段家翔綜述，甯交琳，魯開智審校

0 引 言

核因子E2相關(guān)因子2(nuclear factor-E2-related factor 2，Nrf2)屬于C'n'C轉(zhuǎn)錄因子家族，在各種組織細(xì)胞中廣泛表達(dá)，是細(xì)胞調(diào)節(jié)抗氧化應(yīng)激反應(yīng)的重要轉(zhuǎn)錄因子。主要通過與抗氧化順勢作用元件(anti-oxidative response element，ARE)結(jié)合以調(diào)控ARE控制基因的表達(dá)。ARE控制基因包括抗氧化酶基因、Ⅱ相解毒酶基因、應(yīng)激基因等［1］。

Nrf2的缺失會導(dǎo)致氧化應(yīng)激條件下ARE控制基因表達(dá)的減少，增加細(xì)胞對氧化應(yīng)激的敏感性。同時，值得注意的是Nrf2在細(xì)胞核內(nèi)的過度激活也會造成有害的影響，如缺陷細(xì)胞的持續(xù)存活、腫瘤形成、耐藥性的產(chǎn)生等［2］。因此，適時終止Nrf2在核內(nèi)的轉(zhuǎn)錄活性是避免上述有害影響的根本途徑，而出核轉(zhuǎn)運正是Nrf2轉(zhuǎn)錄調(diào)控活性消失的過程。

1 Nrf2 的分子結(jié)構(gòu)及轉(zhuǎn)錄機(jī)制

Nrf2是C'n'C家族中的一個具有堿性亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu)(basic leucine zipper，bZip)的轉(zhuǎn)錄因子［3］，含有6個高度保守的環(huán)氧氯丙烷相關(guān)蛋白同源結(jié)構(gòu)域(Nrf2-epichlorohydrin homology，Neh)［3-5］，分別為:①Neh1區(qū)，含有功能性核定位信號(nuclear localization signal，NLS)和富含亮氨酸的核輸出信號(nuclear export signal，NES)，參與調(diào)控Nrf2的核轉(zhuǎn)位和降解;②Neh2區(qū)，與細(xì)胞質(zhì)蛋白Keap1的Kelch區(qū)相結(jié)合;③Neh3區(qū)，是活化轉(zhuǎn)錄所必需的;④Neh4區(qū)和Neh5區(qū)，兩者協(xié)同激活環(huán)磷酸腺苷反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(cyclic AMP response element-binding protein，CREB)結(jié)合蛋白;⑤Neh6區(qū)，與Nrf2氧化-還原非依賴的負(fù)性調(diào)節(jié)有關(guān)。

在基礎(chǔ)條件下，大部分Nrf2與其特異性抑制劑Kelch樣環(huán)氧氯丙烷相關(guān)蛋白-1(Kelch-like epichlorohydrin-associated protein1，Keap1)相偶聯(lián)，在細(xì)胞質(zhì)中通過泛素介導(dǎo)的蛋白降解系統(tǒng)維持Nrf2的基礎(chǔ)水平;另一部分Nrf2以活性狀態(tài)存在于細(xì)胞核中介導(dǎo)下游基因的基本轉(zhuǎn)錄。當(dāng)受到親電子物質(zhì)或氧化劑作用時，Nrf2與Keap1解偶聯(lián)進(jìn)而轉(zhuǎn)移入核，再與其專性伴侶——肌腱膜纖維肉瘤蛋白(musculoaponeuroticfibrosarcoma protein，Maf)結(jié)合成異二聚體，然后識別并結(jié)合ARE，啟動Ⅱ相解毒酶等多種不同類型基因的轉(zhuǎn)錄［4］。在抗氧化反應(yīng)的后期，Nrf2與Maf和ARE序列解離并轉(zhuǎn)運出細(xì)胞核，在細(xì)胞質(zhì)通過Cullin3依賴的E3泛素連接酶(E3 ubiquitin ligase)機(jī)制進(jìn)行泛素化后降解，使細(xì)胞內(nèi)總的Nrf2活性回到基礎(chǔ)水平［6］。

