劉艷，熊偉，李春紅，田吉，何兵 （.瀘州醫(yī)學(xué)院藥物與功能性食品中心，四川 瀘州646000；.瀘州醫(yī)學(xué)院公共衛(wèi)生學(xué)院，四川 瀘州646000）

山銀花為忍冬科植物紅腺忍冬L.hypoglauca M、灰氈毛忍冬L.macranthoides H－M、華南忍冬L.confusa DC［1］的干燥花蕾或帶初開的花，具有清熱解毒、消癰散腫、涼血止痢之功效，主治癰腫、喉痹、丹毒、熱毒血痢、風(fēng)熱感冒、溫病發(fā)熱等癥。瀘州古藺山銀花主要為灰氈毛忍冬L.macranthoides H－M，具有資源優(yōu)勢，但其成品顏色暗淡，香氣較淡，價格偏低［2］。適時分批采摘金銀花，控制好各加工干制方法的操作要點，是保證質(zhì)量的重要技術(shù)環(huán)節(jié)。關(guān)于傳統(tǒng)方法和現(xiàn)代干燥技術(shù)對瀘州山銀花揮發(fā)油的影響鮮有報道［3］。本研究以大白期瀘州古藺山銀花為材料，采用陰干、曬干、真空干燥、遠紅外干燥、微波干燥、烘干6種方法加工山銀花，對外觀性狀進行描述，采用氣相色譜法測定山銀花揮發(fā)油中芳樟醇的含量［4］，為提高和控制瀘州山銀花藥材質(zhì)量提供理論與技術(shù)依據(jù)。

1 材料

SDZF－6021真空干燥箱；遠紅外干燥箱；HX.BV－7型醫(yī)用培養(yǎng)箱；Agilent 7890A 氣相色譜儀（美國Agilent 公司），7693B自動進樣器，氫火焰離子化檢測器（FID）；玻璃揮發(fā)油提取器；Precisa電子天平（XR205SM－DR）。

瀘州山銀花藥材，2011年5月采自瀘州市古藺縣山銀花栽培基地（經(jīng)瀘州醫(yī)學(xué)院生藥教研室稅丕先教授鑒定為瀘州山銀花L.macranthoides H－M）。芳樟醇對照品（含量97%，美國Aldrich公司，批號01816HI）。乙醚為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 干燥方法及對山銀花外觀品相的影響

2.1.1 干燥方法 將鮮花采回后，揀選大小均勻的花蕾，選擇以下6種方法干燥：曬干，選擇多日晴好天氣，松散的薄攤于竹簾上暴曬。陰干，薄攤于竹簾上，置于陰涼處晾干。真空干燥，薄攤于真空干燥箱中，置于40 ℃（0.1 MPa）下烘干。烘干，薄攤于烘箱中，置于40 ℃下恒溫烘干。遠紅外干燥，薄攤于遠紅外干燥箱中，置于40 ℃下恒溫干燥。微波干燥，薄攤于微波爐中，三段式干燥，微波干燥2 min，取出發(fā)汗，放置至室溫后，再微波干燥2 min，放置至室溫后再干燥至全干。

2.1.2 干燥品外觀檢查結(jié)果 從外觀顏色、質(zhì)地評價，真空干燥樣品最好，烘干樣品次之，陰干≥曬干＞遠紅外干燥＞微波干燥；從香氣和油潤度評價，陰干最好，微波干燥最差，其他4種方法差別不大。見表1。

2.2 GC測定方法及結(jié)果

2.2.1 溶液的制備

（1）對照品溶液：取芳樟醇對照品37.46 mg，精密稱定，置10 mL量瓶中，以乙醚溶解并定容，從中取1 mL置10 mL量瓶中，加乙醚稀釋至刻度，搖勻，即得0.374 6 mg·mL－1。

（2）供試品溶液：取山銀花藥材50 g，精密稱定，置圓底燒瓶中，加水500 mL，自測定器上端加水使充滿刻度部分，再加乙醚3 mL，連接揮發(fā)油測定器［5］，連接回流冷凝管，加熱蒸餾4 h，分取乙醚層，加適量無水硫酸鈉脫水，定容為10 mL，即得。

表1 不同干燥方法加工的山銀花外觀品相Tab 1 The appearance of L.macranthoides H－M with different drying methods

2.2.2 色譜條件及專屬性試驗 HP－5石英毛細管柱（30.0 m×320μm×0.25μm）；FID 檢測器，進樣口溫度：235 ℃，檢測口溫度245 ℃；載氣：高純氮氣，流量：1 mL·min－1；補充氣：氮氣40 mL·min－1，分流1∶20；氫氣，40 mL·min－1；空氣，500 mL·min－1；程序升溫，初始溫度為90 ℃，以4 ℃·min－1速 率 升 溫 至200 ℃，再 以40 ℃·min－1速 率 升 溫 至240 ℃，保持10 min；進樣量：1μL。取對照品溶液、供試品溶液和溶劑（乙醚）各1μL，按上述色譜條件測定，結(jié)果顯示溶劑和山銀花揮發(fā)油中其他成分對測定結(jié)果無干擾，色譜見圖1。

