陳衛(wèi)強(qiáng)，王浩然，張 健，齊向前*

(1.天津醫(yī)科大學(xué)心血管病臨床學(xué)院泰達(dá)國(guó)際心血管病醫(yī)院心內(nèi)科，天津300457;2.國(guó)家心血管病中心中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院阜外心血管病醫(yī)院心血管疾病國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京100037)

造成動(dòng)脈粥樣硬化斑塊纖維帽厚度和抗損傷強(qiáng)度降低、粥樣斑塊穩(wěn)定性下降的主要機(jī)制包括動(dòng)脈粥樣硬化斑塊內(nèi)單核/巨噬細(xì)胞聚集、內(nèi)源性基質(zhì)金屬蛋白酶抑制物減少和(或)合成基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinase，MMPs)增多［1］。MMP-9以前酶原的形式合成，是血管壁細(xì)胞表達(dá)和分泌的最主要的MMP，分子質(zhì)量為92 ku，作用底物包括Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型膠原及明膠、彈性蛋白等。MMP-9能高效降解Ⅳ型膠原，而Ⅳ型膠原是粥樣硬化斑塊基底膜和纖維帽的重要組成部分。因此MMP-9在炎性反應(yīng)、動(dòng)脈粥樣病變中起關(guān)鍵作用。

年齡、性別、吸煙、高血壓、高膽固醇、糖尿病、肥胖和久坐不動(dòng)的生活方式都與冠心病的發(fā)生有關(guān)，但是冠心病的確切機(jī)制尚不明確。現(xiàn)有的研究認(rèn)為，環(huán)境因素和遺傳因素對(duì)冠心病的發(fā)生均具有一定的作用，其中遺傳因素在冠心病的發(fā)生發(fā)展中具有非常重要的作用［1－2］。MMP水平與很多心血管疾病相關(guān)，包括動(dòng)脈粥樣硬化、心肌梗死和心力衰竭［2－4］。在高血壓、急性冠脈綜合征和急性心肌梗死的患者中 MMP-9 水平升高［3，5－6］。MMP-9 R279Q單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphism，SNP)位點(diǎn)位于MMP-9的催化區(qū)域，是精氨酸至谷氨酰胺的氨基酸變化［7－8］，有確切的證據(jù)表明該突變?yōu)榻档蚆MP-9功能的突變［9］，與冠心病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)可能有關(guān)。冠心病發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)與MMP-9 R279Q基因多態(tài)性研究較多，但研究結(jié)果并不一致。為明確MMP-9 R279Q單核谷氨酸SNP位點(diǎn)與冠心病易感性的關(guān)系，本研究搜索相關(guān)的病例對(duì)照研究，通過(guò)Meta分析，對(duì)MMP-9 R279Q基因多態(tài)性與冠心病發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的相關(guān)性進(jìn)行定量評(píng)價(jià)。

1 材料與方法

1.1 材料

在PubMed數(shù)據(jù)庫(kù)中檢索英文文獻(xiàn)，檢索詞為matrix metalloproteinase，coronary heart disease，cardiovascular disease，polymorphism，輔以文獻(xiàn)追溯法去查找相關(guān)文獻(xiàn)。

1.2 方法

1.2.1 文獻(xiàn)納入標(biāo)準(zhǔn):1)關(guān)于MMP-9 R279Q基因多態(tài)性與冠心病易感性關(guān)系的獨(dú)立的病例對(duì)照研究，并在2012-01-01以前發(fā)表;2)能直接或間接提供統(tǒng)計(jì)指標(biāo)OR及95%CI，文中報(bào)告數(shù)據(jù)完整;3)有數(shù)據(jù)重復(fù)的多篇文獻(xiàn)，選取信息最為詳細(xì)或病例樣本數(shù)最大的文獻(xiàn)。

1.2.2 文獻(xiàn)排除標(biāo)準(zhǔn):1)無(wú)法提取相關(guān)數(shù)據(jù)或數(shù)據(jù)不完整的文獻(xiàn);2)重復(fù)文獻(xiàn)。

1.2.3 數(shù)據(jù)提取:對(duì)于納入的文章，研究者均按照作者、發(fā)表年份、國(guó)家、人種、樣本量以及冠心病組和對(duì)照組各基因型攜帶者的數(shù)量進(jìn)行整理。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

進(jìn)行異質(zhì)性檢驗(yàn)通過(guò)計(jì)算Q檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)量，若P＞0.10，各合并的數(shù)據(jù)認(rèn)為無(wú)顯著的異質(zhì)性，采用固定效應(yīng)模型，否則采用隨機(jī)效應(yīng)模型分析。計(jì)算各研究及合并數(shù)據(jù)的OR值及其95%CI，繪制森林圖，展示各研究結(jié)果及其特征。橫坐標(biāo)為各研究OR自然對(duì)數(shù)值的標(biāo)準(zhǔn)誤，縱坐標(biāo)為OR值的自然對(duì)數(shù)，繪制漏斗圖(Begg's funnel plot)描述發(fā)表偏倚，STATA 11.0軟件的線性回歸模型(Egger法)檢驗(yàn)漏斗圖的對(duì)稱性，評(píng)估發(fā)表偏倚。

2 結(jié)果

2.1 研究資料概況

共5篇文獻(xiàn)符合標(biāo)準(zhǔn)，均為英文文獻(xiàn)，其中研究中國(guó)人群的文獻(xiàn)2篇。MMP-9 R279Q多態(tài)性位點(diǎn)有5 項(xiàng)研究［10－14］，累計(jì)冠心病病例3 630例，對(duì)照1 834例(表1)。

