黨裔武，張秀玲，陸會平，陳 罡

(廣西醫(yī)科大學(xué) 第一附屬醫(yī)院病理科，廣西 南寧 530021)

病理專業(yè)本科生免疫組化教學(xué)探索與體會

黨裔武，張秀玲，陸會平，陳 罡

(廣西醫(yī)科大學(xué) 第一附屬醫(yī)院病理科，廣西 南寧 530021)

免疫組織化學(xué)技術(shù)廣泛應(yīng)用于臨床病理診斷工作中，病理專業(yè)本科教學(xué)應(yīng)常規(guī)開設(shè)免疫組化課程。本文結(jié)合我院實際情況，對病理專業(yè)本科生免疫組化課程教學(xué)方法進行探索。

病理學(xué)；免疫組化；教學(xué)

病理學(xué)是基礎(chǔ)學(xué)科與臨床學(xué)科之間的橋梁學(xué)科，病理科在臨床工作中發(fā)揮著舉足輕重的作用。醫(yī)院病理診斷水平的高低直接影響到醫(yī)院的整體水平。臨床病理水平甚至作為衡量地區(qū)和國家醫(yī)療質(zhì)量的重要標(biāo)志。近年來病理學(xué)的相關(guān)技術(shù)發(fā)展迅速，如免疫組織化學(xué)和分子病理技術(shù)等。免疫組織化學(xué)是以免疫學(xué)的抗原抗體反應(yīng)為理論基礎(chǔ)，是組織化學(xué)的分支。它是用標(biāo)記的特異性抗體(或抗原)對組織內(nèi)抗原(或抗體)的分布進行組織和細(xì)胞原位檢測技術(shù)。免疫組織化學(xué)在臨床病理診斷中的作用也日益突顯。目前我國病理專業(yè)人才匱乏問題十分嚴(yán)重[1]，而每年病理診斷量卻逐年增加，更加突顯我國病理工作的現(xiàn)況。我校為了適應(yīng)社會需求和培養(yǎng)高素質(zhì)的病理專業(yè)型人才，特開設(shè)了本科臨床病理專業(yè)。免疫組織化學(xué)技術(shù)已在臨床病理診斷上廣泛應(yīng)用，作為病理專業(yè)的學(xué)生也應(yīng)熟悉和掌握這門技術(shù)，因此，特為臨床病理專業(yè)的學(xué)生開設(shè)了免疫組織化學(xué)技術(shù)課程?，F(xiàn)將該課程教學(xué)的探討及體會報道如下。

1 開設(shè)免疫組化技術(shù)課程的重要性

長期以來，病理教學(xué)中存在重知識傳授，輕能力培養(yǎng)的傾向。學(xué)生大都是被動式學(xué)習(xí)，主觀能動性沒有得到發(fā)揮。這也大大降低了學(xué)生對病理學(xué)習(xí)的興趣。免疫組織化學(xué)技術(shù)在臨床病理診斷中應(yīng)用廣泛，同時，也是一項影響因素眾多的實驗技術(shù)。病理醫(yī)生只有了解這項專業(yè)技術(shù)，才能更好地觀察和分析免疫組化的結(jié)果及理解其在病理診斷中的應(yīng)用價值。所以，作為病理專業(yè)的學(xué)生更應(yīng)該了解免疫組化技術(shù)的操作規(guī)范，具體到每一種抗體和每一步實驗操作，為以后在臨床工作中正確判讀和診斷打下堅實的基礎(chǔ)。目前我國高等院校中僅有少數(shù)院校開設(shè)病理專業(yè)，而為病理專業(yè)學(xué)生開設(shè)免疫組織化學(xué)技術(shù)課程的院校就更加少。因此，為了提高病理專業(yè)學(xué)生專業(yè)教學(xué)效果，特開設(shè)了免疫組織化學(xué)技術(shù)課程。

