■周 穎 周建群 浦琴華 顧林英 占秀安
(1.浙江大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院,浙江杭州310058;2.南寧市澤威爾飼料有限責(zé)任公司,廣西南寧530221;3.浙江一星實(shí)業(yè)股份有限公司,浙江海鹽314300;4.浙江欣欣飼料股份有限公司,浙江嘉興314000)
有機(jī)微量元素穩(wěn)定性好、吸收利用率高、作用效果顯著等優(yōu)點(diǎn),在生產(chǎn)中被廣泛應(yīng)用。由于有機(jī)微量元素是金屬元素與有機(jī)物如蛋白、小肽、氨基酸、多糖等配體通過共價(jià)鍵或離子鍵結(jié)合而形成的絡(luò)合物或螯合物,除具有無機(jī)微量元素的營養(yǎng)功能外,還具有改善豬肉肉質(zhì)、胴體品質(zhì)、提高機(jī)體抗氧化及免疫等功能。對(duì)此前人已有大量的研究,如有機(jī)錳能通過降低滴水損失,改善肉色和肌肉pH值,顯著改善豬肉品質(zhì);有機(jī)硒可提高胴體瘦肉率,并通過提高體內(nèi)器官的含硒量和谷胱甘肽過氧化物酶的活性提高機(jī)體抗氧化功能;有機(jī)鋅銅可通過提高組織中鋅銅含量增強(qiáng)組織抗氧化和免疫性能。復(fù)合寡糖微量元素絡(luò)合物是有機(jī)微量元素的一種,是由可溶性金屬鹽與寡糖溶液產(chǎn)生的復(fù)合型有機(jī)微量元素絡(luò)合物。由于微量元素之間存在著協(xié)同和拮抗作用,不同來源的微量元素生物利用率變異較大,復(fù)合型微量元素可有效解決這一問題。本試驗(yàn)針對(duì)浙江省尤其是嘉興市場(chǎng)生豬飼料中采用高銅、高鋅仔豬料飼喂到出欄的現(xiàn)象,對(duì)比新型復(fù)合寡糖微量元素絡(luò)合物與無機(jī)微量元素對(duì)育肥豬的飼用效果,研究其對(duì)育肥豬豬肉品質(zhì)及抗氧化功能的影響,為生產(chǎn)實(shí)踐提供參考。
試驗(yàn)動(dòng)物為“杜×長(zhǎng)×大”三元雜交豬?;A(chǔ)日糧參考NRC(1998)豬營養(yǎng)需要配制而成的顆粒飼料,其配方及營養(yǎng)水平見表1。復(fù)合寡糖微量元素絡(luò)合物由南寧市澤威爾飼料有限責(zé)任公司提供。
選取體重約98 kg的健康“杜×長(zhǎng)×大”三元雜交豬90頭,按飼養(yǎng)試驗(yàn)要求隨機(jī)分為3組,每組3個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)10頭豬(公、母各半)。對(duì)照組飼喂常規(guī)高銅日糧,有機(jī)試驗(yàn)組飼喂添加了復(fù)合寡糖微量元素絡(luò)合物的日糧,無機(jī)試驗(yàn)組飼喂添加了與有機(jī)試驗(yàn)組等量的無機(jī)微量元素的日糧。對(duì)照和試驗(yàn)各組微量元素含量見表2。預(yù)試期7 d,正試期28 d。自由采食和飲水,常規(guī)飼養(yǎng)管理。飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后,每組每重復(fù)選2頭出欄母豬,共18頭,耳靜脈采血,3 000 r/min離心10 min,分離血清。采血后屠宰,于每頭豬的左側(cè)胴體的最后肋骨處取背最長(zhǎng)肌樣品,于左側(cè)肝小葉中部取肝組織樣品與左側(cè)腎臟取腎組織樣品。
表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))
表2 對(duì)照組和試驗(yàn)組日糧微量元素添加量(mg/kg)
1.3.1 肉色與滴水損失
肉色采用X-rite SP-60型色差儀測(cè)定。滴水損失采用懸掛法,分別測(cè)定24 h和48 h滴水損失。
1.3.2 血清和組織微量元素含量
