曾慧琳，符旭東（1.廣州軍區(qū)武漢總醫(yī)院藥劑科，武漢 430070；2.湖北中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院2012級(jí)研究生班，武漢 430065）

脂質(zhì)體（Liposomes）主要是由膽固醇和磷脂等組成的類似于生物膜雙分子層結(jié)構(gòu)封閉的微小囊泡，是一種新型的藥物載體[1]。按照脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu)可將其分為3 類：?jiǎn)问抑|(zhì)體（ULV）、多室脂質(zhì)體（MLV）和多囊脂質(zhì)體（MVL），其中前兩者為同心脂質(zhì)體，而MVL 則屬于非同心脂質(zhì)體[2]。MVL 是英國(guó)學(xué)者Kim S在1983年研制出的由非同心的類脂雙分子囊泡緊密堆積而成的聚集體，是一種傳遞藥物的新型脂質(zhì)體[3]。這種脂質(zhì)體裝載藥物后，注射進(jìn)入體內(nèi)形成藥物儲(chǔ)庫，產(chǎn)生良好的緩釋作用，這樣不僅可減少患者的用藥次數(shù)，還能提高治療的依從性，已成為眾多學(xué)者研究的熱點(diǎn)。本文以“多囊脂質(zhì)體”“multivesicular liposomes”等為關(guān)鍵詞，在中國(guó)知網(wǎng)、PubMed等數(shù)據(jù)庫中查閱1983－2013 年的相關(guān)文獻(xiàn)，結(jié)果共查詢到文獻(xiàn)609 篇，其中有效文獻(xiàn)20 篇，現(xiàn)對(duì)MVL 作為藥物載體在遞藥系統(tǒng)中的應(yīng)用研究進(jìn)行歸納與總結(jié)。

1 MVL的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)

MVL的內(nèi)部是由許多個(gè)多面體含水腔室以非同心圓的形式構(gòu)成的，各水性腔室之間又以類脂雙分子層磷脂膜相隔。中性脂質(zhì)雖然沒有成膜能力，但是填充于相鄰水性腔室交匯處的空間，穩(wěn)定連接，剩下的一部分中性脂質(zhì)則作為小油滴分散于第一水相中。MVL的內(nèi)部結(jié)構(gòu)類似于“泡沫狀的矩陣”，一般MVL的粒徑在1～100 μm之間，而MLV的結(jié)構(gòu)包含多個(gè)同心的腔室，類似于“洋蔥”，其粒徑在0.2～5 μm之間[4]。MVL與ULV、MLV的粒徑及結(jié)構(gòu)的區(qū)別見圖1。

圖1 MVL與ULV、MLV的粒徑及結(jié)構(gòu)的區(qū)別

由于MVL“泡沫狀”這一特殊結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，使其相對(duì)于普通脂質(zhì)體具有以下優(yōu)勢(shì)：（1）良好的長(zhǎng)效緩釋作用。MVL注射進(jìn)入人體后，隨著其中某一囊泡的破裂，活性物質(zhì)從破裂囊泡釋放而出，然而完整的囊泡仍可保持原狀。由于各個(gè)囊泡破裂的時(shí)間不同，可延長(zhǎng)藥物的釋放時(shí)間，達(dá)到緩釋效果，緩釋時(shí)間能持續(xù)數(shù)天甚至數(shù)周[5]。（2）包封率高、藥物滲漏率低。MVL內(nèi)部含有大量水相包封水溶性藥物，相比普通脂質(zhì)體穩(wěn)定性高、包封體積大、滲漏率低且包封率高，特別適用于包封水溶性小分子和蛋白質(zhì)、多肽類藥物[5]。（3）多種途徑給藥。相對(duì)于傳統(tǒng)脂質(zhì)體的血管內(nèi)給藥，MVL可通過多種途徑給藥，如皮下注射、鞘內(nèi)注射、肌肉注射、硬膜外注射、腹腔注射、晶狀體內(nèi)注射、關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射、眼內(nèi)注射等，可長(zhǎng)時(shí)間停留于注射部位并形成藥物儲(chǔ)庫[5]。