2 實施過程

該課程分為理論教學(xué)和實驗教學(xué)兩部分。第一步：免疫組織化學(xué)技術(shù)的理論課程由具有臨床經(jīng)驗的高年資病理醫(yī)生進行講授，主要給學(xué)生介紹概念、基本原理及其在臨床病理診斷中的應(yīng)用。老師還列舉臨床實例，引導(dǎo)學(xué)生學(xué)習(xí)，為下一步的實驗教學(xué)學(xué)習(xí)和操作打下扎實的理論基礎(chǔ)。第二步：免疫組織化學(xué)技術(shù)的實驗教學(xué)由在臨床工作多年的免疫組織化學(xué)技術(shù)師及低年資病理醫(yī)生擔(dān)任。免疫組織化學(xué)技術(shù)重在實驗操作，故本文側(cè)重介紹我科實施該課程的實驗教學(xué)方法與體會。我科充分利用形態(tài)學(xué)實驗室和附屬醫(yī)院的病理科等教學(xué)條件，采用臨床病理科和學(xué)校病理教研室聯(lián)合教學(xué)模式，具體措施如下：在免疫組織化學(xué)技術(shù)課程開始前，安排數(shù)次醫(yī)院病理科見習(xí)，主要參觀整個病理技術(shù)的操作過程，包括固定、取材、脫水、包埋、切片、染色和封片等一系列常規(guī)HE染色制片過程，讓學(xué)生了解和認(rèn)識病理技術(shù)操作過程，為下一步免疫組織化學(xué)實驗打下基礎(chǔ)。并要求學(xué)生預(yù)習(xí)教研室編寫的免疫組織化學(xué)實驗指導(dǎo)。實習(xí)課前，教師再引導(dǎo)學(xué)生溫習(xí)免疫組織化學(xué)的概念、基本原理以及在臨床工作和科學(xué)研究中的應(yīng)用前景等知識。學(xué)生分小組進行操作，并由多位老師及研究生輔導(dǎo)。對免疫組織化學(xué)染色，采取先由老師邊操作邊講解，讓學(xué)生明白其中每一個步驟及原理，強調(diào)每個步驟應(yīng)該關(guān)注的細(xì)節(jié)以及可能產(chǎn)生的不良染色效果，最后要求學(xué)生獨立操作，研究生輔導(dǎo)。實驗完成后，利用形態(tài)學(xué)實驗室的顯微數(shù)碼互動系統(tǒng)，教師和學(xué)生共同討論制片效果，揭示存在的問題以及分析原因，最終得出結(jié)論。學(xué)生在課后根據(jù)自己操作過程，完成實驗報告。教師進行批改打分，并記錄平時成績。

3 教學(xué)效果和體會

通過開設(shè)免疫組織化學(xué)課程，一方面能使臨床病理專業(yè)學(xué)生有機會提前進入醫(yī)院病理科見習(xí)，了解病理技術(shù)操作流程；另一方面認(rèn)知免疫組織化學(xué)在常規(guī)病理輔助診斷中的重要意義，為免疫組織化學(xué)實驗打下基礎(chǔ)。學(xué)生自己獨立完成免疫組織化學(xué)的染色過程，不僅提高了學(xué)生的動手能力，也培養(yǎng)了學(xué)生嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)態(tài)度。對一些難以用HE染色切片鑒別的腫瘤，采用HE染色并結(jié)合免疫組織化學(xué)染色，可以更好地幫助學(xué)生深入學(xué)習(xí)臨床診斷病理學(xué)，并加深學(xué)生對疾病，特別是各種腫瘤的認(rèn)識。例如，臨床上出現(xiàn)的小細(xì)胞未分化癌與惡性淋巴瘤[2]，二者都是惡性腫瘤，在常規(guī)的HE染色下鑒別困難。在給學(xué)生介紹這兩種腫瘤的時候，加入兩張免疫組織化學(xué)的染色切片(LCA 和CK)。兩者的免疫組織化學(xué)陽性表達(dá)差異很大。小細(xì)胞未分化癌染色結(jié)果：LCA陰性表達(dá)和CK陽性表達(dá)；而惡性淋巴瘤為LCA陽性表達(dá)和CK陰性表達(dá)。兩者的表達(dá)模式也不同，LCA為棕黃色顆粒包繞整個細(xì)胞，而CK為棕黃色顆粒分布于胞質(zhì)中。鑒于上述特點，可以幫助學(xué)生很好地鑒別這兩種腫瘤，并加深他們對疾病的認(rèn)識。給學(xué)生講解腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移等生物學(xué)行為時，加做免疫組織化學(xué)的標(biāo)記，如p53、Ki67和CD34等[3]，這些都是體現(xiàn)腫瘤惡性程度的免疫組織化學(xué)指標(biāo)，可讓學(xué)生更好地理解腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移等生物學(xué)行為，幫助學(xué)生更好地掌握腫瘤的病理學(xué)知識。免疫組織化學(xué)除了能夠為常規(guī)病理診斷提供鑒別診斷以外，同時部分免疫組織化學(xué)標(biāo)記物還是臨床藥物的作用靶標(biāo)，對其檢測能夠指導(dǎo)臨床治療。比如乳腺癌和胃癌中HER-2蛋白的免疫組織化學(xué)檢測能夠給臨床提供靶向藥物治療的依據(jù)，而乳腺癌中ER，PR的免疫組織化學(xué)檢測對患者激素治療效果有明顯的指導(dǎo)意義。病理診斷是疾病診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”，此外，病理實驗也是科研的重要組成部分。而免疫組織化學(xué)作為病理診斷常規(guī)技術(shù)，在科研工作中亦為一種常用的技術(shù)手段。通過學(xué)習(xí)免疫組織化學(xué)技術(shù)，不僅讓學(xué)生深刻理解免疫組織化學(xué)在病理學(xué)中的應(yīng)用，也培養(yǎng)了學(xué)生的科研操作能力，科研意識，為他們?nèi)蘸蠹尤肟蒲嘘犖榈於▓詫嵉幕A(chǔ)。更重要的是，通過學(xué)生親自完成免疫組織化學(xué)染色過程，不僅增加學(xué)生對病理學(xué)學(xué)習(xí)的興趣，還充分地調(diào)動學(xué)生的積極性和發(fā)揮其主觀能動性，從而大大提高病理實驗教學(xué)效果。部分院校已在病理實驗教學(xué)中開設(shè)免疫組織化學(xué)課程，也取得較好的教學(xué)效果[2,4,5]。

