李琳

（天津市食品研究所有限公司，天津 301609）

液相色譜同測食品中防腐劑與甜味劑方法研究

李琳

（天津市食品研究所有限公司，天津 301609）

摘 要：采用反相高效液相色潽法，對色譜條件進(jìn)行調(diào)整，實(shí)現(xiàn)安賽蜜、糖精鈉、山梨酸、苯甲酸、脫氫乙酸5項(xiàng)物質(zhì)同測。試驗(yàn)結(jié)果表明，該方法定量準(zhǔn)確、精密度高，且節(jié)約時(shí)間成本。

關(guān)鍵詞：反相高效液相色譜；安賽蜜；糖精鈉；山梨酸；苯甲酸；脫氫乙酸

GB 2760《食品添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》中對安賽蜜[1]、糖精鈉、山梨酸、苯甲酸、脫氫乙酸最高限量都做了相關(guān)規(guī)定，并且這5項(xiàng)添加劑被廣泛的應(yīng)用于食品中。雖然國家標(biāo)準(zhǔn)中對這5項(xiàng)都有分別的或者部分同測的檢驗(yàn)方法[2]，但同時(shí)測定這5項(xiàng)添加劑的檢驗(yàn)方法目前并未出現(xiàn)。為了適應(yīng)大批量樣品的快速檢測，現(xiàn)對這5項(xiàng)添加劑同測進(jìn)行研究。

1 材料與方法

1.1 試劑和材料

乙酸銨（色譜純）、甲醇（色譜純）、冰乙酸（分析純）、乙酸鋅（分析純）、亞鐵氰化鉀（分析純）、氫氧化鈉（分析純）、脫氫乙酸（色譜純）、純水、苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)溶液[GBW（E）100006]、安賽蜜標(biāo)準(zhǔn)溶液[GBW（E）100171]、山梨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液[GBW（E）100007]、糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液[GBW（E）100008]以上液體標(biāo)物均購自國家標(biāo)物中心，濃度均為1.00 mg/mL。

1.2 儀器和設(shè)備

AEG220G型電子分析天平：日本島津公司；e2695型高效液相色譜：沃特世科技（上海）有限公司；UPTII-60L型超純水機(jī)：成都優(yōu)普電子有限公司；A10純水機(jī)：MILLIPORE公司；AS10200AT超聲波洗滌儀。

1.3 色譜參數(shù)和條件

色譜柱：Thermo BDS HYPERSIL C18，250×4.6 mm，5 μm；流動(dòng)相 A：0.02 mol/L 乙酸銨溶液，流動(dòng)相 B：甲醇；流速：1.0 mL/min；進(jìn)樣量：10 μL；柱溫：22 ℃；紫外波長掃描范圍190 nm～400 nm。

1.4 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液的配制

根據(jù)國標(biāo)方法GB/T 23377-2009《食品中脫氫乙酸的測定高效液相色譜法》[3]，準(zhǔn)確稱取0.100 g脫氫乙酸標(biāo)準(zhǔn)樣品，用10 mL20 g/L氫氧化鈉溶液溶解，用水定容至100 mL，配制成1.00 mg/mL標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，4℃下，可使用3個(gè)月。

1.5 標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的配制

分別吸取5中添加劑的標(biāo)準(zhǔn)溶液和標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液各5 mL，用水稀釋至50 mL，成為5種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)各為0.100 mg/mL的混合使用液。綜合各文獻(xiàn)[4-6]，分別吸取混合使用液，用水稀釋，制成濃度分別為0.005、0.010、0.020、0.040、0.060、0.080、0.100 mg/mL 的標(biāo)準(zhǔn)溶液系列。

1.6 樣品處理

含有CO2的液體需超聲脫氣，其他樣品粉碎混勻。稱取2 g～3 g樣品于50 mL比色管中，加水適量充分振蕩，加入亞鐵氰化鉀溶液和乙酸鋅溶液各5 mL，混勻用水定容。浸泡20 min～30 min，取上清液經(jīng)0.45 μm的濾膜后待測。

2 結(jié)果與討論

2.1 流動(dòng)相的選擇

選擇0.02 mol/L乙酸銨溶液和甲醇作為流動(dòng)相，而兩項(xiàng)比例的少量變化會(huì)使5種組分的保留時(shí)間發(fā)生顯著的變化。國標(biāo)中有乙酸銨溶液和甲醇的比例為90∶10和95∶5兩種方式。乙酸銨溶液和甲醇比例90∶10的添加劑標(biāo)準(zhǔn)譜圖見圖1，乙酸銨溶液和甲醇比例95∶5的添加劑標(biāo)準(zhǔn)譜圖見圖2。