血清中微量元素含量的測(cè)定:準(zhǔn)確取血清樣品0.30 ml置于錐形瓶中以4∶1的硝酸∶高氯酸消化至白色沉渣,用3%的硝酸溶液溶解并定容至10 ml,用火焰原子吸收光譜法測(cè)定。組織中微量元素含量的測(cè)定:將組織樣品于105℃烘干,準(zhǔn)確稱取0.5 g烘干后樣品,以4∶1的硝酸∶高氯酸濕法消化處理,定容至10 ml,火焰原子光譜法測(cè)定。
1.3.3 血清生化及組織抗氧化功能指標(biāo)
血清、肌肉和肝臟中丙二醛(MDA)含量、總抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、總超氧化物歧化酶(T-SOD)、過氧化氫酶(CAT)活力和血清中總蛋白(TP)、尿素氮(UN)含量采用南京建成生物工程研究所的試劑盒測(cè)定,試劑配制和操作步驟按說明書進(jìn)行。
試驗(yàn)數(shù)據(jù)用Excel進(jìn)行計(jì)算處理,SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件的單因素方差分析進(jìn)行顯著性分析。數(shù)據(jù)用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(X±SD)”表示。
由表3可見,相比高銅對(duì)照組,有機(jī)試驗(yàn)組提高了背最長(zhǎng)肌紅色色度a*值73.75%(P<0.05),24 h和48 h的滴水損失率降低了1.40個(gè)百分點(diǎn)(P<0.05)和1.12個(gè)百分點(diǎn)(P>0.05)。與無機(jī)試驗(yàn)組比較,有機(jī)試驗(yàn)組也有改善背最長(zhǎng)肌肉色和降低滴水損失的趨勢(shì)(P>0.05)。
表3 復(fù)合寡糖微量元素絡(luò)合物對(duì)育肥豬肉質(zhì)的影響
表4 復(fù)合寡糖微量元素絡(luò)合物對(duì)育肥豬血清、組織微量元素含量的影響
如表4所示,血清、肌肉中銅、鋅以及肝臟和腎臟中銅、鋅和錳含量的變化趨于基本一致,以對(duì)照組最高,而有機(jī)試驗(yàn)組多數(shù)高于無機(jī)試驗(yàn)組,但后兩者之間均無顯著差異(P>0.05)。除了腎臟外,血清、肌肉和肝臟中鐵的含量以有機(jī)試驗(yàn)組最高,而無機(jī)試驗(yàn)組和對(duì)照組之間均無顯著差異(P>0.05)。
表5 復(fù)合寡糖微量元素絡(luò)合物對(duì)育肥豬血清生化指標(biāo)的影響
由表5可知,有機(jī)試驗(yàn)組血清T-AOC最高,較高銅對(duì)照組和無機(jī)試驗(yàn)組分別高出了69.74%(P<0.01)和54.49%(P<0.01);有機(jī)試驗(yàn)組T-SOD活力與對(duì)照組相比無顯著差異,但高于無機(jī)試驗(yàn)組6.13%(P>0.05);血清GSH-Px、CAT活力和MDA含量指標(biāo),組間均無顯著差異。此外,有機(jī)試驗(yàn)組和無機(jī)試驗(yàn)組TP含量顯著高于高銅對(duì)照組(P<0.05),并有降低UN含量的趨勢(shì)(P>0.05)。
表6 復(fù)合寡糖微量元素絡(luò)合物對(duì)育肥豬肝臟抗氧化指標(biāo)的影響
由表6可見,有機(jī)和無機(jī)試驗(yàn)組肝臟GSH-Px活力無顯著差異(P>0.05),但均顯著高于高銅對(duì)照組(P<0.05)。其他抗氧化指標(biāo)各組間均無顯著差異(P>0.05)。
表7 復(fù)合寡糖微量元素絡(luò)合物對(duì)育肥豬肌肉抗氧化指標(biāo)的影響
由表7可知,各處理組肌肉T-AOC、T-SOD活力和MDA含量均無顯著差異(P>0.05);相比高銅對(duì)照組,有機(jī)和無機(jī)試驗(yàn)組則顯著提高了GSH-Px活力(P<0.05)。