2 Nrf2 的出核轉(zhuǎn)運機(jī)制

既往對Nrf2的研究主要集中在Nrf2如何與Keap1解離，進(jìn)而轉(zhuǎn)入細(xì)胞核發(fā)揮轉(zhuǎn)錄活性，以及Nrf2誘導(dǎo)何種下游基因的表達(dá)等方面。近年來，由于認(rèn)識到Nrf2在核內(nèi)的過度累積會造成不利影響，于是對Nrf2在核內(nèi)誘導(dǎo)抗氧化應(yīng)激基因表達(dá)后終止其轉(zhuǎn)錄活性并轉(zhuǎn)運出核降解的機(jī)制進(jìn)行深入研究。目前，關(guān)于Nrf2的出核轉(zhuǎn)運機(jī)制主要有2種研究結(jié)論:①位于Nrf2上的核輸出信號(nuclear export signal，NES)介導(dǎo)的Nrf2出核轉(zhuǎn)運;②Keap1介導(dǎo)的Nrf2出核轉(zhuǎn)運。

2.1 Nrf2 NES介導(dǎo)的出核轉(zhuǎn)運機(jī)制 Abhinav等［7］提出，Nrf2的出核轉(zhuǎn)運是由位于Nrf2上的NES所介導(dǎo)。目前發(fā)現(xiàn)Nrf2上存在2個NES結(jié)構(gòu)，一個NES位于Zip二聚體化結(jié)構(gòu)域(537L-K-K-Q-L-ST-LY-L546)，稱為 NESzip［7-8］。它具有典型的富含亮氨酸的NES特征，即Φ1XXXΦ2XXΦ3XΦ4，其中4個Φ的位置必須是疏水性氨基酸殘基如亮氨酸、異亮氨酸、纈氨酸、蛋氨酸和苯丙氨酸，X可以是任何氨基酸［9-10］。另一個 NES位于 Neh5反式激活區(qū)域(175L-L-S-I-P-E-L-Q-C-L-N-I186)，稱為 NESTA，TA(transactivation domain)是 Nrf2同 ARE/DNA結(jié)合的結(jié)構(gòu)域［11-12］。

NES在Nrf2出核轉(zhuǎn)運中具有重要作用，且Nrf2的NES與Zip結(jié)構(gòu)域存在重疊現(xiàn)象［8］。因此在氧化應(yīng)激的條件下，Nrf2從 Keap1-Nrf2復(fù)合體上解離，由細(xì)胞質(zhì)轉(zhuǎn)入細(xì)胞核。細(xì)胞核中的Maf蛋白識別并結(jié)合Nrf2上的Zip結(jié)構(gòu)域，同時遮蓋了NESzip。緊接著Nrf2-Maf異二聚體與ARE結(jié)合，又遮蓋了NESTA。2個 NES結(jié)構(gòu)域的遮蓋使出核轉(zhuǎn)運體CRM1不能與 Nrf2結(jié)合，從而無法介導(dǎo)其出核［12-13］。當(dāng)Nrf2轉(zhuǎn)錄激活 ARE基因的功能完成后，與ARE和Maf分離，2個NES結(jié)構(gòu)域又重新暴露，被CRM1識別并結(jié)合后轉(zhuǎn)運出核［7］。在Nrf2抗氧化應(yīng)激反應(yīng)的過程中，如果NES結(jié)構(gòu)域缺失或使用CRM1特異性抑制劑leptomycin B阻斷CRM1與NES的結(jié)合，則Nrf2不能被轉(zhuǎn)運出核［7］。

另外，研究發(fā)現(xiàn)Src家族的亞族成員Fyn，Src，Yes和 Fgr激酶可催化 Nrf2第568位酪氨酸(Try568)發(fā)生磷酸化修飾，該修飾在Nrf2出核轉(zhuǎn)運中也發(fā)揮重要作用，即磷酸化的Try568可使Nrf2與CRM1結(jié)合而被轉(zhuǎn)運出核［14］。如果將第568位酪氨酸替換為丙氨酸，使該位點不能發(fā)生磷酸化修飾，Nrf2則不能被轉(zhuǎn)運出核。實驗已證實阻斷Fyn等激酶可明顯減少Nrf2出核轉(zhuǎn)運。然而Try568磷酸化修飾后通過何種機(jī)制將Nrf2轉(zhuǎn)運出核，目前尚不清楚［14-17］。

