采用SPD－M10AVP大的紫外檢測(cè)器。采用Kromasil的C18色譜柱（250mm×4.6mm，5 μm）。

紅外分析光譜：采用Spectrum Gx型的傅里葉變換的紅外分析光譜，檢測(cè)器為DTGS的檢測(cè)掃描器，紅外光譜范圍為4000～400 cm－1。

1.1.2 試劑 本試驗(yàn)采用黃連作為本次試驗(yàn)的檢測(cè)藥材。黃連購自北京同仁堂藥店，對(duì)照物購自中國(guó)藥物生活制品鑒定所。試驗(yàn)中所采用的乙醇為色譜純，采用雙蒸水進(jìn)行試驗(yàn)。

1.2 方法

1.2.1 樣品制備 紅外光譜分析的樣品制備。將購入的黃連進(jìn)行粉碎然后過40目篩，制備成黃連藥材粉末。

高效液相分析樣品制備。取黃連藥材粉末適量，置入圓底燒瓶，并且加入8倍量的無水乙醇，加熱浸潤(rùn)30min，加熱回流2次，合并濾液，濃縮干燥，得到醇提物。將醇提物用乙醇溶解并且采用微孔濾膜進(jìn)行過濾，即可以得到黃連供試品。

1.2.2 檢測(cè)方法 紅外光譜。取黃連粉末與溴化鉀充分研磨壓片后，植入紅外光譜儀中進(jìn)行測(cè)定。

高效液相色譜。高效液相色譜的色譜條件為：采用乙腈－水30%∶70%的流動(dòng)相，其中流速為1ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為345 nm，柱溫為常溫。將得到的黃連供試品取20μl注入高效液相色譜儀中，得到高效液相色圖譜。然后將相同量的黃連對(duì)照組品進(jìn)樣。對(duì)比兩樣品主要成分、主要成分保留時(shí)間等。

2 結(jié)果

對(duì)比兩組方法前處理時(shí)間以及黃連定性結(jié)果，具體的試驗(yàn)數(shù)據(jù)如下。

得到試驗(yàn)結(jié)果的黃連紅外光譜結(jié)果，對(duì)比中國(guó)藥典的黃連紅外光譜圖集，黃連的特征峰以及峰強(qiáng)度均較為接近。說明紅外光譜分析技術(shù)能夠?qū)χ兴幉倪M(jìn)行準(zhǔn)確的定性。

高效液相色譜。樣品與對(duì)照品兩者的高效液相色譜圖相似，主要成分較接近，并且主要成分的出峰時(shí)間相對(duì)較接近。并且還可以通過峰面積大小對(duì)藥品含量進(jìn)行定量分析。說明高效液相色譜也同樣能夠?qū)χ兴庍M(jìn)行定性定量分析。

對(duì)比兩種方法的樣品前處理時(shí)間以及定性試驗(yàn)的耗時(shí)長(zhǎng)度，具體的試驗(yàn)數(shù)據(jù)見表1。

表1 紅外光譜和高效液相色譜比較

根據(jù)上表的結(jié)果顯示，紅外光譜分析技術(shù)的樣品前處理時(shí)間明顯要少于高效液相色譜分析技術(shù)藥品的前處理時(shí)間，兩者對(duì)比有顯著性差異 （P＜0.01）。藥材定性試驗(yàn)的總體耗時(shí)，紅外光譜分析技術(shù)的時(shí)間為40min，明顯要短于高效液相色譜技術(shù)的耗時(shí)間83min。兩者對(duì)比有顯著性差異（P＜0.01）。

3 討論

采用紅外光譜分析技術(shù)，能夠?qū)χ兴幉牡恼鎮(zhèn)?、中藥材的種屬、中藥材不同部位進(jìn)行比較鑒別以及產(chǎn)地鑒別等。紅外光譜分析技術(shù)在中藥材中的鑒定尤其自身的優(yōu)勢(shì)。由于紅外技術(shù)目前較為普遍，其儀器分析成本相對(duì)較低，并且其定性分析結(jié)果較為準(zhǔn)確，能夠提供快速的中藥鑒定。紅外光譜分析技術(shù)在中藥材的分析鑒別主要應(yīng)用在同種藥材不同藥用部位的鑒別研究。由于中藥材不同部位其活性成分不相同，紅外光譜分析技術(shù)可以作為一種快速、有效、準(zhǔn)確率較高的一種鑒別方法［3］。

紅外光譜分析技術(shù)的另外一個(gè)優(yōu)點(diǎn)在于，其快速鑒定能夠較好保持中藥材的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。對(duì)比其他檢測(cè)方法如溶劑提取法有可能會(huì)對(duì)中藥材產(chǎn)生一定的影響。另外紅外光譜分析技術(shù)還能避免接觸到有機(jī)溶劑等，因此其操作相對(duì)較安全。

紅外光譜分析技術(shù)能能夠用于容易混淆或者真假中藥材的鑒別。例如，肉豆蔻和長(zhǎng)形肉豆蔻兩者在形狀外觀上較為相似，單純憑借性質(zhì)外觀的分析不能有效鑒別兩者。采用紅外光譜分析方法則能通過兩者紅外吸收光譜圖的吸收差異等，快速、直接、直觀對(duì)肉豆蔻進(jìn)行鑒別判斷［4］。

在本文的研究對(duì)比試驗(yàn)中可知，紅外光譜分析技術(shù)和高效液相色譜方法均可以進(jìn)行中藥定性測(cè)定，雖然高效液相色譜能夠同時(shí)進(jìn)行定量分析，但由于其樣品的前處理相對(duì)復(fù)雜，紅外光譜分析技術(shù)只要簡(jiǎn)單將藥材進(jìn)行粉碎研磨后即可進(jìn)行檢測(cè)。因此在中藥材的快速鑒定方面，紅外光譜分析技術(shù)有著其自身巨大的優(yōu)勢(shì)。

另外，由于紅外技術(shù)本身的特點(diǎn)，采用紅外技術(shù)對(duì)中藥材進(jìn)行鑒別還能對(duì)中藥材的結(jié)果進(jìn)行確定。有研究證實(shí)，采用紅外光譜能夠?qū)ξ逦蹲拥娜瞥煞诌M(jìn)行結(jié)構(gòu)特征的確定，確定其結(jié)構(gòu)中六元環(huán)酮以及不飽和內(nèi)酯的峰位［5］。

紅外光譜分析技術(shù)在中藥定性檢測(cè)方面有著重大的應(yīng)用價(jià)值，為中藥建立紅外分析圖譜能夠提高中藥鑒別的準(zhǔn)確性、高效性，充分利用紅外光譜分析技術(shù)的高效、準(zhǔn)確的特點(diǎn)［6］，從而達(dá)到快速定性和鑒別的分析目的。隨著對(duì)中藥材的基礎(chǔ)研究的深入，紅外光譜分析技術(shù)將成為中藥材質(zhì)量控制以及定性分析中有效的質(zhì)量控制手段。

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