（長(zhǎng)江大學(xué)荊州臨床醫(yī)學(xué)院 荊州市中心醫(yī)院檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)部，湖北 荊州434020）

UF-1000i全自動(dòng)尿有形成分分析儀，是對(duì)尿有形成分做熒光色素染色后，利用流式細(xì)胞學(xué)原理來(lái)識(shí)別和計(jì)數(shù)尿中紅細(xì)胞(RBC）、白細(xì)胞(WBC）、管型(CAST）、上皮細(xì)胞(EC）、細(xì)菌(BACT）、結(jié)晶(X，TAL）、精子(SPERM）及酵母菌(YLC）。它可以為臨床診治泌尿生殖系統(tǒng)疾病及全身相關(guān)疾病提供重要的信息[1]。在UF-1000i投入使用前，應(yīng)對(duì)其分析系統(tǒng)進(jìn)行性能驗(yàn)證，如果達(dá)到制造商規(guī)定的性能要求方可使用[2]。根據(jù)ISO15189：2007醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可準(zhǔn)則的要求，我室通過(guò)對(duì)RBC、WBC、CAST、EC和BACT等5個(gè)定量參數(shù)的批內(nèi)精密度、日間精密度、正確度、攜帶污染率和線性范圍來(lái)驗(yàn)證該儀器的性能。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

Sysmex UF-1000i全自動(dòng)尿有形成分分析儀，配套原裝試劑和質(zhì)控物。

1.2 方法

1.2.1 批內(nèi)精密度 收集患者新鮮尿液標(biāo)本，RBC、WBC、CAST、EC和BACT各項(xiàng)參數(shù)選取低、高兩個(gè)濃度的標(biāo)本在UF1000i尿有形成分分析儀上重復(fù)檢測(cè)11次，去掉第1次測(cè)試的結(jié)果，用余下的10次分別計(jì)算變異系數(shù)CV值。

1.2.2 日間精密度 使用兩個(gè)水平的尿液有形成分質(zhì)控物在UF1000i尿有形成分分析儀上連續(xù)檢測(cè)20d，統(tǒng)計(jì)所有檢測(cè)結(jié)果的均值、標(biāo)準(zhǔn)差SD和CV值。

1.2.3 正確度評(píng)估 由廠商組織，以ISO15189認(rèn)證實(shí)驗(yàn)室(同濟(jì)醫(yī)院檢驗(yàn)科）經(jīng)過(guò)校準(zhǔn)性能穩(wěn)定的儀器為基準(zhǔn)儀器，以我室使用的UF1000i尿有形成分分析儀為比對(duì)儀器，使用同批號(hào)兩個(gè)水平的尿液有形成分質(zhì)控物分別在基準(zhǔn)儀器和比對(duì)儀器上連續(xù)檢測(cè)5次，計(jì)算比對(duì)儀器與基準(zhǔn)儀器檢測(cè)結(jié)果均值的偏差(%），以此偏差評(píng)估我室UF1000i尿有形成分分析儀的測(cè)量正確度。

1.2.4 攜帶污染率測(cè)試 該測(cè)試用以測(cè)試儀器檢測(cè)結(jié)果的攜帶污染率，從而評(píng)價(jià)儀器的自清洗效率。取1份RBC與BACT高值尿樣，連續(xù)檢測(cè)3次，結(jié)果為H1、H2、H3。然后立即取1份RBC與BACT低值尿樣連續(xù)檢測(cè)3次，結(jié)果為L(zhǎng)1、L2、L3，按下列公式計(jì)算攜帶污染率，判斷是否滿足儀器攜帶污染率的要求(RBC：≤0.1%或≤5.0／μl，BACT：≤0.05%或≤5.0／μl）。