2.2 Keap1介導(dǎo)的Nrf2出核轉(zhuǎn)運機(jī)制 Velichkova等［18］通過Keap1的蛋白序列分析發(fā)現(xiàn)Keap1上有潛在的NES結(jié)構(gòu)域(第272到322位氨基酸)，該區(qū)域是核轉(zhuǎn)運蛋白CRM1所包繞的部位。由此提出另一種Nrf2的出核轉(zhuǎn)運機(jī)制，即由Keap1介導(dǎo)的Nrf2出核轉(zhuǎn)運。進(jìn)一步研究表明［19］，CRM1結(jié)合的具體區(qū)域位于第272到315位氨基酸之間，并且被疏水氨基酸所隔開。這些疏水氨基酸通常是亮氨酸或者異亮氨酸，表示為Lx(1-3)Lx(2-4)LxL。該NES位于Keap1的干預(yù)區(qū)，并在所有物種之間高度保守。在刪除NES后，Keap1不再大量轉(zhuǎn)移出核，也使Nrf2不再隨之出核，導(dǎo)致了Nrf2在細(xì)胞核內(nèi)的大量累積。因此，Keap1上的NES是維持Keap1和Nrf2存在于胞質(zhì)中的因素。

基于上述研究，Velichkova等［18］提出 Keap1 和Nrf2作為一個復(fù)合體而存在于細(xì)胞質(zhì)中。Nrf2有1個NLS結(jié)構(gòu)域，而Keap1有1個依賴CRM1介導(dǎo)出核的NES結(jié)構(gòu)域。在非氧化應(yīng)激條件下，NES的作用強(qiáng)于NLS，因此大部分 Keap1-Nrf2復(fù)合體由于CRM1介導(dǎo)的出核轉(zhuǎn)運而主要位于胞質(zhì)中，且經(jīng)過泛素化途徑介導(dǎo)而降解。同時，小部分的Nrf2從Keap1-Nrf2復(fù)合體中解離出來進(jìn)入細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄激活A(yù)RE基因，維持ARE基因在基礎(chǔ)條件下的表達(dá)水平。在氧化應(yīng)激條件下，Keap1介導(dǎo)的Nrf2泛素化及降解減弱，同時由于Nrf2的生成未受影響，于是Keap1上的Nrf2結(jié)合位點被迅速飽和，導(dǎo)致新生成的Nrf2不能繼續(xù)與Keap1結(jié)合而成為游離的Nrf2。游離的Nrf2在自身NLS的介導(dǎo)下進(jìn)入細(xì)胞核中，與Maf蛋白結(jié)合，繼而轉(zhuǎn)錄激活A(yù)RE基因［11］。當(dāng)Nrf2完成轉(zhuǎn)錄激活A(yù)RE基因后，細(xì)胞質(zhì)中的Keap1又進(jìn)入細(xì)胞核，使Nrf2從ARE和Maf的結(jié)合中分離，然后形成Keap1-Nrf2復(fù)合體。CRM1識別該復(fù)合體Keap1上的NES并與之結(jié)合，繼而將其轉(zhuǎn)運出核。在細(xì)胞質(zhì)中，Keap1-Nrf2復(fù)合體與E3泛素化連接酶結(jié)合使Nrf2降解，從而終止Nrf2信號通路。

