胡飄萍
(南昌大學第一附屬醫(yī)院輸血科,江西南昌330006)
·講座·
交叉配血不合原因分析及處理
胡飄萍
(南昌大學第一附屬醫(yī)院輸血科,江西南昌330006)
交叉配血;不合;輸血;紅細胞凝集
輸血治療是一項重要的臨床治療手段,在病員救治的過程中發(fā)揮著不可替代的作用。隨著醫(yī)療水平的發(fā)展,輸血安全成為日益關(guān)注的問題。臨床輸注全血或含紅細胞成分血液前需要做交叉配血試驗,發(fā)現(xiàn)供血者和受血者的紅細胞和血漿間是否存在抗原抗體反應(yīng),以保證臨床用血安全。實際工作中,往往會發(fā)生交叉配血不相合的情況,即主側(cè)或次側(cè)出現(xiàn)紅細胞凝集?;诨颊哐丸b定無誤前提下,本文就可能引起配血困難的情況進行總結(jié)并提出相應(yīng)的處理方法。
部分交叉配血實驗是由于血液標本的原因?qū)е录訇栃越Y(jié)果,干擾實驗結(jié)果。其中可以是患者的血液中含有某些物質(zhì)、抽取患者血液時未與抗凝劑充分混勻或供血者血辮抗凝不充分。
1.1 患者高免疫球蛋白血癥或靜脈輸入高分子藥物多發(fā)性骨髓瘤,巨球蛋白血癥、霍奇金病、嚴重肝臟疾病等,由于血清蛋白分泌增加,白蛋白/球蛋白比例失調(diào),血漿黏稠度增加。交叉配血時,主側(cè)交叉中供者紅細胞表面Zeta電位降低,形成緡錢狀假凝集。靜脈輸入高分子藥物如甘露醇、羥乙基淀粉或右旋糖酐等亦可導(dǎo)致紅細胞呈緡錢狀改變。
消除方法:采用試管法配血(聚凝胺法和鹽水法),在配血的主管離心后去血漿,加3滴生理鹽水觀察結(jié)果。
1.2 患者血液中白細胞或血小板數(shù)量增高慢性粒細胞性白血病患者白細胞計數(shù)明顯增高時,血液標本經(jīng)1000g離心1min處理,血漿中混有大量的白細胞。由于白細胞平均體積大于紅細胞并且其變形能力僅為紅細胞的1/1000,微柱凝膠卡配血離心時,交叉配血反應(yīng)體系中的細胞在微柱凝膠中下移,白細胞不能全部通過微孔進而將微孔堵塞導(dǎo)致游離的紅細胞不能順利通過微孔到達底部,導(dǎo)致假陽性[1]。EDTA抗凝標本中的血小板計數(shù)較高時,大量血小板聚集成團塊狀。交叉配血前,標本離心速度、時間不夠會導(dǎo)致血小板懸浮于血漿中,對結(jié)果產(chǎn)生影響[2]。
消除方法:將患者EDTA抗凝血液經(jīng)2000g離心5~10 min處理,將血漿中的白細胞或血小板充分沉淀,可消除血液細胞成分對交叉配血結(jié)果的影響。
1.3 血漿中纖維蛋白原增高患者血漿存在大量的纖維蛋白原,或供血者血辮呈部分抗凝時,交叉配血試驗過程中纖維蛋白原有可能被激活轉(zhuǎn)變成纖維蛋白,夾帶紅細胞形成凝塊,干擾交叉配血結(jié)果的判斷。
消除方法:①加溫孵育法去除交叉配血過程中纖維蛋白原干擾,將標本在37~42℃孵育10~ 30min,離心后再進行交叉配血試驗。②可采用細玻璃棒碾壓進行鑒別。用細玻璃棒對凝集塊輕輕碾壓,在顯微鏡下觀察碾壓前后,紅細胞是否由凝集現(xiàn)象轉(zhuǎn)變成分散狀態(tài),且紅細胞形態(tài)改變,出現(xiàn)該現(xiàn)象為假凝集[3]。③為排除纖維蛋白原的干擾,可考慮使用血清進行交叉配血試驗。