1.2.5 線性驗(yàn)證 選取接近預(yù)期上限的高值尿液樣本，分別按100%、80%、60%、40%、20%的比例用鞘液進(jìn)行稀釋，每個(gè)稀釋度重復(fù)測(cè)定2次，計(jì)算均值。將實(shí)測(cè)值與理論值作比較(偏離應(yīng)滿足RBC≤10%，WBC≤10%，EC≤30%，BACT≤20%），計(jì)算a（斜率）、b（截距）值，得出y＝ax＋b，驗(yàn)證線性范圍。要求：a值在(1±0.05）范圍內(nèi)，相關(guān)系數(shù)r≥0.975。

1.2.6 生物參考區(qū)間驗(yàn)證 分別選取20位男女健康者，其檢測(cè)結(jié)果至少90%在擬定的參考區(qū)間內(nèi)，說(shuō)明實(shí)驗(yàn)室使用的參考區(qū)間有效。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS13.0軟件進(jìn)行回歸、線性分析。

2 結(jié) 果

2.1 批內(nèi)精密度

UF1000i尿有形成分分析儀批內(nèi)精密度測(cè)試結(jié)果及統(tǒng)計(jì)分析見(jiàn)表1。

表1 批內(nèi)精密度測(cè)試結(jié)果（n＝10）

2.2 日間精密度

UF1000i尿有形成分分析儀日間精密度測(cè)試結(jié)果及統(tǒng)計(jì)分析見(jiàn)表2。

表2 日間精密度測(cè)試結(jié)果（n＝20）

2.3 正確度評(píng)估

UF1000i尿有形成分分析儀正確度評(píng)估結(jié)果及統(tǒng)計(jì)分析見(jiàn)表3、4。

表3 低值比對(duì)結(jié)果及統(tǒng)計(jì)分析（n＝5）

表4 高值比對(duì)結(jié)果及統(tǒng)計(jì)分析（n＝5）

2.4 攜帶污染率測(cè)試

UF1000i尿有形成分分析儀攜帶污染率測(cè)試結(jié)果及統(tǒng)計(jì)分析見(jiàn)表5。

表5 攜帶污染率測(cè)試結(jié)果及統(tǒng)計(jì)分析

2.5 線性驗(yàn)證

UF1000i尿有形成分分析儀線性驗(yàn)證結(jié)果見(jiàn)表6～9，圖1～4。

表6 RBC線性驗(yàn)證測(cè)試結(jié)果

圖1 RBC線性圖

表7 WBC線性驗(yàn)證測(cè)試結(jié)果

圖2 WBC線性圖

表8 EC線性驗(yàn)證測(cè)試結(jié)果

圖3 EC線性圖

表9 BACT線性驗(yàn)證測(cè)試結(jié)果

圖4 BACT線性圖

2.6 生物參考區(qū)間驗(yàn)證

UF1000i尿有形成分分析儀生物參考區(qū)間驗(yàn)證結(jié)果見(jiàn)表10。

表10 生物參考區(qū)間驗(yàn)證結(jié)果（n＝20）

3 討 論

UF-1000i全自動(dòng)尿有形成分分析儀使用流式細(xì)胞計(jì)數(shù)法(FCM）技術(shù)來(lái)獲得尿細(xì)胞前向散射光及前向熒光的強(qiáng)度參數(shù)[3]。在對(duì)細(xì)胞中的特定物質(zhì)進(jìn)行熒光染色并調(diào)節(jié)到懸浮狀后，在鞘液的包圍和約束下，細(xì)胞排成單列高速由流動(dòng)室噴嘴噴出，形成細(xì)胞液柱。當(dāng)液柱通過(guò)檢測(cè)區(qū)在入射的激光束照射下產(chǎn)生前向散射光和側(cè)向散射光，它們分別反映細(xì)胞大小和顆粒信息，根據(jù)這些特性可以將細(xì)胞分類，從而定量顯示尿紅細(xì)胞、白細(xì)胞、上皮細(xì)胞、管型和細(xì)菌等。這些指標(biāo)正是診斷泌尿系疾病，特別是腎臟疾病的重要實(shí)驗(yàn)指標(biāo)之一[4]。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，儀器的批內(nèi)精密度、日間精密度、正確度、攜帶污染率和線性范圍均符合廠商和質(zhì)控品要求。在批內(nèi)精密度方面，選取的11次重復(fù)測(cè)定結(jié)果去掉第1次，可以將攜帶污染率降到最低，同時(shí)也避免了隨機(jī)誤差的產(chǎn)生。