盡管研究證實Nrf2上也含有2個NES結(jié)構(gòu)域，但是Sun等［11］提出只有Keap1上的NES才真正介導(dǎo)了Nrf2的出核轉(zhuǎn)運，證據(jù)如下:①Keap1上的NES導(dǎo)致了Keap1-Nrf2復(fù)合體在完成誘導(dǎo)后的出核轉(zhuǎn)運;②Keap1-Cul3-Rbx1E3泛素化連接酶復(fù)合體在胞質(zhì)中將Nrf2泛素化，證明Nrf2的降解發(fā)生在胞質(zhì)，因為泛素化和降解是偶聯(lián)反應(yīng);③Keap1-Nrf2復(fù)合體不能與ARE結(jié)合，提示Keap1在誘導(dǎo)完成后進(jìn)入細(xì)胞核的目的是為了使Nrf2從ARE上分離，以關(guān)閉抗氧化應(yīng)激反應(yīng);④Keap1可不依賴其他因子轉(zhuǎn)入細(xì)胞核，意味著Keap1可能有1個非典型的NLS序列，此序列受細(xì)胞質(zhì)氧化還原狀態(tài)的調(diào)控;⑤在誘導(dǎo)完成后，Keap1攜 Nrf2轉(zhuǎn)運出核對抑制Nrf2的活性具有關(guān)鍵作用。Keap1轉(zhuǎn)運通路的破壞將延長Nrf2介導(dǎo)的抗氧化應(yīng)激反應(yīng)后恢復(fù)正常氧化還原狀態(tài)的時間。

此外，Kaspar等［20］還提出了另一種Keap1介導(dǎo)的Nrf2出核轉(zhuǎn)運機(jī)制:Keap1與Cul3和Rbx1形成Keap1-Cul3-Rbx1復(fù)合體進(jìn)而介導(dǎo)Nrf2轉(zhuǎn)運出核。與Sun等［11］提出的出核轉(zhuǎn)運機(jī)制的不同之處在于:在氧化應(yīng)激時，當(dāng)Nrf2完成激活細(xì)胞保護(hù)基因后，Keap1-Cul3-Rbx1作為一個復(fù)合體而不是Keap1單獨進(jìn)入細(xì)胞核結(jié)合Nrf2，形成Keap1-Cul3-Rbx1-Nrf2復(fù)合體。隨后該復(fù)合體中的Keap1第85位酪氨酸發(fā)生磷酸化修飾，導(dǎo)致 Keap1上的 NES暴露，被CRM1識別并結(jié)合，繼而將Keap1-Cul3-Rbx1-Nrf2復(fù)合體轉(zhuǎn)運出核降解。

3 Nrf2 出核轉(zhuǎn)運的意義

Nrf2通過與ARE基因結(jié)合，可啟動多種基因的表達(dá)，在抗腫瘤、抗凋亡、抗炎癥反應(yīng)、抗動脈粥樣硬化、神經(jīng)保護(hù)等方面發(fā)揮著廣泛的細(xì)胞保護(hù)功能。然而，隨著近年來研究的深入，發(fā)現(xiàn)Nrf2在細(xì)胞核內(nèi)的過度激活和堆積同樣會造成細(xì)胞的損害，因此要求Nrf2在完成基因激活后能夠快速降解。雖然目前關(guān)于Nrf2出核轉(zhuǎn)運機(jī)制存在不同的研究結(jié)論，但普遍認(rèn)同是無論通過哪種機(jī)制，出核轉(zhuǎn)運都是Nrf2在胞質(zhì)中快速降解的前提［7］。換言之，出核轉(zhuǎn)運對于避免Nrf2在細(xì)胞內(nèi)過度激活導(dǎo)致細(xì)胞損傷具有重要的意義。

3.1 維持對氧化應(yīng)激反應(yīng)的正常應(yīng)答 正常情況下，Nrf2轉(zhuǎn)換率非常快，測試結(jié)果顯示其半衰期只有15 min。說明在完成轉(zhuǎn)錄激活功能后，Nrf2即被轉(zhuǎn)運到細(xì)胞質(zhì)迅速降解［21-22］。因此，Nrf2信號通路能夠隨著細(xì)胞氧化還原狀態(tài)的改變而快速啟閉，從而維持細(xì)胞對氧化應(yīng)激反應(yīng)的正常應(yīng)答。Nrf2的過度激活和長時間的抗氧化應(yīng)激反應(yīng)會導(dǎo)致細(xì)胞對氧化應(yīng)激無應(yīng)答，最終造成機(jī)體不可逆的損害。