2.2 Meta分析結(jié)果

MMP-9 R279Q多態(tài)性位點(diǎn)中，進(jìn)行異質(zhì)性檢驗(yàn)，納入5項(xiàng)研究，在4種模式中，各研究之間均未存在明顯的異質(zhì)性，因此采用固定效應(yīng)模型，結(jié)果顯示基因型比較模型中合并OR值為0.925(95%CI=0.847－1.009)，純合子比較模型中合并OR值為0.866(95%CI=0.713－1.052)，顯性模型中合并OR值為0.909(95%CI=0.809－1.020)，隱性模型中合并OR值為0.902(95%CI=0.750－1.086)(圖1～3)(表2)。

表1 納入Meta分析的MMP-9 R279Q多態(tài)性位點(diǎn)與冠心病易感性的相關(guān)性研究Table 1 Studies about the relationship between MMP-9 R279Q polymorphism and susceptibility to coronary heart disease into meta-analysis

圖3 MMP-9 R279Q多態(tài)性位點(diǎn)與冠心病易感性隱性模型的森林圖Fig 3 Forest plot for association of MMP-9 R279Q polymorphism and susceptibility to coronary heart disease from a recessive genetic model

表2 MMP-9 R279Q多態(tài)性位點(diǎn)與冠心病易感性的Meta分析結(jié)果Table 2 The relationship between MMP-9 R279Q polymorphism and susceptibility to coronary heart disease in meta-analysis

2.3 發(fā)表偏倚評(píng)估

MMP-9 R279Q多態(tài)性位點(diǎn)比較模型的Begg漏斗圖示P＞|z|=0.221，各點(diǎn)基本對(duì)稱，分別均勻，絕大部分點(diǎn)都在95%可信區(qū)間內(nèi)。Egger檢驗(yàn)示，P＞|t|=0.078＞0.05(圖4)，故不能認(rèn)為有顯著性發(fā)表偏倚。MMP-9 R279Q多態(tài)性位點(diǎn)中，純合子比較模型中Begg漏斗圖示P＞|z|=0.221，Egger檢驗(yàn)顯示，P＞|t|=0.082＞0.05;顯性模型中Begg漏斗圖示P＞|z|=0.221，Egger檢驗(yàn)顯示，P＞|t|=0.103＞0.05;隱性模型中Begg漏斗圖示P＞|z|=0.462，Egger檢驗(yàn)顯示，P ＞ |t|=0.105＞0.05。

圖4 MMP-9 R279Q多態(tài)性位點(diǎn)基因型比較的漏斗圖Fig 4 Funnel plot for association of MMP-9 R279Q polymorphism and susceptibility to coronary heart disease

3 討論

基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)可降解基底膜的細(xì)胞外基質(zhì)成分，是一組鋅依賴性酶。斑塊中巨噬細(xì)胞可分泌多種MMP，它們參與了動(dòng)脈粥樣硬化病變重構(gòu)的全過(guò)程，能降解細(xì)胞外基質(zhì)，與血管管腔的狹窄或擴(kuò)張有關(guān)，由此可引發(fā)心血管事件。對(duì)MMP-9 R279Q多態(tài)性位點(diǎn)的Meta分析結(jié)果提示MMP-9 R279Q基因多態(tài)性可能不是冠心病的易感性因素。

Meta分析通過(guò)合并同類研究，使統(tǒng)計(jì)效率增加，可得到更符合實(shí)際的結(jié)果。但Meta分析必然也會(huì)引入其他混雜因素，例如不同研究之間結(jié)果的異質(zhì)性、陽(yáng)性結(jié)果的研究相對(duì)易發(fā)表而導(dǎo)致的發(fā)表偏倚等。遺傳學(xué)研究中的基本定律包括Hardy-Weinberg遺傳平衡(HWE)，樣本的代表性可通過(guò)HWE檢驗(yàn)。對(duì)納入文獻(xiàn)進(jìn)行HWE檢驗(yàn)，結(jié)果表明MMP-9 R279Q多態(tài)性位點(diǎn)除1篇文獻(xiàn)外均符合HWE定律，剔除該研究后，本研究結(jié)果并無(wú)明顯的改變。采用Egger檢驗(yàn)和Begg漏斗圖分別評(píng)估發(fā)表偏倚，發(fā)現(xiàn)發(fā)表偏倚均無(wú)顯著性差異，說(shuō)明結(jié)論比較可靠。本研究進(jìn)一步明確了MMP-9 R279Q多態(tài)性與冠心病的相關(guān)性，為探索冠心病發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制、尋找冠心病相關(guān)的易感性基因進(jìn)行了初步探索。

Meta分析具有一定的局限性，它是在總結(jié)既往發(fā)表文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上進(jìn)行的分析，受到諸多的條件限制，所以下結(jié)論也應(yīng)慎重。本研究存在的局限性:1)不能完全排除選擇性偏倚，因?yàn)檠芯康拇蟛糠謱?duì)照為醫(yī)院對(duì)照;2)未考慮基因-環(huán)境、基因-基因的交互作用;3)存在一定的發(fā)表偏倚。因此，有必要進(jìn)一步深入研究MMP-9 R279Q基因多態(tài)性與冠心病易感性的關(guān)系。

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