在日間精密度方面，由于尿液的穩(wěn)定性很差，故用質(zhì)控品來(lái)代替連續(xù)行20d的檢測(cè)。從表1和表2可以看出，無(wú)論是低濃度樣本還是高濃度樣本，各項(xiàng)指標(biāo)的CV值都比要求的低很多，說(shuō)明儀器的重復(fù)性非常好。至于正確度方面，我室利用了外院校準(zhǔn)性能穩(wěn)定的儀器作為基準(zhǔn)儀器進(jìn)行比對(duì)的方法，其偏差均遠(yuǎn)小于偏差要求。攜帶污染率是儀器性能評(píng)價(jià)中不可避免的評(píng)價(jià)指標(biāo)，尤其是在檢測(cè)泌尿生殖系統(tǒng)疾病的標(biāo)本時(shí)，攜帶污染率已成為影響測(cè)定結(jié)果的因素之一。表5中紅細(xì)胞和細(xì)菌的攜帶污染率均符合儀器說(shuō)明書的要求。我室還對(duì)各項(xiàng)參數(shù)的線性范圍進(jìn)行驗(yàn)證。由于接近預(yù)期上限的高值尿液樣本很難獲得，故將尿液樣本中加入適量的抗凝血作為紅細(xì)胞和白細(xì)胞高值樣本，加入適量的移行上皮細(xì)胞和扁平上皮細(xì)胞作為上皮細(xì)胞高值樣本，加入適量的大腸埃希菌和葡萄球菌(泌尿系統(tǒng)感染的主要病原菌）作為細(xì)菌高值樣本[5]。從表6～表9和圖1～圖4看出，各項(xiàng)參數(shù)的相關(guān)系數(shù)r均在0.99～1之間，它們?cè)诟髯缘姆秶鷥?nèi)呈線性關(guān)系。本實(shí)驗(yàn)室曾調(diào)查過(guò)荊州地區(qū)1860名健康人群[6]，并建立了自己的生物參考區(qū)間(見(jiàn)表10），然后根據(jù)NCCLS C28-A2文件推薦的方法進(jìn)行驗(yàn)證，此次驗(yàn)證各項(xiàng)參數(shù)均在擬定的生物參考區(qū)間內(nèi)。

綜上所述，我室UF-1000i全自動(dòng)尿有形成分分析儀精密度好，正確度高，攜帶污染率低，線性范圍廣，各項(xiàng)性能均符合儀器要求范圍，可應(yīng)用于臨床。

[1]李巖，王會(huì)平，李斌，等 .UF-1000i全自動(dòng)尿液沉渣分析儀的紅細(xì)胞攜帶污染實(shí)驗(yàn)及分析 [J].現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2011，26（5）：131-133.

[2]中國(guó)合格評(píng)定國(guó)家認(rèn)可委員會(huì) .醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則在體液學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域的指南 [S].CNAS-GL20，CNAS，2008.

[3]杭建峰，孫朝暉，石玉玲，等 .Sysmex UF-1000i自動(dòng)尿沉渣分析儀的性能分析及臨床應(yīng)用 [J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2011，26（2）：108-110.

[4]王延群，公衍文.UF-1000i尿液有形成分分析儀、干化學(xué)法和鏡檢法對(duì)尿液分析的比較 [J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2011，26（12）：858-860.

[5]黃震，遲秀文，束振華，等 .UF-1000i臨床檢測(cè)性能評(píng)價(jià)及復(fù)檢條件探討 [J].現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2011，26（1）：76-78.

[6]張娟安，李承彬，王昌富，等 .UF-1000i尿液分析儀有形成分生物參考區(qū)間的調(diào)查 [J].現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2011，26（1）：130-131.