2 MVL的制備

2.1 MVL的制備工藝流程

目前，制備MVL 主要采用復(fù)乳法，也可稱為DepoFoam-TM法[2]。通常需要經(jīng)過以下5個(gè)步驟[6-7]：（1）先將脂質(zhì)成分溶解于易揮發(fā)的有機(jī)溶劑（通常為氯仿或氯仿與乙醚的混合液）形成油相，再以合適的油水體積比將含藥的水溶液（第一水相）與脂質(zhì)的有機(jī)相混合，在室溫下超聲或機(jī)械剪切一定時(shí)間制備出均勻的油包水（W/O）型初乳。所用脂質(zhì)為中性脂質(zhì)（常用三酰甘油）、磷脂和膽固醇等。中性脂質(zhì)是MVL 的制備中重要的部分，否則只能得到普通脂質(zhì)體。制備初乳的方法有：超聲、高速分散、乳勻機(jī)、噴嘴霧化等。實(shí)驗(yàn)室中常采用渦旋混合器或高速分散器進(jìn)行乳化。（2）形成的W/O型初乳中加入一定體積的第二水相緩沖液，并在一定條件下渦旋或機(jī)械剪切再次乳化形成水包油包水（W/O/W）型復(fù)乳。（3）將復(fù)乳轉(zhuǎn)移至錐形瓶中，以一定的速率用惰性氣體（如氮?dú)猓┏?fù)乳中的有機(jī)溶劑（乙醚、氯仿、二氯甲烷等），可在表面通入氮?dú)饣驅(qū)⒌獨(dú)鈱?dǎo)管伸入錐形瓶底部來除去有機(jī)溶劑。（4）用適用于儲(chǔ)存和生理上可接受的鹽溶液（如0.9%氯化鈉溶液）置換第二水相，除去未包封的游離藥物，濃縮。（5）藥物含量調(diào)整、灌裝。

2.2 影響MVL藥劑學(xué)特性的處方工藝

Kim S 研究出了MVL 的基本處方，其中油相含有一種荷負(fù)電的磷脂（磷脂酰甘油、磷脂酰肌醇、磷脂酰絲氨酸、心肌磷脂）、一種中性脂質(zhì)（三油酸甘油酯、三-α-氨基丁酸甘油酯、三辛酸甘油酯）、一種兼性磷脂（磷脂酰膽堿，PC）和一種輔助膜材（主要為膽固醇）；第一水相（內(nèi)水相）常用0.15 mol/L的蔗糖溶液或鹽溶液，第二水相（外水相）常用0.15 mol/L的緩沖鹽溶液或5%葡萄糖溶液[3]。之后有學(xué)者[8]研究出將L-賴氨酸（L-lys）加入第二水相，影響了第二水相的pH，增加了油水界面磷脂的凈負(fù)電荷，提高了MVL的靜電穩(wěn)定性。MVL處方中包封的介質(zhì)及脂質(zhì)的種類不同，都會(huì)使藥物的釋放速度不同，其中中性脂質(zhì)甘油三酯不同的碳鏈長(zhǎng)短可調(diào)節(jié)藥物的釋放速度[8]。除此之外，制備MVL時(shí)攪拌的時(shí)間、溫度、速度、外水相體積、氮?dú)饬魉佟⒎蛛x游離藥物的方法等對(duì)其粒徑、包封率、包封容積和穩(wěn)定性也會(huì)產(chǎn)生一定影響。

3 MVL的應(yīng)用

3.1 作為抗腫瘤藥物的載體

大多數(shù)抗腫瘤藥物基本上都具有較強(qiáng)的毒副作用，且某些藥物的療效存在時(shí)間依賴性，將這些藥物以MVL 作為載體，可在一定程度上提高靶向性，明顯減少藥物的毒副作用，延長(zhǎng)藥物的作用時(shí)間，達(dá)到緩釋的效果。阿糖胞苷（Cytarabine）為嘧啶類抗代謝藥物，通過鞘內(nèi)注射可用于防治腦膜白血病，劑量為每次25～75 mg，且隔日1次，在腦脊液中的半衰期為2～11 h[9]。2007 年4 月20 日，Enzon 公司研發(fā)的DepoCyt?獲得美國(guó)FDA批準(zhǔn)上市。DepoCyt?為阿糖胞苷MVL注射劑，在臨床上可用于治療淋巴瘤腦膜炎[10-11]。阿糖胞苷制成MVL緩釋制劑后，可延緩藥物的釋放時(shí)間，并且可防止未釋放的藥物被體內(nèi)酶代謝失活，減少了注射的次數(shù)（經(jīng)鞘內(nèi)2 周注射1次，每次50 mg），降低了醫(yī)療費(fèi)用及連續(xù)注射帶來的危險(xiǎn)，使阿糖胞苷緩慢釋放并于腦脊液中保持較高的濃度，延緩疾病的發(fā)展[12-13]。

