孫淑萍 李勝利

（1 皖南醫(yī)學院藥學系，蕪湖241002；2 安徽省亳州市華佗中醫(yī)院骨傷科，亳州236800）

炎癥是具有血管系統(tǒng)的活體組織對損傷因子的防御性反應，是許多疾病發(fā)生、發(fā)展的基礎。對于非感染性炎癥，抗生素是無益的。非感染性炎癥性疾病的治療多以水楊酸為代表的非甾體類抗炎藥、糖皮質激素為代表的甾體類抗炎藥、甲氨蝶呤為代表的免疫抑制藥為主，但由于這三類藥物均存在明顯的不良反應而限制了它們的臨床應用。因此，尋找抗炎療效好，不良反應小的新型抗炎藥物成為目前抗炎藥研究的重要方向之一。雷公藤具有糖皮質激素樣抗炎、免疫抑制作用，卻無糖皮質激素的副作用，廣泛用于治療類風濕性關節(jié)炎等自身免疫性疾病，其見效快、療效確切，幾乎沒有可以完全替代的類似中藥。但在使用過程中，雷公藤引起的毒副反應事件屢見報道，成為近半個世紀以來發(fā)生中毒事件最多的中草藥之一，其毒副作用在傳統(tǒng)中草藥中排第三，其毒副作用限制了其在許多領域的應用。因此進一步尋找抗炎療效好，毒副作用小的中藥很有必要、非常迫切。

及己（Chloranthus serratus Roem.et Schalt.）為金粟蘭科金粟蘭（Chloranthaeeae）屬植物及己的根。鑒于目前國內外尚無及己抗炎作用及其機制的研究報道，本文擬進行及己抗炎作用的研究。

1 材料與儀器

1.1 材料 及己（采于安徽黃山）；角叉菜膠（上海金穗生物科技有限公司）；伊文思藍（上海速科實業(yè)有限公司）；醋酸、生理鹽水、二甲苯（天津市百世化工有限公司）；雷公藤多苷片（黃石飛云制藥有限公司）等。

1.2 動物 昆明種雄性小鼠，體重18～22g，SD雄性大鼠，體重（220±30）g，均由南京江寧青龍山動物繁殖場提供。

1.3 儀器 紫外分光光度計（上海分析儀器廠）；紫外分光光度計（UV－2550，島津SHIMADZU）；電子分析天平（上海良平儀器儀表有限公司）；BS系列電子天平（塞多利斯）；TGL－16G型臺式離心機（上海安亭科學儀器廠）；高速離心機（TDL－5型，上海利揚儀器有限公司）；旋轉蒸發(fā)儀（上海愛明儀器有限公司）。

2 實驗方法

2.1 及己醇提液的制備 將及己根洗凈，晾干后粉碎成粗粉，置于圓底燒瓶中，加10倍量75%乙醇浸泡1h，回流提取1h，用三層紗布過濾。藥渣再加10倍量75%乙醇，回流提取1h，用三層紗布過濾，兩次濾液合并，用旋轉蒸發(fā)儀回收乙醇，濃縮至1g／ml。

2.2 及己根醇提液對角叉菜膠足跖腫脹的影響 取昆明種雄性小鼠50只（18～22g），隨機分為5組，每組10只，分別為高、中、低劑量組，雷公藤多苷片組（陽性組），生理鹽水（NS）組即空白組。于灌胃給藥后1h，在大鼠右后足跖皮下注射角叉菜膠0.1ml。致炎后1～5h，每小時用窄帶尺分別測量左右踝關節(jié)周徑，以其差值作為腫脹度。結果（見表1）。說明及己根醇提液對小鼠角叉菜膠性足跖腫脹具有顯著的抑制作用。