3.2 防止耐藥性的產(chǎn)生 由于Nrf2誘導(dǎo)解毒酶和抗氧化酶的性質(zhì)，使其在耐藥性的產(chǎn)生中扮演了重要角色［23-30］。持續(xù)過度表達(dá)Nrf2導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞對化療藥物如順鉑、阿霉素、依托泊苷產(chǎn)生耐藥性。而在很多癌癥的治療過程中，耐藥性的產(chǎn)生是阻礙治療效果的關(guān)鍵因素，如神經(jīng)母細(xì)胞瘤、乳腺癌和肺癌。Nrf2在這些腫瘤中的上調(diào)增加了細(xì)胞對化療藥物的抵抗，而下調(diào)則可增加細(xì)胞對化療藥物的敏感性。如果在化療藥物的使用過程中輔以Nrf2的抑制劑可使腫瘤細(xì)胞最大程度死亡。因此，推測在使用化療藥物治療不同組織來源的腫瘤時，Nrf2抑制劑可增強(qiáng)療效。然而，在使用化療藥物治療的患者中，同時服用Nrf2的特異性抑制劑對療效有何種影響還有待動物和臨床實驗的驗證［26］。另外值得注意的是，對于Nrf2誘導(dǎo)耐藥性產(chǎn)生機(jī)制的研究還處于初級階段，Nrf2調(diào)控下游基因表達(dá)導(dǎo)致耐藥性產(chǎn)生的路徑的研究較局限，抑制 Nrf2或激活/誘導(dǎo)Keap1的表達(dá)是否能夠逆轉(zhuǎn)耐藥性尚不明確。

3.3 防止腫瘤形成 研究發(fā)現(xiàn)Nrf2-Keap1信號通路在很多肺癌癌組織和肺癌細(xì)胞株中都被削弱了［27-28］。推測這種削弱使Nrf2水平升高，繼而轉(zhuǎn)入細(xì)胞核增加其下游基因的表達(dá)，導(dǎo)致依賴Nrf2的防御性反應(yīng)在這些癌組織和細(xì)胞株中被完全激活。這樣，腫瘤細(xì)胞通過消除Keap1介導(dǎo)的對Nrf2的負(fù)性調(diào)控從而使自己獲得有利生長的條件。Donnie等［31］從頭頸部鱗狀細(xì)胞癌的91.5%腫瘤組織中都發(fā)現(xiàn)Nrf2的過度表達(dá)有力地證明了上述假設(shè)。此外，基因突變也會發(fā)生在Nrf2的編碼區(qū)，尤其是有吸煙史的癌癥患者或鱗狀細(xì)胞癌的患者［32］。這些突變破壞了Nrf2與Keap1的連接，使Nrf2表達(dá)失調(diào)進(jìn)而導(dǎo)致了細(xì)胞中Nrf2強(qiáng)烈而持久的激活。這不僅給癌細(xì)胞的生存創(chuàng)造了有利條件，而且使癌細(xì)胞對抗癌藥物產(chǎn)生抵抗作用，最終導(dǎo)致腫瘤的形成。

3.4 其他 敲除Keap1的小鼠發(fā)生后天性死亡，可能是由于食管和胃賁門處過度角化而導(dǎo)致的營養(yǎng)失調(diào)。推測這種情況可能是由于細(xì)胞核Nrf2的堆積，因為Nrf2的活性影響某些鱗狀上皮基因的表達(dá)水平［33］。