前人研究表明,高銅對(duì)豬肉品質(zhì)可能存在不利的影響,表現(xiàn)為不飽和脂肪酸含量提高,產(chǎn)生軟脂,升高碘值,降低脂肪熔點(diǎn),提高豬肉失水率。本研究結(jié)果表明,相比高銅對(duì)照組,有機(jī)試驗(yàn)組顯著提高了背最長(zhǎng)肌紅色色度a*值,并降低了24 h和48 h的滴水損失率;與無機(jī)微量元素比較,有機(jī)微量元素組有改善背最長(zhǎng)肌肉色和降低滴水損失的趨勢(shì)。
肉色是肉質(zhì)性狀的直觀表現(xiàn),直接影響了消費(fèi)者對(duì)豬肉的購買趨向。在屠宰時(shí)如果放血充分,肌紅蛋白在肉中的比例可達(dá)到80%~90%,是構(gòu)成肉色的主要因素。Fe2+是肌紅蛋白的組成成分,肌紅蛋白本身是紫紅色的,與氧結(jié)合可生成氧合肌紅蛋白,為鮮紅色,是肉新鮮的象征,為消費(fèi)者所鐘愛。豬肉儲(chǔ)藏過久顏色會(huì)逐漸變成暗紅色,這是因?yàn)榧〖t蛋白和氧合肌紅蛋白中Fe2+被氧化為Fe3+,生成高鐵肌紅蛋白,呈褐色,使肉色變暗。本試驗(yàn)有機(jī)微量元素顯著提高了背最長(zhǎng)肌的a*值。這可能是由于有機(jī)微量元素使組織中鐵的含量增加,使肌肉中肌紅蛋白的含量增加,同時(shí)提高了肌肉的抗氧化能力,降低了肌紅蛋白中Fe2+轉(zhuǎn)化為Fe3+的機(jī)率,從而使背最長(zhǎng)肌的a*值顯著提高。
滴水損失在鮮肉的銷售過程中是不可避免的,這是由于肌細(xì)胞脂質(zhì)自動(dòng)催化的過程中會(huì)產(chǎn)生自由基,發(fā)生氧化反應(yīng),致使肌肉的生物膜結(jié)構(gòu)及其流動(dòng)性破壞,水分從肉中溢出。陳代文等比較了日糧中銅的添加水平為0和250 mg/kg時(shí)對(duì)豬肉肉色和滴水損失的影響,發(fā)現(xiàn)高銅對(duì)滴水損失影響不顯著,但趨于提高第3 d和第6 d的肉色評(píng)分。而本研究則表明,降低微量元素的使用量可降低24 h的滴水損失,且使用有機(jī)微量元素效果顯著,而對(duì)48 h的滴水損失無顯著影響,但有降低的趨勢(shì)。這可能是由于有機(jī)試驗(yàn)組和無機(jī)試驗(yàn)組提高了肌肉GSH-Px活力,有效削弱了自動(dòng)催化的氧化過程對(duì)細(xì)胞膜的傷害,降低了24 h滴水損失。但隨著時(shí)間的延長(zhǎng),其理化特性的變化,無法繼續(xù)發(fā)揮作用,因而在48 h時(shí),各組滴水損失無顯著差異。
關(guān)于有機(jī)銅對(duì)動(dòng)物組織中微量元素含量的影響有不同的報(bào)道。Hahn等的研究表明,與氧化鋅相比,飼喂硫酸鋅、蛋氨酸鋅、賴氨酸鋅均能顯著提高仔豬血漿中鋅的含量。Angelov等報(bào)道,與硫酸銅相比,蛋氨酸銅可顯著提高生長(zhǎng)豬肝臟和脾臟銅的儲(chǔ)存量。Coffey等報(bào)道,與硫酸銅相比,賴氨酸銅可降低仔豬肝銅含量。而本試驗(yàn)結(jié)果表明,血清、肌肉中銅、鋅以及肝臟和腎臟中銅、鋅和錳含量的變化趨于基本一致,以對(duì)照組最高,而有機(jī)試驗(yàn)組多數(shù)高于無機(jī)試驗(yàn)組,但后兩者間肝臟無顯著差異。除了腎臟外,血清、肌肉和肝臟中鐵的含量以有機(jī)試驗(yàn)組最高,而無機(jī)試驗(yàn)組和對(duì)照組間均無顯著差異,即有機(jī)微量元素能使機(jī)體更有效地吸收日糧中的微量元素,在一定程度上提高育肥豬血清和組織中微量元素含量,其中提高鐵的生物學(xué)利用率效果最佳。造成各試驗(yàn)間結(jié)果的差異除與動(dòng)物的品種有關(guān)外,還與各有機(jī)微量元素的種類以及添加水平有關(guān)。本試驗(yàn)中,復(fù)合寡糖微量元素使日糧中可利用的微量元素含量更加穩(wěn)定,減少了因不同形式的各微量元素間性質(zhì)的差異而產(chǎn)生的生物學(xué)效價(jià)損失。
