劉?；郏伬?，陳 維，陳月寬，張紹基（遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院：.輸血科；.消化內(nèi)科，貴州遵義 563003）

引起交叉配血不合的原因較多，主要有：（1）技術(shù)因素；（2）血清抗體因素；（3）紅細(xì)胞抗原因素。究其原因：（1）實(shí)驗(yàn)操作不認(rèn)真，標(biāo)本張冠李戴，試劑管理紊亂，實(shí)驗(yàn)結(jié)果觀察不仔細(xì)等人為因素；（2）患者反復(fù)輸血、妊娠等產(chǎn)生的不規(guī)則抗體及自身免疫性疾病患者血清中自身抗體所引起的交叉配血不合；（3）血漿蛋白紊亂、冷凝集素及某些藥物因素使紅細(xì)胞聚集，干擾交叉配血結(jié)果，也可引起交叉配血不合［1-3］?，F(xiàn)就1例長(zhǎng)期反復(fù)輸血患者配血時(shí)出現(xiàn)交叉配血不合進(jìn)行原因分析，目的是避免由于交叉配血不合而延誤對(duì)患者的輸血救治。

1 資料與方法

1.1 一般資料 患者，張某，男，62歲，因“反復(fù)嘔血，黑便16年，再發(fā)1d”入院。1d前患者嘔血約200mL，排黑便約300 mL，伴頭昏、心悸、氣促、無(wú)暈厥、牙齦出血、無(wú)發(fā)熱、腹痛，在當(dāng)?shù)蒯t(yī)院查血紅蛋白（Hb）20g／L，予“奧曲肽”等治療后轉(zhuǎn)診本院急診科，急診科以“上消化道出血、肝硬化失代償期”收入本院消化內(nèi)科?；颊呔?、睡眠、飲食欠佳，大便如上述。既往有多次輸血史，近年來(lái)輸血液制品（包括洗滌紅細(xì)胞）均有畏寒、寒戰(zhàn)、皮疹、Hb尿等輸血不良反應(yīng)。查體：體溫（T）36.6℃，脈搏（P）89次／分，呼吸（R）21次／分，血壓（BP）101／57mm Hg，極重度貧血貌，全身皮膚黏膜蒼白，瞼結(jié)膜蒼白。血常規(guī)示紅細(xì)胞（RBC）0.84×1012／L，Hb 16g／L，紅細(xì)胞比容（HCT）7%。潛血試驗(yàn)（＋＋）。為改善患者貧血癥狀，臨床申請(qǐng)輸血。本科室對(duì)其血樣進(jìn)行血型鑒定（正、反定型），該患者血型為O型，Rh（D）陽(yáng)性，紅細(xì)胞血型抗體篩選試驗(yàn)Ⅰ號(hào)陰性，Ⅱ、Ⅲ號(hào)陽(yáng)性，交叉配血試驗(yàn)時(shí)發(fā)現(xiàn)與多個(gè)獻(xiàn)血者交叉配血不合。（鹽水配血法陰性，凝聚胺配血法主側(cè)凝集，次側(cè)不凝集。）

1.2 方法

1.2.1 試劑 抗-A、B標(biāo)準(zhǔn)血清、抗-D標(biāo)準(zhǔn)血清、篩選細(xì)胞、譜細(xì)胞、抗人球蛋白試劑（上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司）；凝聚胺試劑盒（珠海貝索生物技術(shù)有限公司）；血型不規(guī)則抗體篩檢卡、Rh血型定型試劑卡（長(zhǎng)春博迅生物技術(shù)有限公司）；A、B、O型RBC為本實(shí)驗(yàn)室自制（由同型的3個(gè)獻(xiàn)血員血液經(jīng)氯化鈉注射液洗滌3次，取其壓積紅細(xì)胞，用0.9%氧化鈉注射液配制成3%～5%的RBC懸液）。

1.2.2 血型鑒定 ABO血型正定型用玻片法，反定型用試管法；Rh血型用卡式法鑒定。

1.2.3 直接抗人球蛋白試驗(yàn) 操作按《輸血科（血庫(kù)）臨床技術(shù)操作規(guī)程與標(biāo)準(zhǔn)化管理實(shí)用全書(shū)》［4］。

1.2.4 不規(guī)則抗體篩查（微柱凝膠法）操作按微柱凝膠檢測(cè)卡說(shuō)明書(shū)。結(jié)果分析：陽(yáng)性結(jié)果用可能包含法，陰性結(jié)果用排除法。

