文│張東生(河北省涿州市動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所)
有效控制乳房炎對(duì)于保障奶牛養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展,提高生產(chǎn)率和減少經(jīng)濟(jì)損失具有重要意義。
引起奶牛乳房炎的原因很多,但最主要的原因來(lái)自傳染性病原菌和環(huán)境中的病原菌,而在這些病原菌中以無(wú)乳鏈球菌、停乳鏈球菌、金黃色葡萄球菌和大腸桿菌危害最大。因此,在乳房炎的治療過(guò)程中,除了加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,增加奶牛身體抵抗力,提高擠奶技術(shù)和接種乳房炎疫苗以外,最常用的方法是通過(guò)藥物治療來(lái)對(duì)乳房炎的發(fā)病進(jìn)行控制。
頭孢喹諾又名頭孢喹肟、頭孢喹咪。是動(dòng)物專用的第四代頭孢類抗生素,其抗菌活性極強(qiáng)、藥代動(dòng)力學(xué)特征優(yōu)良、毒副作用小、殘留低。該藥已被美國(guó)和歐盟批準(zhǔn)應(yīng)用于豬、牛的呼吸系統(tǒng)感染及奶牛乳房炎的治療。目前,農(nóng)業(yè)部已經(jīng)批準(zhǔn)國(guó)內(nèi)5家企業(yè)生產(chǎn)銷售硫酸頭孢喹諾的原粉及混懸注射液制劑,為國(guó)家二類新獸藥,主要用于豬、牛的呼吸系統(tǒng)細(xì)菌感染和奶牛乳房炎的治療。本試驗(yàn)用硫酸頭孢喹諾對(duì)臨床奶牛乳房炎分離的細(xì)菌菌株進(jìn)行體外抑菌試驗(yàn),然后以頭孢喹諾混懸劑對(duì)自然發(fā)病的奶牛乳房炎進(jìn)行治療,觀察其臨床療效,為臨床用藥提供一定的基礎(chǔ)和經(jīng)驗(yàn)。
1.采集奶樣。收集河北省涿州市某養(yǎng)牛場(chǎng)有奶牛乳房炎典型臨床癥狀而未經(jīng)抗生素藥物治療的牛奶奶樣共20份,各乳區(qū)的奶樣分開(kāi)放置并標(biāo)明牛號(hào)、乳區(qū)及日期,4小時(shí)內(nèi)送檢。
2.細(xì)菌分離鑒定。分別取采集的奶樣各1毫升,搖勻,加入到10毫升營(yíng)養(yǎng)肉湯中,37℃培養(yǎng)24小時(shí)。次日,將肉湯培養(yǎng)物分別接種到不同培養(yǎng)基中,37℃培養(yǎng)24小時(shí),觀察并記錄細(xì)菌生長(zhǎng)情況。根據(jù)菌體形態(tài)及染色特性初步判定細(xì)菌類屬。然后挑取鑒定后的單個(gè)菌落進(jìn)行純化培養(yǎng)。
3.藥敏試驗(yàn)。選擇典型的分離菌株用紙片擴(kuò)散法進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。將稀釋好的菌液按編號(hào)分別接種于瓊脂平皿內(nèi),將藥敏紙片以無(wú)菌操作法均勻貼放于瓊脂表面。然后37℃培養(yǎng)18~24小時(shí)。培養(yǎng)結(jié)束后取出平皿。抑菌圈直徑大于15毫米為高度敏感;抑菌圈直徑在10~15毫米之間為中度敏感,抑菌圈直徑小于10毫米為低敏或耐藥。
4.治療試驗(yàn)。將20頭奶牛隨機(jī)分為三組,第一組2頭,為陽(yáng)性對(duì)照組,不用藥物治療。第二組9頭,為對(duì)照治療組,以青霉素、鏈霉素混合物治療,肌肉注射每頭每次10克,每天用藥2次,連用4天,即2個(gè)療程。第三組9頭,為試驗(yàn)組,用頭孢喹諾混懸劑采用肌肉注射方式,按每千克體重1毫克的劑量給藥,每天2次,連用4天,即2個(gè)療程。治療效果的判定標(biāo)準(zhǔn):痊愈,患病牛乳區(qū)的紅、腫、熱、痛消失,乳中的凝塊、絮狀物消失,乳色和奶產(chǎn)量恢復(fù)正常,精神和食欲正常,停藥后無(wú)復(fù)發(fā)現(xiàn)象。有效,臨床癥狀有好轉(zhuǎn),但不完全消失,停藥后有復(fù)發(fā)現(xiàn)象。無(wú)效,治療2個(gè)療程后病牛癥狀沒(méi)有消失,甚至出現(xiàn)病情繼續(xù)惡化情況。
1.病原鑒定結(jié)果。從20份奶樣中分離到6種細(xì)菌,其中17份奶樣中含有多種細(xì)菌,經(jīng)微生物學(xué)檢驗(yàn),主要致病菌是金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、鏈球菌、多殺性巴氏桿菌,它們單獨(dú)或混合感染引發(fā)的乳房炎比例為90%,另外兩種致病菌是克雷伯氏菌和念珠菌??梢源_定引起該奶牛場(chǎng)發(fā)生乳房炎的主要病原是金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、鏈球菌和多殺性巴氏桿菌。
