李 莉，王 睿，周 欣

（1．青海大學(xué)附屬醫(yī)院 腫瘤婦科，青海 西寧810001；2．青海省紅十字醫(yī)院 婦產(chǎn)科，810000；3．中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院 婦產(chǎn)科，110004）

卵巢癌是常見的婦科惡性腫瘤，是全身各臟器中原發(fā)腫瘤中類型最多的，而且不同類型的卵巢腫瘤之間的組織學(xué)結(jié)構(gòu)和生物學(xué)行為存在較大差異［1］。卵巢癌早期往往無任何顯著癥狀，晚期常會出現(xiàn)胃腸道癥狀，所以75%的患者就診時已是晚期［2］。CA125（糖類抗原125）是常用的卵巢癌的腫瘤標(biāo)志物，敏感性較高，但是特異性較差。HE4（human epididymis protein 4，人附睪蛋白 4）是近來引起臨床廣泛關(guān)注的新型卵巢癌的標(biāo)志物，聯(lián)合CA125可以較好的預(yù)測卵巢癌的發(fā)生［3］。本實(shí)驗(yàn)旨在研究聯(lián)合檢測卵巢癌患者CA125和HE4并分析其卵巢癌的嚴(yán)重程度之間的相關(guān)性。

1 資料與方法

1．1 一般資料

2007年8月－2009年6月在我院就診的卵巢腫瘤患者70名，均經(jīng)過病理組織學(xué)確診，入選前未經(jīng)任何治療，年齡20－78歲，中位年齡57歲。53例已絕經(jīng)（75．7%），17例未絕經(jīng)（24．3%）；漿液性卵巢癌52例（74．3%），黏液性卵巢癌1例，透明細(xì)胞癌3例，子宮內(nèi)膜樣癌3例，分型不明確11例；高分化11例（15．7%），中分化15例（21．4%），中低分化6例（8．6%），低分化38例（54．3%）。采用國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟FIGO的手術(shù)－病理分期標(biāo)準(zhǔn)［4］，F(xiàn)IGO分期早期 （Ⅰ－Ⅱ）29 例 （41．4%），晚 期 （Ⅲ－Ⅳ）41 例（58．6%）。

1．2 方法

抽取卵巢腫瘤患者空腹靜脈血5ml，混勻后在4℃下 3 000r／min 離 心 15min。收 集血清 在－80℃冷藏待檢。

1．3 ECLIA法檢測CA125

采用瑞士羅氏公司的E－170電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀和配套試劑檢測CA125，嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行操作［5］。

1．4 ELISA法檢測HE4

采用瑞典CanAg diagnostics公司提供試劑盒，使用ELISA法［6］（酶聯(lián)免疫復(fù)合物）檢測 HE4，，嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作，在瑞士澳斯邦公司FAME自動板式免疫分析儀上測定。

1．5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS17．0軟件分析數(shù)據(jù)。采用中位數(shù)和四分位間距（interquartilerange，IQR）表示 CA125和HE4的水平。采用Spearman相關(guān)分析檢驗(yàn)HE4與CA125關(guān)系，血清標(biāo)志物HE4與CA125在不同病理因素間的比較使用 Mann－WhitneyU檢驗(yàn)。無進(jìn)展生存期（progressionfreesurvival，PFS）指自血清標(biāo)本采集起至疾病進(jìn)展或隨訪結(jié)束時間。使用Kaplan－Meier方法分析總生存期，并用多因素Logistic回歸分析不同組間生存差異。檢驗(yàn)水準(zhǔn)設(shè)為0．05，P＜0．05時有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2．1 不同狀態(tài)患者之間的血清CA125、HE4水平

70例患者CA125和HE4的血清濃度中位數(shù)分別 為 625．4pmol／L（IQR1126．4pmol／L）和205．6pmol／L（IQR456．7pmol／L），兩者的血清水平具有顯著的相關(guān)性（r＝0．64，P＜0．05）。不同月經(jīng)狀態(tài)和腫瘤分化程度患者之間的血清CA125和HE4水平無顯著差異（P＞0．05）。不同分化程度和臨床分期患者之間的血清CA125和HE4水平差異顯著（P＜0．05）。見表1。

表1 不同狀態(tài)患者之間的血清CA125、HE4水平（pmol／L）

2．2 血清CA125和HE4水平與卵巢癌患者預(yù)后的關(guān)系

70例卵巢癌患者，中位隨訪28個月（4－49個月），PFS＜3年的46例，PFS≥3年24例。PFS＜3年 的 CA125 和 HE4 中 位 數(shù) 976．3pmol／L（IQR1345．6pmol／L）和456．7pmol／L（IQR1015．7 pmol／L）。PFS≥3年CA125和 HE4中位數(shù)357．6 pmol／L（IQR665．3pmol／L）和 203．6pmol／L（IQR264．4pmol／L），不同生存時間患者之間的血清CA125、HE4水平差異顯著（P＜0．05）。見表2。