表1 及己根醇提液對角叉菜膠足跖腫脹的影響（±S）

表1 及己根醇提液對角叉菜膠足跖腫脹的影響（±S）

注：與生理鹽水組相比，＊＊P＜0.01

組別 n 劑量／g·kg－11h 2h 3h 4h 5h生理鹽水組 10 － 7.19±0.549.79±0.3811.85±0.2510.58±1.149.14±1.37低劑量組 101.25.98±1.15＊＊ 7.37±0.97＊＊ 9.89±1.27＊＊ 9.43±1.13＊＊ 7.48±1.53＊＊中劑量組 102.43.47±1.75＊＊ 5.20±1.19＊＊ 7.43±0.586.35±1.87＊＊ 5.36±0.64＊＊高劑量組 103.62.15±0.59＊＊ 2.39±1.15＊＊ 2.43±1.51＊＊ 1.50±0.93＊＊ 1.39±1.67＊＊雷公藤多苷片組 100.003632.24±0.1.03＊＊ 2.49±0.84＊＊ 2.51±1.09＊＊ 1.57±0.78＊＊ 1.52±1.33＊＊

2.3 及己根醇提液對二甲苯所致小鼠耳腫脹的影響[1]昆明種雄性小鼠，分組同上。根據(jù)小鼠體重按每10g灌胃0.2ml，計算給藥量。連續(xù)灌胃給藥4d。末次給藥后1h，用移液槍在小鼠左耳涂抹二甲苯正反兩面各10μl。30min后，將小鼠頸椎脫臼處死，沿耳廓基線剪下兩耳。用6mm直徑打孔器分別在同一部位打下圓耳片，電子天平稱重。計算腫脹抑制率。腫脹抑制率（%）＝A（B）／A×100%式中，A代表空白組腫脹度，B代表受試藥物組或陽性對照藥物組腫脹度。腫脹度（g）＝左耳重量－右耳重量，結果見表2。表2說明及己根醇提液有減輕二甲苯所致小鼠耳腫脹的效果。

表2 及己根醇提液對小鼠耳腫脹度的影響（±S，%）

表2 及己根醇提液對小鼠耳腫脹度的影響（±S，%）

注：與生理鹽水組相比，＊＊P＜0.01

組別 n 劑量／g·kg－1 耳腫脹度／g 抑制率生理鹽水組10 － 0.008430±0.0001077 －低劑量組 101.20.006965±0.0001100＊＊ 17.4中劑量組 102.40.006115±0.0002015＊＊ 27.5高劑量組 103.60.004755±0.0001663＊＊ 43.6雷公藤多苷片組 100.003630.004231±0.0001037＊＊50.2

2.4 及己根醇提液對小鼠腹腔毛細血管通透性的影響[2]

昆明種雄性小鼠，分組同上。根據(jù)小鼠體重按每10g灌胃0.2ml，計算給藥量?？瞻捉M按體重灌服等量生理鹽水。連續(xù)灌胃給藥4d。末次給藥后1h，各鼠尾靜脈注射1%伊文思藍生理鹽水0.1ml／10g，隨即腹腔注射0.6%醋酸0.1ml／10g。20min后將小鼠頸椎脫臼處死，腹腔注射NS6ml。輕揉小鼠腹部后，沿腹中線剪1小口，傾出腹腔溶液約5～6ml，1000r／min離心5min。在紫外分光光度計590nm波長處測定吸收度。并進行t檢驗，結果見表3。表3說明及己根醇提液高、中、低劑量組、雷公藤多苷片組與生理鹽水組相比均有顯著性差異，低、中、高三組之間及三組與雷公藤多苷片組之間都沒有顯著性差異。說明及己根醇提液具有與雷公藤多苷片相當?shù)囊种拼姿崴碌母骨幻氀芡ㄍ感栽黾拥男Ч?/p>

表3 及己根醇提液對小鼠腹腔毛細血管通透性的影響（±S）

表3 及己根醇提液對小鼠腹腔毛細血管通透性的影響（±S）

注：與生理鹽水組相比，＊＊P＜0.01

組別 n 腹腔洗出液吸收度值生理鹽水組100.452±0.006低劑量組 100.343±0.009＊＊中劑量組 100.316±0.002＊＊高劑量組 100.310±0.012＊＊雷公藤多苷片組 100.304±0.007＊＊