圖1 芳樟醇對照品（A）、瀘州山銀花藥材（B）和溶劑（乙醚）（C）的GCFig 1 GC chromatograms of linalool（A），L.macranthoides H－M（B）and solvent（ethylether）（C）

2.2.3 線性關(guān)系考察 精密稱取芳樟醇對照品50.075 mg，置25 mL量瓶中，用乙醚溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品儲備液（芳樟醇質(zhì)量濃度2.003 1 mg·mL－1），分別吸取對照品儲備液1，2，4，5，6.0mL，置10 mL量瓶中，用乙醚稀釋至刻度，搖勻，制成系列質(zhì)量濃度的溶液。分別取1μL 注入氣相色譜儀，記錄色譜圖。以峰面積（Y）為縱坐標，對照品進樣量（X，μg）為橫坐標，繪制標準曲線。結(jié)果芳樟醇在0.200 3～1.201 8 μg 線 性 關(guān) 系 良 好，回 歸 方 程 為：Y ＝518.01 X－90.758，r＝0.999 9。

2.2.4 精密度試驗 精密吸取“2.2.1”項下對照品溶液1 μL，按上述色譜條件連續(xù)進樣6次，測得芳樟醇峰面積RSD為0.97%（n＝6），表明儀器精密度良好。

2.2.5 穩(wěn)定性試驗 取“2.2.1”項下供試品溶液，室溫下放置，于制備后0，2，4，6，8，12 h進樣測定。結(jié)果芳樟醇峰面積RSD 為1.53%（n＝6），表明供試品溶液在12 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.2.6 重復(fù)性試驗 取同一批藥材（真空干燥樣品），按“2.2.1”項下方法分別制得6份供試品溶液，進樣測定，結(jié)果芳樟醇平均含量為0.014 9%，0.014 6%（n＝6），RSD 均為1.35%，表明上述方法重復(fù)性良好。

2.2.7 加樣回收試驗 精密稱取已知含量的山銀花藥材9份，每份25 g，分成3組，每組3份，分別按相當(dāng)于供試品中芳樟醇80%，100%，120%的量加入對照品（不同加入量各3份），制備供試品溶液，依法測定。結(jié)果芳樟醇平均回收率為98.16%，RSD 為1.98%。實驗結(jié)果表明，本法具有良好的回收率。

2.2.8 樣品測定 分別精密吸取對照品溶液和各供試品溶液1μL，照“2.2.2”項下色譜條件測定，記錄芳樟醇的峰面積，并用外標法計算含量。

以揮發(fā)油中芳樟醇含量評價，真空干燥樣品均高于其他方法，烘干、曬干、陰干3種方法差別不大，遠紅外干燥、微波干燥樣品含量較低。結(jié)果見表2。

表2 不同干燥方法下瀘州山銀花芳樟醇測定結(jié)果（n＝3）Tab 2 Results of determinotion L.macranthoides H－M in different drying method（n＝3）

3 討論

3.1 提取時間和溶劑的選擇 分別考察了提取1，2，3，4，5 h，結(jié)果顯示4 h后，揮發(fā)油的量不再增加，故選擇4 h。分別采用石油醚、醋酸乙酯、乙醚為溶劑對提取的揮發(fā)油進行溶解，色譜圖顯示，乙醚為溶劑時溶劑峰小，對樣品測定無干擾，故選擇乙醚為溶劑。

3.2 揮發(fā)油測定器的選擇 采用《中國藥典》2010年版中揮發(fā)油測定甲法的裝置進行測定，結(jié)果顯示揮發(fā)油置于高溫下，溶解較多在水溶液中，損失較多；改用我所自制揮發(fā)油提取器進行提取后，揮發(fā)油與加熱裝置分開較遠，幾乎沒有溶解于水中，提取完全，故選擇我所自制提取器［4］。

3.3 程序升溫的選擇 實驗中參照文獻方法［5－8］，比較了不同的升溫程序，本實驗采用的條件使芳樟醇主峰與其他峰分離度達到15，分離效果好，分析時間短。

綜合外觀品質(zhì)及含量測定結(jié)果，真空干燥方法優(yōu)于其他方法。

［1］ 中國藥典.一部［S］.2005：21－22.

［2］ 茍占平.川產(chǎn)金銀花的品種品質(zhì)研究，成都中醫(yī)藥大學(xué)博士學(xué)位論文，2004.

［3］ 王柳平，辛寧.廣西不同產(chǎn)地與加工方法山銀花中綠原酸的含量比較［J］.時珍國醫(yī)國藥，2008，19（6）：1370－1371.

［4］ 何兵，田吉.揮發(fā)油含量測定新裝置［J］.瀘州醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2003，26（1）：18－19.

［5］ 田吉，馮文宇，邱華榮，等.金銀花藥材氣相指紋圖譜研究［J］.瀘州醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2002，25（1）：76－78.

［6］ 肖東，王甫英，張銀玲，等.毛細管氣相色譜法測定復(fù)方雙鋅噴霧劑含量［J］.中國醫(yī)院藥學(xué)雜志，2008，28（21）：1893－1894.

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