2．3 不同HE4水平卵巢癌患無進(jìn)展生存曲線

HE4低水平組（≤205．6pmol／L）患者的中位PFS為28．0個月（95%CI：25．7－32．8個月），而HE4高水平組（＞205．6pmol／L）患者的中位PFS僅為18．0個月（95%CI：6．8－31．5個月）。HE4低水平組患者的3年無進(jìn)展生存率為34．6%，HE4高水平為8．0%（P＜0．05）。見圖1。

表2 不同生存時間患者之間的血清CA125、HE4水平 （pmol／L）

2．4 多因素Logistic回歸分析多因素分析

圖1 不同HE4水平卵巢癌患無進(jìn)展生存曲線

將CA125血清水平、HE4血清水平、臨床分期、月經(jīng)狀態(tài)、病理類型和分化程度進(jìn)行賦值并納入多因素Logistic回歸分析方程中，CA125血清水平（＜625．4＝0，＞625．4＝1）、HE4血清水平（＜205．6＝0，＞205．6＝1）、臨床分期（早期＝0，晚期＝1）、月經(jīng)狀態(tài)（未絕經(jīng)＝0，絕經(jīng)＝1）、病理類型（漿液性＝0，非漿液性＝1）和分化程度（中低、中＝0，高、中＝1）作為自變量X，PFS（＜3年＝0，≥3年＝1）作為因變量 Y。結(jié)果顯示，CA125（β＝－1．56，OR＝0．21）、HE4（β＝－1．94，OR＝0．14）和臨床分期（β＝－1．29，OR＝0．28）對PFS有著顯著的負(fù)面影響（P＜0．05），而月經(jīng)狀態(tài)、病理類型及分化程度與卵巢癌預(yù)后無關(guān)（P＞0．05），表3。

表3 影響PFS的多因素Logistic回歸分析

3 討論

癌變的卵巢上皮細(xì)胞膜上會大量表達(dá)表達(dá)CA125，因此可以作為卵巢癌的檢測的首選標(biāo)志物。而且據(jù)研究表明［7］，CA125會隨著卵巢癌的發(fā)生、增殖、消退和復(fù)發(fā)而變化。監(jiān)測CA125的水平可以幫助醫(yī)師判斷卵巢癌的預(yù)后。但是單一采用CA125仍有許多不足之處［8－9］：特異性較低，在非卵巢癌的疾病中包括消化道腫瘤、盆腔炎、良性卵巢腫瘤等患者中均發(fā)現(xiàn)CA125檢測陽性；仍有40%－60%的卵巢癌患者CA125檢測為陰性。所以臨床上一直在尋找較好的標(biāo)志物來聯(lián)合CA125提高診斷的靈敏度和特異性。HF4在附睪上皮細(xì)胞首次發(fā)現(xiàn)，屬于一種Whey酸性蛋白家族分泌蛋白，經(jīng)分析發(fā)現(xiàn)其在卵巢癌組織中表達(dá)具有差異性［10］。有實(shí)驗(yàn)證實(shí)，HF4診斷卵巢癌的靈敏度和特異度分別可以達(dá)到80%和90%之高，具有很高的診斷價值。卵巢癌的嚴(yán)重程度和患者的預(yù)后密切相關(guān)，對于醫(yī)師的治療方案有著重要影響。一些臨床指標(biāo)如臨床分期、分化程度、月經(jīng)狀態(tài)等因素可以用于卵巢癌患者預(yù)后的判斷，但是缺少可以量化的指標(biāo)。在本次實(shí)驗(yàn)中，CA125和HE4的血清濃度中位數(shù)分別為625．4pmol／L（IQR1126．4pmol／L）和 205．6 pmol／L（IQR456．7pmol／L），兩者的血清水平具有顯著的相關(guān)性（r＝0．64，P＜0．05），說明CA125和HE4具有較好的協(xié)同作用。不同分化程度和臨床分期患者之間的血清CA125和HE4水平差異顯著（P＜0．05）。不同生存時間患者之間的血清CA125、HE4水平差異顯著 （P＜0．05）。說明CA125和HE4可以較好的反映卵巢癌的嚴(yán)重程度，而且與卵巢癌的進(jìn)展、變化密切相關(guān)。HE4低水平組患者的3年無進(jìn)展生存率為34．6%，HE4高水平為8．0%（P＜0．05）。說明HE4可以反映患者的預(yù)后。回歸分析結(jié)果顯示，CA125（β＝－1．56，OR＝0．21）、HE4（β＝－1．94，OR＝0．14）和臨床分期（β＝－1．29，OR＝0．28）對PFS有著顯著的負(fù)面影響（P＜0．05），而月經(jīng)狀態(tài)、病理類型及分化程度與卵巢癌預(yù)后無關(guān)（P＞0．05），說明CA125聯(lián)合HE4可以較好的反映患者的預(yù)后，再結(jié)合臨床分期，可以成為判斷卵巢癌的嚴(yán)重性的重要依據(jù)。綜上所述，CA125和HE4同卵巢癌的臨床分期有關(guān)，CA125和HE4和卵巢癌的嚴(yán)重程度密切相關(guān)，高水平的CA125和HE4提示預(yù)后不良。

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