1.4 標本溶血溶血性貧血患者或是燒傷科患者,由于存在大量的紅細胞碎片,微柱凝膠法時,紅細胞碎片容易堵塞凝膠微孔而使紅細胞不能完全到達底部,導(dǎo)致假陽性。
消除方法:改用凝聚胺法交叉配血[4,5],在顯微鏡下仔細觀察紅細胞是否真凝集。
2.1 不規(guī)則抗體紅細胞血型不規(guī)則抗體是ABO系統(tǒng)的以外的同種抗體,可經(jīng)譜細胞鑒定抗體特異性。不規(guī)則抗體多因同種異體輸血、妊娠產(chǎn)生,新生兒可從母體被動獲得IgG類抗體,李雪英等[6]
對無償獻血人群紅細胞血型不規(guī)則抗體篩查,共檢出0.3%的人存在不規(guī)則抗體,其中女性抗體檢出率明顯高于男性。如果供血者的紅細胞含有與受血者的不規(guī)則抗體相對應(yīng)的抗原,交叉配血時,可出現(xiàn)凝集。配血時,選擇不含有與不規(guī)則抗體對應(yīng)的紅細胞抗原的血液交叉配血。
2.2 藥物致敏臨床上,部分患者既無輸血史,又無自身免疫性疾病病史且血漿總蛋白正常,無白球蛋白比例倒置和纖維蛋白原增高,出現(xiàn)直接抗人球蛋白實驗(DAT)陽性[7],如果患者有明確的相關(guān)藥物使用史,應(yīng)考慮為藥物致敏。患者紅細胞膜受某些藥物(以頭孢菌素類最多見)而改變,導(dǎo)致非特異性地吸附蛋白,造成DAT陽性。由藥物影響造成的DAT陽性[8],導(dǎo)致的配血困難的比例越來越大。懷疑藥物致敏時可進行藥物抗體檢測,若確定某種藥物所致,應(yīng)避免使用,在停藥一段時間后,DAT結(jié)果可轉(zhuǎn)為陰性。
2.3 自身抗體
2.3.1 冷凝集冷凝集是指由自身抗體引起的,紅細胞在冷環(huán)境中的凝集成團的現(xiàn)象。紅細胞膜表面物質(zhì)的構(gòu)型會隨環(huán)境溫度的變化而發(fā)生改變。在較低溫度時,紅細胞膜表面物質(zhì)的構(gòu)型發(fā)生改變,暴露出某些抗原決定簇,能與相應(yīng)抗體結(jié)合。而在體溫條件下,紅細胞膜物質(zhì)的構(gòu)型阻礙了冷凝集素與相應(yīng)的抗原決定簇結(jié)合。冷凝集反應(yīng)在0~4℃時最強,紅細胞凝集最明顯;隨溫度的升高,抗原抗體復(fù)合物逐漸解離,凝塊消失。
患者含有較高效價的冷凝集素時,血樣采取以下方法處理:采集血樣后,立即離心,獲得壓積紅細胞;用37℃溫生理鹽水洗滌紅細胞;如仍有凝集現(xiàn)象,將洗滌后的紅細胞45℃水浴放散3min或巰基試劑處理以破壞IgM;交叉配血在37℃進行。
2.3.2 溫自身抗體部分免疫性疾病患者,血清和紅細胞中均具有高效的病理性自身抗體,可與供血者紅細胞及自身紅細胞發(fā)生凝集,造成交叉配血主次側(cè)均發(fā)生凝集。在交叉配血時可采取如下措施:(1)將患者紅細胞與自身血漿吸收,用吸收后的血漿交叉配血;(2)與多人份ABO血型相同的血液做配血試驗,選擇主側(cè)凝集最弱的供血者血液,制成洗滌紅細胞后輸注;(3)如果自身抗體干擾ABO血型鑒定,而患者的病情危急,需緊急輸血搶救生命時,可立即給與O型洗滌紅細胞輸注。