2.藥敏試驗(yàn)結(jié)果。結(jié)果見(jiàn)表1和圖1、圖2。四種細(xì)菌均對(duì)硫酸頭孢喹諾高度敏感,抑菌圈均大于2.5厘米。但四種細(xì)菌對(duì)青霉素等5種對(duì)照藥物均耐藥,抑菌圈均小于1厘米。另外,本試驗(yàn)用頭孢喹諾混懸劑對(duì)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的混合培養(yǎng)菌、多殺性巴氏桿菌和鏈球菌的混合培養(yǎng)菌進(jìn)行了藥敏試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)頭孢喹諾對(duì)奶牛乳房炎主要致病菌的混合培養(yǎng)菌也有較高的敏感性。
表1 頭孢喹諾混懸劑對(duì)致病菌的敏感性試驗(yàn)結(jié)果
◎圖1 大腸桿菌和金黃色葡萄球菌(混)藥敏試驗(yàn)結(jié)果
◎圖2 多殺性巴氏桿菌和鏈球菌(混)藥敏試驗(yàn)結(jié)果
表2 20頭臨床型奶牛乳房炎治療試驗(yàn)結(jié)果%
3.治療試驗(yàn)結(jié)果。陽(yáng)性對(duì)照組的2頭牛,在4天后臨床癥狀沒(méi)有消失,仍為臨床型奶牛乳房炎癥狀。對(duì)照治療組給藥后,1頭治愈,6頭牛乳中的凝塊、絮狀物消失,精神好轉(zhuǎn),但患病牛乳區(qū)依然有紅、腫、熱、痛等癥狀,2頭無(wú)效。頭孢喹諾治療試驗(yàn)組的9頭牛用藥4天后,奶牛的精神、食欲、乳區(qū)癥狀和乳汁恢復(fù)正常,可認(rèn)定為治愈。三組的試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2。說(shuō)明頭孢喹諾混懸劑的治療效果顯著高于青、鏈霉素混合物。
1.體外抑菌試驗(yàn)。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、鏈球菌、多殺性巴氏桿菌四種菌對(duì)頭孢喹諾有較高的敏感性,而對(duì)其他幾種藥物均耐藥。說(shuō)明由于一般抗菌藥物的廣泛應(yīng)用,使得許多病原菌已經(jīng)產(chǎn)生的很高的耐藥性。而頭孢喹諾在我國(guó)還未廣泛使用,因此,這些致病菌對(duì)其具有很高的敏感性。本試驗(yàn)中,頭孢喹諾對(duì)金黃色葡萄球菌的抗菌作用略低于其他受試菌,這可能與金黃色葡萄球菌的廣譜耐藥性有一定關(guān)系。
臨床上,奶牛患乳房炎通常是多種細(xì)菌混合感染的結(jié)果,因此,本試驗(yàn)特意檢驗(yàn)了頭孢喹諾混懸劑對(duì)臨床分離的大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的混合培養(yǎng)菌、多殺性巴氏桿菌和鏈球菌的混合培養(yǎng)菌的敏感性,證明混合菌株對(duì)該混懸劑也非常敏感,且兩者對(duì)混合菌株的最小抑菌濃度均在0.5~1.0微克/毫升之間。
2.臨床治療試驗(yàn)。本試驗(yàn)從患病奶牛乳汁中分離到的金黃色葡萄球菌、鏈球菌、多殺性巴氏桿菌和大腸桿菌是引起試驗(yàn)?zāi)膛;既榉垦椎乃姆N主要致病菌。基于上述體外抑菌試驗(yàn)結(jié)果,本試驗(yàn)采用硫酸頭孢喹諾混懸劑和青霉素、鏈霉素對(duì)18頭患病奶牛進(jìn)行分組治療,以驗(yàn)證頭孢喹諾混懸劑對(duì)奶牛乳房炎的治療效果。
混懸劑是將不溶性藥物微粒分散在液體分散媒中所形成的不均勻分散體系,該體系要求微粒沉降速度緩慢,沉降后的藥物微粒不應(yīng)結(jié)塊,振搖后即能均勻分散。并且能夠緩慢釋放藥物有效成分,延緩藥物的吸收,維持機(jī)體長(zhǎng)時(shí)間的有效藥物濃度。從治療試驗(yàn)結(jié)果來(lái)看,頭孢喹諾混懸劑的有效率、治愈率都比青、鏈霉素注射液的治療效果好,表現(xiàn)出明顯的優(yōu)勢(shì),且治愈后不易復(fù)發(fā)。
硫酸頭孢喹諾作為第一個(gè)動(dòng)物專用的第四代頭孢類抗生素,不僅可以用來(lái)治療奶牛乳房炎,還可以用來(lái)治療豬、牛的呼吸道細(xì)菌感染、禽頑固性大腸桿菌病和仔豬、雛雞的保健。由于其在國(guó)內(nèi)還未廣泛使用,也尚未出現(xiàn)耐藥性,在國(guó)內(nèi)畜牧業(yè)和獸醫(yī)臨床中將有良好的應(yīng)用前景。