綜上，臨床病理學(xué)在病理學(xué)專業(yè)人才培養(yǎng)中具有重要地位[6]，免疫組織化學(xué)課程的開設(shè)，不僅能提高學(xué)生動手能力，激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)病理學(xué)興趣，還充分調(diào)動學(xué)生的積極性和主動性。同時，開拓學(xué)生視野，讓學(xué)生提前接觸醫(yī)學(xué)科研內(nèi)容，為以后成為全面發(fā)展的病理人才奠定基礎(chǔ)。

[1]胡 睿.臨床診斷“金標(biāo)準(zhǔn)”人才告急[J].醫(yī)藥經(jīng)濟報(學(xué)科建設(shè))，2013,5:1-2.

[2]王炳海，方慶全，葉美華.免疫組織化學(xué)在病理學(xué)的應(yīng)用[J].齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2014,35(3):429.

[3]Vosmik M, Laco J, Sirak I,et al. Prognostic significance of human papillomavirus (HPV) status and expression of selected markers (HER2/neu, EGFR,VEGF, CD34, p63, p53 and Ki67/MIB-1) on outcome after (chemo-) radiotherapy in patients with squamous cell carcinoma of uterine cervix[J].Pathol Oncol Res，2014,20(1):131-137.

[4]興桂華，張翠香，榮 瑋，等.創(chuàng)新性教學(xué)模式在病理學(xué)技術(shù)實驗中的應(yīng)用[J].齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2007,28(23):2879-2880.

[5]高友晶，張 磊.在病理實驗教學(xué)中如何開設(shè)《病理實驗技術(shù)》課程[J].高教高職研究，2011,49:196.

[6]趙 亮.臨床病理專業(yè)研究生培養(yǎng)模式的實踐與探討[J].西北醫(yī)學(xué)教育，2014,22(3)：487-488,530.

(責(zé)任編輯：張群力)

ExplorationandExperienceonImmunohistochemistryTeachingofUndergraduatesMajoringinPathology

DANG Yi-wu, ZHANG Xiu-ling, LU Hui-ping, CHEN Gang

(Department of Pathology, the First Affiliated Hospital of Guangxi Medical University, Nanning 530021,China)

Immunohistochemistry (IHC) has been broadly applied in clinicopathological diagnosis. Courses of IHC should be given conventionally in the teaching of undergraduate students majoring in Pathology. The aim of the current article was to explore the teaching methods of IHC courses for undergraduate students majoring in Pathology with the practical situation of our affiliated hospital.

pathology; immunohistochemistry; teaching

2014-08-01

2014廣西學(xué)位與研究生教育改革和發(fā)展專項課題研究項目(JGY2014020)；廣西醫(yī)科大學(xué)教育教學(xué)改革2014年重點資助項目(2014XJGZ06, 2014XJGB24)

黨裔武(1982-)，男(漢族)，廣西北流人，主管技師，碩士，從事臨床病理技術(shù)、教學(xué)及科研工作。

陳 罡，男(瑤族)，廣西桂林人，教授，博士，碩導(dǎo)，從事臨床病理、分子病理、病理教學(xué)及科研工作。

G642.0

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：1006-2769(2014)06-1180-03