2.4 移植患者接受ABO血型不同的造血干細胞移植后,受者原有血型的紅細胞不斷衰亡,相應(yīng)的抗體逐漸消失,最終ABO血型轉(zhuǎn)為供者血型。在受者完全轉(zhuǎn)變?yōu)楣┱哐椭埃颊哐图翱贵w會發(fā)生變化,輸血前應(yīng)根據(jù)患者病情變化及血型改變的情況,制訂合理的輸血策略,選擇相應(yīng)的血液成分[9]。
ABO血型主要不合的移植(受者體內(nèi)存在抗供者ABO血型抗原的抗體),選擇紅細胞血液制品的血型與受者相同。為了減少同種抗體的輸入,以利于受者紅細胞血型轉(zhuǎn)變?yōu)楣┱哐?,可以考慮輸注洗滌紅細胞,而血小板和血漿制品的血型與供者相同。
ABO血型次要不合的移植(供者體內(nèi)存在抗受者ABO血型抗原的抗體),在移植后3周內(nèi)應(yīng)監(jiān)測受者血型抗體效價并做抗人球蛋白試驗,如果DAT反應(yīng)呈陽性,應(yīng)給患者輸注O型洗滌紅細胞,如果抗人球蛋白試驗陰性,可以輸注與供者血型相同的紅細胞或普通O型紅細胞;血小板和血漿的血型與受者相同。
ABO血型主要不合及次要不合同時存在(受者體內(nèi)存在抗供者ABO血型抗原的抗體,同時供者體內(nèi)也存在抗受者ABO血型抗原的抗體),在受者血型完全轉(zhuǎn)變?yōu)楣┱哐颓皯?yīng)輸注O型紅細胞,AB型血小板、血漿。
2.5 紅細胞多凝集或全凝集紅細胞多凝集或全凝集可有基因變異,也可因血中紅細胞被細菌或細菌酶污染,引起紅細胞膜結(jié)構(gòu)改變,暴露出T抗原,T抗原具有免疫原性。大多數(shù)成人血清中含抗T抗體,因此,交叉配血時,T活化紅細胞幾乎與所有供血者的血清發(fā)生凝集反應(yīng)。鑒定交叉配血是否由紅細胞全凝集引起,可將患者紅細胞與臍帶血清或6個月以內(nèi)嬰兒血清作用,因6個月以內(nèi)嬰兒血清中不存在抗T抗體,不能與T抗原反應(yīng),故紅細胞不凝集。將患者紅細胞分別與10人份AB血清反應(yīng),部分凝集則稱為多凝集,如果全部凝集則是全凝集。
由疾病導(dǎo)致的全凝集現(xiàn)象是暫時的,一般病愈或控制感染后即自行消失,輸血時選用同型洗滌紅細胞制品,而避免輸全血或單獨輸血漿。
2.6 供血者DAT陽性正常人群約有1‰的供血者有DAT陽性,其紅細胞應(yīng)避免輸入患者體內(nèi)。同種異體輸血有傳播疾病和發(fā)生輸血反應(yīng)等風險,應(yīng)盡量避免或減少輸注,提倡自身輸血和成分輸血。用以交叉配血的患者血樣必需是3天之內(nèi)的、最能反映患者輸血前的免疫狀態(tài)的標本。嚴把輸血前交叉配血關(guān),規(guī)范操作規(guī)程并嚴格執(zhí)行,是減少輸血反應(yīng)、保障輸血安全的重要手段。
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457.4.1+1
A
1674-1129(2013)01-0059-02
10.3969/j.issn.1674-1129.2013.01.020
江西省衛(wèi)生廳科技計劃(編號20133048)
胡飄萍,女,1981年7月生,武漢大學碩士學位學歷,主要從事臨床輸血研究。