4 結(jié) 語

Nrf2是內(nèi)源性抗損傷系統(tǒng)的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子，Nrf2在細(xì)胞核內(nèi)完成轉(zhuǎn)錄激活功能后及時轉(zhuǎn)運出核降解與Nrf2在氧化應(yīng)激條件下的激活同樣重要。因此，越來越多的研究開始將方向轉(zhuǎn)向?qū)rf2的負(fù)性調(diào)控機(jī)制上。然而到目前為止，研究還存在很多不足之處。不同的研究團(tuán)隊提出了不同的Nrf2出核轉(zhuǎn)運機(jī)制，其主要分歧點在于Nrf2是通過自身的NES介導(dǎo)轉(zhuǎn)運出核還是通過Keap1介導(dǎo)轉(zhuǎn)運出核。但是無論研究結(jié)果傾向于何種機(jī)制，其研究數(shù)據(jù)都不能完全否認(rèn)其他出核轉(zhuǎn)運機(jī)制的存在，因此推測可能同時存在多種轉(zhuǎn)運機(jī)制調(diào)控Nrf2的出核轉(zhuǎn)運。但何種轉(zhuǎn)運機(jī)制占主導(dǎo)地位或何時占主導(dǎo)地位目前尚不明確。此外，雖然各種出核轉(zhuǎn)運機(jī)制最終的生理意義相同，但是不同的機(jī)制將會導(dǎo)致實驗或臨床干預(yù)的靶點不同，所以進(jìn)一步研究明確其具體機(jī)制具有重要意義。

［1］ Lau A，Whitman SA，Jaramillo MC，et al.Arsenic-mediated activation of the Nrf2-Keap1 antioxidant pathway［J］.J Biochem Mol Toxicol，2013，27(2):99-105.

［2］ Niture SK，Jaiswal AK.Nrf2 protein up-regulates antiapoptotic protein Bcl-2 and prevents cellular apoptosis［J］.J Biol Chem，2012，287(13):9873-9886.

［3］ Zheng H，Whitman SA，Wu W，et al.Therapeutic potential of Nrf2 activators in streptozotocin-induced diabetic nephropathy［J］.Diabetes，2011，60(11):3055-3066.

［4］ Yoo NJ，Kim HR，Kim YR，et al.Somatic mutations of the KEAP1 gene in common solid cancers［J］.Histopathology，2012，60(6):943-952.

［5］ Bryan HK，Olayanju A，Goldring CE，et al.The Nrf2 cell defence pathway:Keap1-dependent and-independent mechanisms of regulation［J］.Biochem Pharmacol，2013，85(6):705-717.

［6］ 林曉萍，李 雯，沈華浩.抗氧化應(yīng)激轉(zhuǎn)錄因子-Nrf2的研究進(jìn)展［J］.中國病理生理雜志，2011，27(6):1234-1239.

［7］ Jain AK，Bloom DA，Jaiswal AK.Nuclear import and export signals in control of Nrf2［J］.J Biol Chem，2005，280(32):29158-29168.

［8］ Li W，Jain MR，Chen C，et al.Nrf2 possesses a redox-insensitive nuclear export signal overlapping with the leucine zipper motif［J］.J Biol Chem，2005，280(31):28430-28438.

［9］ Gomez Corredor A，Archambault D.The bovine immunodeficiency virus Rev protein:identification of a novel nuclear import pathway and nuclear export signal among retroviral Rev/Rev-like proteins［J］.J Virol，2012，86(9):4892-4905.

［10］ Xu D，Grishin NV，Chook YM.NESdb:a database of NES-containing CRM1 cargoes［J］.Mol Biol Cell，2012，23(18):3673-3676.

［11］ Sun Z，Zhang S，Chan JY，et al.Keap1 controls postinduction repression of the nrf2-mediated antioxidant response by escorting nuclear export of nrf2［J］.Mol Cell Biol，2007，27(18):6334-6349.

［12］ Li W，Yu SW，Kong AN.Nrf2 possesses a redox-sensitive nuclear exporting signal in the Neh5 transactivation domain［J］.J Biol Chem，2006，281(37):27251-27263.

［13］ Li W，Yu S，Liu T，et al.Heterodimerization with small Maf proteins enhances nuclear retention of Nrf2 via masking the NESzip motif［J］.Biochim Biophys Acta，2008，1783(10):1847-1856.

［14］ Jain AK，Jaiswal AK.Phosphorylation of tyrosine 568 controls nuclear export of Nrf2［J］.J Biol Chem，2006，281(17):12132-12142.

［15］ Kaspar JW，Jaiswal AK.Tyrosine phosphorylation controls nuclear export of Fyn，allowing Nrf2 activation of cytoprotective gene expression［J］.FASEB J，2011，25(3):1076-1087.