圖1 5種添加劑的標(biāo)準(zhǔn)譜圖（乙酸銨溶液和甲醇的比例為90∶10）Fig.1 The standard spectra of five kinds of additives（ammonium acetate solution and methanol ratio of 90∶10）

圖2 5種添加劑的標(biāo)準(zhǔn)譜圖（乙酸銨溶液和甲醇的比例為95∶5）Fig.2 The standard spectra of five kinds of additives（ammonium acetate solution and methanol ratio of 95∶5）

根據(jù)分離圖1和分離圖2表明，5種物質(zhì)在流動(dòng)相乙酸銨溶液和甲醇的比例為90∶10的情況下沒有有效分離，而在流動(dòng)相乙酸銨溶液和甲醇的比例為95∶5分離充分。

2.2 檢測條件的選擇

對5種添加劑在190 nm～400 nm之間進(jìn)行全波長掃描，其中安賽蜜在226.5nm處，苯甲酸在224.1nm處，山梨酸在253.6 nm處，糖精鈉在205.3 nm處，脫氫乙酸在230.0 nm和291.6nm處，有最大吸收波長。為兼顧各組分的靈敏度，最終選擇實(shí)驗(yàn)波長為230 nm。

2.3 線性范圍

按照在流動(dòng)相乙酸銨溶液和甲醇的比例為95∶5，流速：1.0 mL/min；進(jìn)樣量：10 μL；柱溫：22 ℃；波長為230 nm進(jìn)行不同質(zhì)量濃度下各組分的峰面積，以質(zhì)量濃度和峰面積繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。各組分的相性方程，相關(guān)系數(shù)，線性范圍見表1。

表1 各組分的線性范圍Table 1 Linear range of each composition

從表1中可看出各組分在其線性范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好。

2.4 加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)

取樣品溶液分別加不同濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液，結(jié)果5種添加劑的回收率均在95%～103%，測定結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

2.5 方法應(yīng)用

用本文方法對市場上銷售的大量樣品進(jìn)行測試，同時(shí)在本實(shí)驗(yàn)室其他廠家的儀器和使用不同廠家的色譜柱進(jìn)行測試，在一般情況下均得到良好的結(jié)果，證明本方法穩(wěn)定性較強(qiáng)。

3 結(jié)論

使用本方法可以對不同種類、不同組分的食品樣品進(jìn)行分析，操作簡單、準(zhǔn)確性好、穩(wěn)定，可以用于日常大批量樣品的檢測。

：

[1]中華人民共和國衛(wèi)生部,中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì).GB/T 5009.140-2003飲料中乙?；前匪徕浀臏y定[S].北京:中國標(biāo)準(zhǔn)出版社,2003

[2]中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局,中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì).GB/T 23495-2009食品中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的測定高效液相色譜法[S].北京:中國標(biāo)準(zhǔn)出版社,2003

[3]中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局,中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì).GB/T 23377-2009食品中脫氫乙酸的測定高效液相色譜法[S].北京:中國標(biāo)準(zhǔn)出版社,2003

[4]李靜娜,胡漢高,黃常剛,等.高效液相色譜法同時(shí)測定食品中苯甲酸、山梨酸、脫氫乙酸、糖精鈉的方法研究[J].公共衛(wèi)生與預(yù)防醫(yī)學(xué),2011,22(4):91-93

[5]謝柏艷,馮光,辜華勝.高效液相色譜法同時(shí)測定食品中的苯甲酸、山梨酸、脫氫乙酸、糖精鈉[J].中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志,2012,22(1):49-50

[6]曲娜,趙亞軍,郭瑩.高效液相色譜法同時(shí)測定食品中山梨酸、苯甲酸、糖精鈉、安賽蜜的方法研究[J].中國食品添加劑,2008(5):146-148

Performance Liquid Chromatography（HPLC）with Food Preservatives and Sweetener in Measurement Method Research

LI Lin
（Institute of Tianjin Food Co.，LTD.，Tianjin 301609，China）

Abstract：By reversed phase high Performance Liquid chromatography method， adjust the chromatographic conditions，the implementation of arcelormittal honey，saccharin sodium and sorbic acid， benzoic acid， five with measurement of dehydroacetic acid.Experimental results show that this method is accurate quantitative，high precision，cost and time saving.

Key words：reverse phase high performance liquid chromatography（HPLC）；Arcelormittal honey；Sodium saccharin；Sorbic acid；Benzoic acid；Dehydroacetic acid

DOI：10.3969/j.issn.1005-6521.2013.13.026

李琳（1985—），女（漢），助理工程師，本科，主要從事食品檢驗(yàn)工作。

2013-06-13