2.5 及己根醇提液對大鼠棉球肉芽腫增生的影響[3]昆明種雄性大鼠，分組同上。在乙醚麻醉下，無菌操作，在大鼠雙側腋窩各植入一消毒棉球（20mg／只）。灌胃給藥qd×7d，第8天處死，剝離肉芽組織，在80℃下烘干1h，精密稱重，減去棉球重量，即為肉芽腫干重，結果見表4。表4說明及己根醇提液對大鼠棉球肉芽腫增生有抑制作用。

表4 及己根醇提液對大鼠棉球肉芽腫增生的影響（±S，%）

表4 及己根醇提液對大鼠棉球肉芽腫增生的影響（±S，%）

注：與生理鹽水組相比，＊＊P＜0.01

組別 n 劑量／g·kg－1 肉芽腫干重（mg） 抑制率生理鹽水組10 － 98.508±0.4440 －低劑量組 101.278.487±0.3619＊＊ 20.3中劑量組 102.452.479±0.2334＊＊ 46.7高劑量組 103.630.659±0.2023＊＊ 68.9雷公藤多苷片組 100.0036328.540±0.2573＊＊71.0

總之，通過及己根醇提液對角叉菜膠足跖腫脹的影響、對二甲苯所致小鼠耳腫脹的影響、對小鼠腹腔毛細血管通透性的影響、對大鼠棉球肉芽腫增生的影響這幾個實驗可以說明及己確有抗炎作用。

3 討論

既往研究發(fā)現(xiàn)，雷公藤含有萜類（二萜類、三萜類、倍半萜）等成分，具有抗炎、鎮(zhèn)痛、抗風濕的作用，被廣泛應用于類風濕性關節(jié)炎及各種自身免疫性疾病的治療[4]。昆明山海棠含有萜類等成分，具有良好的抗炎作用，能抑制炎癥時毛細血管通透性增高，減少滲出，抑制增生，對免疫功能有影響[5]。千年健含有萜類成分，有抗炎、鎮(zhèn)痛、抗風濕作用。因此，可以從含有萜類成分的中藥中尋找有效抗炎藥物[6]。

及己中含有的化合物結構復雜，其骨架可分為桉葉烷型、環(huán)桉烷型、吉馬烷型、菖蒲烷型等數(shù)種類型，同時它們具有內酯、酮、醇、多聚體等多種形式。在 《中藥大辭典》中記載及己含有以下成分：二氫焦莪術呋喃烯酮、焦莪術呋喃烯酮、銀線草內酯E、F、新菖蒲酮、金粟蘭內酯C、銀線草內酯C、環(huán)銀線草醇A、B、C、D等。這些化合物中，以單萜和倍半萜為主，其中金粟蘭內酯等倍半萜類化合物在及己中含量較多，是及己中的主要指標性成分[7]。

《中藥大辭典》記載及己功用主治：活血散瘀，祛風止痛，解毒殺蟲。主治跌打損傷，骨折，經閉，風濕痹痛等（中醫(yī)風濕痹證范疇包括西醫(yī)的風濕性關節(jié)炎、類風濕性關節(jié)炎等疾?。?。 《全國中草藥匯編》指出及己“舒筋活絡、祛風止痛、消腫解毒，主治跌打損傷、風濕腰腿痛、疔瘡腫毒、毒蛇咬傷”[8]。故從及己含萜類成分及臨床應用兩方面分析均支持其有抗炎作用。

本文通過實驗證實及己根醇提液對小鼠角叉菜膠性足跖腫脹具有顯著的抑制作用、有減輕二甲苯所致小鼠耳腫脹的效果、能抑制醋酸所致的腹腔毛細血管通透性增加、對大鼠棉球肉芽腫增生有抑制作用，也充分說明及己確有抗炎作用。

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