［16］ Vomhof-Dekrey EE，Picklo MJ Sr.The Nrf2-antioxidant response element pathway:a target for regulating energy metabolism［J］.J Nutr Biochem，2012，23(10):1201-1206.

［17］ Niture SK，Jain AK，Shelton PM，et al.Src subfamily kinases regulate nuclear export and degradation of transcription factor Nrf2 to Switch off Nrf2-mediated antioxidant activation of cytoprotective gene expression［J］.J Biol Chem，2011，286(33):28821-28832.

［18］ Velichkova M，Hasson T.Keap1 regulates the oxidation-sensitive shuttling of Nrf2 into and out of the nucleus via a Crm1-dependent nuclear export mechanism［J］.Mol Cell Biol，2005，25(11):4501-4513.

［19］ Fabbro M，Henderson BR.Regulation of tumor suppressors by nuclear-cytoplasmic shuttling［J］.Exp Cell Res，2003，282(2):59-69.

［20］ Kaspar JW，Niture SK，Jaiswal AK.Antioxidant-induced INrf2(Keap1)tyrosine 85 phosphorylation controls the nuclear export and degradation of the INrf2-Cul3-Rbx1 complex to allow normal Nrf2 activation and repression［J］.J Cell Sci，2012，125(Pt 4):1027-1038.

［21］ Kumar H，Koppula S，Kim IS，et al.Nuclear factor erythroid 2-related factor 2 signaling in Parkinson disease:a promising multi therapeutic target against oxidative stress，neuroinflammation and cell death［J］.CNS Neurol Disord Drug Targets，2012，11(8):1015-1029.

［22］ Wu KC，Liu JJ，Klaassen CD.Nrf2 activation prevents cadmium-induced acute liver injury［J］.Toxicol Appl Pharmacol，2012，263(1):14-20.

［23］ Shelton P，Jaiswal AK.The transcription factor NF-E2-related factor 2(Nrf2):a protooncogene?［J］ FASEB J，2013，27(2):414-423.

［24］ Merchant AA，Singh A，Matsui W，et al.The redox-sensitive transcription factor Nrf2 regulates murine hematopoietic stem cell survival independently of ROS levels［J］.Blood，2011，118(25):6572-6579.

［25］ Mitsuishi Y，Taguchi K，Kawatani Y，et al.Nrf2 redirects glucose and glutamine into anabolic pathways in metabolic reprogramming［J］.Cancer Cell，2012，22(1):66-79.

［26］ Slocum SL，Kensler TW.Nrf2:control of sensitivity to carcinogens［J］.Arch Toxicol，2011，85(4):273-284.

［27］ Tang X，Wang H，F(xiàn)an L，et al.Luteolin inhibits Nrf2 leading to negative regulation of the Nrf2/ARE pathway and sensitization of human lung carcinoma A549 cells to therapeutic drugs［J］.Free Radic Biol Med，2011，50(11):1599-1609.

［28］ Hayes JD，Ashford ML.Nrf2 orchestrates fuel partitioning for cell proliferation［J］.Cell Metab，2012，16(2):139-141.

［29］ 唐 勇，王漢東.核因子E2相關(guān)因子2在腫瘤發(fā)生機(jī)制中的作用研究進(jìn)展［J］.醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報，2013，26(2):195-197.

［30］ 潘 灝，王漢東.Nrf2對腫瘤的雙重作用［J］.醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報，2012，25(5):549-551.

［31］ Stacy DR，Ely K，Massion PP，et al.Increased expression of nuclear factor E2 p45-related factor 2(NRF2)in head and neck squamous cell carcinomas［J］.Head Neck，2006，28(9):813-818.

［32］ Sasaki H，Suzuki A，Shitara M，et al.Genotype analysis of the NRF2 gene mutation in lung cancer［J］.Int J Mol Med，2013，31(5):1135-1138.

［33］ Sporn MB，Liby KT.NRF2 and cancer:the good，the bad and the importance of context［J］.Nat Rev Cancer，2012，12(8):564-571.