喻俊磊

（江西省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢測(cè)院，江西 南昌 330029）

高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定食品中苯甲酸(鈉)、山梨酸(鉀)、安賽蜜、糖精鈉和脫氫乙酸(鈉)的研究

喻俊磊

（江西省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢測(cè)院，江西 南昌 330029）

探討采用高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定食品中的苯甲酸、山梨酸、安賽蜜、糖精鈉和脫氫乙酸五種食品添加劑含量的方法。樣品經(jīng)超聲提取，采用C18色譜柱，以0.02mol/L乙酸胺-甲醇為流動(dòng)相，用二極管陣列檢測(cè)器于230 nm波長(zhǎng)處檢測(cè)。該方法靈敏度高,重現(xiàn)性和選擇性好，回收率高，易于操作，是檢測(cè)食品中5種添加劑的有效定量方法。

高效液相色譜法 苯甲酸(鈉) 山梨酸(鉀) 糖精鈉 安賽蜜(乙酰磺胺酸鉀) 糖精鈉脫氫乙酸(鈉)

隨著我國(guó)社會(huì)的進(jìn)步和經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，消費(fèi)者對(duì)食品的安全性日益關(guān)注，最近幾年，由于食品安全問(wèn)題層出不窮，人們?cè)絹?lái)越重視食品添加劑所帶來(lái)的安全隱患，特別是防腐劑 [山梨酸（SA）、苯甲酸（BA）、脫氫乙酸（DHA）] 和人工合成甜味劑 [糖精鈉（SS）、安賽蜜 (AK)] 的使用。防腐劑、甜味劑廣泛應(yīng)用在各種食品、飲料中，它具有殺滅或抑制微生物增殖和賦予食品以甜味的作用，但過(guò)量攝入會(huì)對(duì)人體帶來(lái)傷害，還可引發(fā)癌癥。在我國(guó)食品添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)中，對(duì)其使用范圍和最大使用限量均有明確規(guī)定。市場(chǎng)上食品中防腐劑和人工合成甜味劑超標(biāo)的現(xiàn)象比較普遍，而現(xiàn)有檢測(cè)這幾種項(xiàng)目的方法并不一致，導(dǎo)致對(duì)同一樣品需進(jìn)行不同的前處理方法，不但工作效率低，也增加了工作成本。因此同時(shí)快速檢測(cè)成為必要。本文建立在國(guó)標(biāo)的基礎(chǔ)上探討采用反相高效液相色譜同時(shí)測(cè)定食品防腐劑、甜味劑的方法，方法靈敏有效、簡(jiǎn)便快速，在實(shí)際工作中有很強(qiáng)的實(shí)用性。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

儀器 Agilent-1200型高效液相色譜儀(配二極管陣列檢測(cè)器)，超聲波清洗器，食品粉碎機(jī)，PH計(jì)，天平：分度值為0.001mg。0.02mol/L 乙酸銨、甲醇（色譜純）、1：1 氨水溶液、乙酸鋅溶液(200 g/L)；亞鐵氰化鉀溶液(100 g/L) ；氫氧化鈉溶液(10 g/L)；碳酸氫鈉溶液(20g/L)。苯甲酸、山梨酸、糖精鈉、脫氫乙酸標(biāo)準(zhǔn) (純度＞99%)， 糖精鈉、苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)(1.0mg/ml)。

1.2 色譜條件

色譜柱：Eclipse XDB-C18柱，250mm×4.6mm，5 μm；柱溫：35℃；流動(dòng)相：甲醇(色譜純)+0.02mol/ L乙酸銨溶液(5：95)；流速：1 mL/min；檢測(cè)器：二極管陣列檢測(cè)器，參考波長(zhǎng)230 nm；進(jìn)樣量：5μL。