1.2.5 吸收放散試驗(yàn) 將標(biāo)準(zhǔn)的O型、CCDEe和CcDee紅細(xì)胞用生理鹽水洗滌3次后與患者血清等量混合，在37℃的水浴箱中吸收1h，每10分鐘將試管搖動(dòng)1次，使RBC充分吸收抗體，離心分離上層血清即為吸收后血清；再用37℃生理鹽水洗滌吸收后的RBC 3次，用乙醚放散法制備放散液。將患者血清、吸收后血清、放散液分別與譜細(xì)胞、自身RBC在鹽水介質(zhì)（NS）、聚凝胺（Poly）、抗人球蛋白（IAT）中反應(yīng)，具體操作按譜細(xì)胞說(shuō)明書(shū)。

2 結(jié) 果

2.1 血型鑒定 患者血型結(jié)果正定型：抗-A（-）、抗-B（-）；反定型 Ac（＋＋＋＋）、Bc（＋＋＋＋）、Oc（-）、自身 RBC（-）；Rh血型定型：抗-D（＋＋＋＋）、抗-C（＋＋＋＋）、抗-c（-）、抗-E（-）、抗-e（＋＋＋＋）。

2.2 直接抗人球蛋白試驗(yàn) 陰性。

2.3 不規(guī)則抗體篩查 根據(jù)患者血清與篩檢RBC反應(yīng)格局（表1），初步判斷患者血清中可能含有抗-E和抗-c抗體。

2.4 吸收放散試驗(yàn) 根據(jù)患者血清與譜細(xì)胞反應(yīng)格局（表2），患者血清與譜細(xì)胞中含有E、c抗原的RBC在凝聚胺和抗人球蛋白法中均呈陽(yáng)性，而在鹽水介質(zhì)中呈陰性，說(shuō)明患者血清中含有IgG性質(zhì)的抗-E和抗-c抗體。

表1 抗體篩選試驗(yàn)結(jié)果

表2 患者血清、吸收后血清、放散液與譜細(xì)胞反應(yīng)格局

2.5 輸血策略 本科室為該患者篩選O型，Rh CCDee紅細(xì)胞懸液進(jìn)行交叉配血，鹽水和凝聚胺配血法主側(cè)、次側(cè)均無(wú)溶血無(wú)凝集，患者輸注紅細(xì)胞懸液4U后無(wú)輸血不良反應(yīng)，且Hb由16g／L上升到41g／L，RBC由0.84×1012／L上升到1.66×1012／L，HCT由7%上升到14%，說(shuō)明該患者輸血有效。

3 討 論

ABO、Rh血型是人類紅細(xì)胞膜上抗原性最強(qiáng)的兩種血型系統(tǒng)，Rh血型抗原性強(qiáng)度可能僅次于A及B抗原，在Rh抗原中以D抗原為最強(qiáng)，其次為E、C、c、e［5］。Rh抗體除抗-E、抗-C可天然產(chǎn)生外，其余多為外來(lái)RBC免疫刺激產(chǎn)生，即通過(guò)輸血或妊娠產(chǎn)生，這些抗體均為IgG，但在免疫早期也可有部分為IgM型［6］。本例患者Rh血型為CCDee，缺乏E、c抗原，長(zhǎng)期反復(fù)輸血過(guò)程中由于輸入了含有E、c抗原的RBC，刺激機(jī)體產(chǎn)生了免疫性抗-E、抗-c抗體，使再次輸血時(shí)出現(xiàn)交叉配血不合，也是曾輸注O型洗滌RBC出現(xiàn)輸血不良反應(yīng)的原因。在臨床實(shí)踐工作中，出現(xiàn)配血不合時(shí)，一定要查找原因，不能習(xí)慣性用O型洗滌RBC進(jìn)行輸注，O型洗滌RBC只對(duì)ABO血型系統(tǒng)是安全的，對(duì)其他血型系統(tǒng)的抗體可能會(huì)引起免疫性血管外溶血性輸血反應(yīng)。

鑒于RBC抗原和血清中不規(guī)則抗體的復(fù)雜性，避免產(chǎn)生不規(guī)則抗體給輸血帶來(lái)困難，本文建議對(duì)全部輸血人群、反復(fù)輸血患者進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查和Rh系統(tǒng)5種抗原配型，以確保輸血安全、有效。

［1］周炳能.21例交叉配血不合原因分析［J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2010，7（19）：1220-1221.

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［3］張國(guó)珍，黃尤奎，李青，等.臨床用血前交叉配血不合49例原因分析［J］.重慶醫(yī)學(xué)，2002，31（4）：326.

［4］羅炎杰，高峰議.輸血科（血庫(kù)）臨床技術(shù)操作規(guī)程與標(biāo)準(zhǔn)化管理實(shí)用全書(shū)［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2009：178-182.

［5］高峰.輸血與輸血技術(shù)［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2005：63-69.

［6］寇麗筠.臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué)［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，1999：74-75.