微量元素銅、鋅、錳、硒等是參與機(jī)體清除自由基的輔酶或組成部分,在機(jī)體抗氧化功能中起著相當(dāng)重要的作用。高銅日糧能顯著提高斷奶仔豬血清超氧化物歧化酶(CuZn-SOD)和血清銅藍(lán)蛋白(CP)的活力。但抗氧化酶活性的提高并不是隨著微量元素的添加呈直線上升的。有研究表明,當(dāng)日糧銅含量從125 mg/kg提高到250 mg/kg時(shí),豬血液中的CuZn-SOD活性下降了9%。Zhang等也報(bào)道,日糧中高銅會(huì)導(dǎo)致血清脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA濃度增加,紅細(xì)胞中SOD活性下降,引起脂質(zhì)氧化。冷靜等的試驗(yàn)結(jié)果表明,與1 000 mg/kg和3 000 mg/kg ZnO相比,當(dāng)添加水平達(dá)5 000 mg/kg時(shí),斷奶仔豬血清CuZn-SOD活性出現(xiàn)下降的趨勢(shì)。本研究表明,有機(jī)試驗(yàn)組血清中TAOC最高,T-SOD活力與對(duì)照組相比無顯著差異,但高于無機(jī)試驗(yàn)組。這說明在一定范圍內(nèi)增加微量元素的添加量可一定程度上提高機(jī)體抗氧化能力,但與無機(jī)微量元素相比,相對(duì)低劑量有機(jī)微量元素對(duì)育肥豬抗氧化能力的提高效果更佳。類似的研究有甘氨酸鐵可顯著提高仔豬血清CAT活性,且有降低血清MDA濃度的趨勢(shì);蛋氨酸銅能使血清谷胱甘肽過氧化物酶活性升高等。
血清中總蛋白含量在一定程度上反映了日糧中蛋白質(zhì)的營養(yǎng)水平及動(dòng)物對(duì)蛋白質(zhì)的消化吸收程度,而尿素氮含量則可一定程度上反映機(jī)體蛋白質(zhì)的分解水平。郝貴增等的研究表明,蛋氨酸銅能使仔豬血漿總蛋白含量升高,同時(shí)降低血清尿素氮水平。本試驗(yàn)表明,有機(jī)試驗(yàn)組和無機(jī)試驗(yàn)組血清中總蛋白含量顯著高于高銅對(duì)照組,且有降低血清尿素氮含量的趨勢(shì)。這說明在豬的肥育階段降低微量元素的使用量,可能通過加速蛋白質(zhì)的合成或減緩蛋白質(zhì)的降解而提高機(jī)體內(nèi)氮的沉積。
研究表明,日糧中添加有機(jī)鋅、銅、錳使蛋雞肝臟的抗氧能力提高。余姮的研究表明,用有機(jī)銅分別替代硫酸銅可顯著降低豬肝MDA含量,但對(duì)SOD、GSH-Px和CAT活性無顯著影響;用有機(jī)鋅替代硫酸鋅可使豬肝SOD活性顯著增加,并顯著降低MDA含量。這皆說明有機(jī)微量元素相較無機(jī)微量元素有更高的效價(jià)。而本試驗(yàn)則表明,有機(jī)試驗(yàn)組和無機(jī)試驗(yàn)組肝臟和肌肉中GSH-Px活力無顯著差異,但均顯著高于高銅對(duì)照組,其他抗氧化指標(biāo)各組間均無顯著差異。這表明降低微量元素的使用量,可顯著提高育肥豬肝臟和肌肉中GSH-Px活力。其原因可能為銅、鐵、錳、鋅添加量的降低減少了對(duì)硒吸收的拮抗作用,更多的硒被機(jī)體吸收利用,沉積在肝臟和肌肉中,從而提高了GSH-Px的活力。
育肥豬飼喂有機(jī)微量元素相比于高銅日糧,可有效改善豬肉品質(zhì),其主要原因是增強(qiáng)了機(jī)體的抗氧化能力。此外,與無機(jī)微量元素組相比,飼喂有機(jī)微量元素能獲得相對(duì)較好的豬肉品質(zhì)。
在生產(chǎn)實(shí)踐中,復(fù)合寡糖微量元素絡(luò)合物相對(duì)一般有機(jī)微量元素添加劑,其工藝流程簡(jiǎn)單,成本低廉。在育肥豬階段降低微量元素使用量,可考慮使用復(fù)合寡糖微量元素絡(luò)合物替代無機(jī)微量元素,以減少無機(jī)微量元素帶來的污染、動(dòng)物健康以及病菌耐受性等問題,同時(shí)一定程度地改善豬肉品質(zhì)。
(參考文獻(xiàn)17篇,刊略,需者可函索)