1.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備

精密稱取山梨酸、苯甲酸、脫氫乙酸、安賽蜜和糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)品各 100mg于100ml容量瓶中，加5ml碳酸氫鈉溶液溶解，加水定容至刻度，搖勻，配制成1000μg/ml山梨酸、苯甲酸、脫氫乙酸、安賽蜜和糖精鈉的混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液。臨用前用純水將混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液(1000μg/ml)稀釋為0、10、20、40、80、160、320μg/m l混合標(biāo)準(zhǔn)系列， 于液相色譜儀進(jìn)樣10μL，每個(gè)濃度進(jìn)樣3次，各標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)以峰面積對(duì)應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.4 樣品前處理方法的選擇

參照國(guó)標(biāo)方法GB/T23495-2009和GB/T23377-2009[1-3]，各組分的樣品前處理方法不同，本文充分考慮各組分的理化特性，針對(duì)不同類型樣品，采用不同前處理方法。果汁飲料、碳酸飲料類等基質(zhì)比較簡(jiǎn)單的液體樣品，超聲脫氣后，直接于液相色譜分析定量；乳制品飲料、醬油類等高蛋白的液體樣品，需加沉淀劑沉淀蛋白質(zhì)，定容過(guò)濾后，于液相色譜分析定量；蜜餞、糕點(diǎn)、醬菜類等固體樣品， 則需加氫氧化鈉溶液使樣品處理液呈堿性，輔以超聲提取，使各組分以鹽形式更好溶于處理液中，如樣品富含脂肪、蛋白質(zhì)，還需加入沉淀劑沉淀脂肪、蛋白質(zhì)，4000r/min離心5min，取上清液經(jīng)0.45μm的濾膜過(guò)濾后于液相色譜分析定量。

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜圖

在1.2色譜條件下AK、BA、SS、SA和DHA的保留時(shí)間分別是4.0、5.1、7.1、8.8、9.3 min，各組分都與基線分離，與共存的其他物質(zhì)分離良好，其混合標(biāo)準(zhǔn)溶液、陽(yáng)性樣品制備液及樣品加標(biāo)制備液色譜圖見(jiàn)圖1-3。

圖1 20μg/ml AK、BA、SS、SA和DHA混標(biāo)溶液色譜圖

圖2 AK、BA、SS、SA和DHA樣品本底制備液色譜圖

圖3 AK、BA、SS、SA和DHA樣品加標(biāo)制備液色譜圖

2.2 檢測(cè)方法的準(zhǔn)確度和精密度

用飲料和糕點(diǎn)做樣品，分別加入 1000μg/mL 標(biāo)準(zhǔn)溶液 1mL 進(jìn)樣品中定容 50mL，相當(dāng)于加入了20μg/ mL 標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行回收率試驗(yàn)， 加標(biāo)回收結(jié)果顯示，安賽蜜回收率為 96.2%～99.8%；苯甲酸回收率為95.4%～101.2%；山梨酸回收率為98.7%～103.3%；糖精鈉回收率為95.8%～99.6%；脫氫乙酸回收率為96.1%～100.9%。結(jié)果準(zhǔn)確可靠，重現(xiàn)性良好。結(jié)果見(jiàn)表 1。

表1 樣品的加標(biāo)回收

3 結(jié)論

綜上所述，此方法中安賽蜜、苯甲酸(鈉)、山梨酸(鉀)、糖精鈉和脫氫乙酸(鈉)色譜分離效果良好，可同時(shí)測(cè)定，符合色譜分析的要求，分析方法是可靠的。

不但具有操作快速、簡(jiǎn)便、精密度、準(zhǔn)確度好等優(yōu)點(diǎn)，而且對(duì)提高工作效率，節(jié)約實(shí)驗(yàn)耗材，更好地適應(yīng)食品中多組分同時(shí)檢測(cè)的需求和發(fā)展趨勢(shì)有著積極的作用。

[1] GB/T 23495-2009《食品中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的測(cè)定高效液相色譜法》[S]

[2] GB/T 23377-2009《食品中脫氫乙酸的測(cè)定高效液相色譜法》[S]．

[3] 楊徐康,郭小敏. 反向高效液相色譜法測(cè)定食品中的安賽蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精鈉[J].江西化工,2008,(11):138-139.

喻俊磊，1986年，江西南昌人，助理工程師，江西省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢測(cè)院，聯(lián)系電話：18079171488