3.2 作為鎮(zhèn)痛藥物的載體

在各種急、慢性疼痛和臨床麻醉的治療中，鎮(zhèn)痛局麻類藥物在臨床應(yīng)用中不可或缺?，F(xiàn)有的鎮(zhèn)痛局麻藥物的鎮(zhèn)痛時(shí)間都較短，需多次給藥，但這會(huì)增加患者注射部位的疼痛和醫(yī)護(hù)人員的工作量，且易產(chǎn)生并發(fā)癥，因此開發(fā)長(zhǎng)效的鎮(zhèn)痛局麻藥成為近年來研究的熱點(diǎn)。目前，美國(guó)SkyePharma 公司研制出了硫酸嗎啡MVL 注射劑（DepoDur?），并于2005 年由FDA 批準(zhǔn)上市，主要用于治療深度腹部、剖宮產(chǎn)、子宮切除術(shù)、全膝關(guān)節(jié)置換術(shù)等外科手術(shù)的術(shù)后鎮(zhèn)痛。硫酸嗎啡MVL（Depo-DurTM）的鎮(zhèn)痛時(shí)間可持續(xù)48 h，有效地延長(zhǎng)了藥物的作用時(shí)間，無需單劑量多次注射給藥，不僅提高了患者的依從性和安全性，而且有利于患者的術(shù)后恢復(fù)[14]。Pacira公司生產(chǎn)的新藥Exparel于2011年11月獲得FDA批準(zhǔn)上市。Exparel是布比卡因的長(zhǎng)效緩釋制劑，為1.3%的MVL 混懸液，在手術(shù)部位直接注射用于治療術(shù)后鎮(zhèn)痛。相比0.5%布比卡因的常規(guī)注射劑的鎮(zhèn)痛時(shí)間7 h而言，Exparel單劑量直接注射即可達(dá)到72 h的止痛時(shí)間，這成為術(shù)后疼痛管理的一個(gè)重大進(jìn)步[15-16]。

3.3 作為抗菌藥物的載體

抗菌藥物一般對(duì)全身性感染的治療有效，但對(duì)于手術(shù)和細(xì)菌性局部軟組織感染，采用傳統(tǒng)方式給藥一般在受感染的組織部位難以長(zhǎng)時(shí)間地維持血藥濃度，這對(duì)于治療局部感染是不利的。而將抗菌藥物裝載于MVL中，使抗菌藥物在受感染的局部形成藥物儲(chǔ)庫緩慢釋放藥物，這不僅能維持受感染部位的血藥濃度，還可降低毒副作用。有學(xué)者研究表明，將硫酸阿米卡星制成MVL制劑皮下注射于大鼠，可治療大鼠軟組織局部感染，使受感染的局部組織血藥濃度增加，而全身分布的血藥濃度減少，緩釋時(shí)間達(dá)7～10 d[17]。目前，已有公司研制出阿米卡星MVL混懸液（DepoAmikacinTM），并于2005年進(jìn)入Ⅰ期臨床研究階段。鹽酸萬古霉素常用于革蘭陽性菌所致感染，是臨床上治療難治性慢性骨髓炎的首選藥。楊杜明等[18]將鹽酸萬古霉素制備成陽離子MVL，相對(duì)于普通脂質(zhì)體包封率高出24.93%，不但可降低其耳毒性和腎毒性、提高局部抗菌作用，而且具有明顯的緩釋作用。

3.4 作為抗病毒藥物的載體

由于經(jīng)靜脈注射或口服抗病毒藥物后一般都難以透過血腦屏障，而經(jīng)鞘內(nèi)給予抗病毒藥物又易從腦脊液中被清除，因此治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)病毒感染較困難。目前，已有學(xué)者經(jīng)實(shí)驗(yàn)研究證明，將扎西他濱制成MVL制劑可抑制人免疫缺陷病毒的復(fù)制過程；且相對(duì)于未包封的普通制劑，包封的MVL 制劑50 μg 即可維持抗病毒濃度（0.1 μg/ml）68 h，在腦脊液中的半衰期相對(duì)于游離藥物的1.1 h也延長(zhǎng)至23 h[12]。單純皰疹病毒會(huì)引起黏膜、眼、皮膚和其他部位的各種感染，阿昔洛韋屬于合成的嘌呤核苷類似物，常用于治療這些感染，但存在口服生物利用度差、靜脈注射存在血栓性靜脈炎、局部用藥吸收少等局限性。Jain SK 等[19]將阿昔洛韋包封于MVL，開發(fā)了藥物儲(chǔ)庫系統(tǒng)，不僅載藥量高而且能在局部長(zhǎng)效緩釋，克服了口服治療的首關(guān)效應(yīng)及靜脈注射的副作用。

3.5 作為蛋白質(zhì)多肽類藥物的載體

經(jīng)皮下注射、靜脈注射及其他非胃腸道途徑給藥的蛋白質(zhì)多肽類大分子藥物，易在體內(nèi)快速降解，生物利用度低，半衰期短，常需多次注射來維持其有效血藥濃度。利用MVL的優(yōu)點(diǎn)將蛋白質(zhì)多肽類藥物進(jìn)行包封，可保持其原有的結(jié)構(gòu)和生物活性，提高其包封率和穩(wěn)定性，同時(shí)達(dá)到緩釋的效果。有學(xué)者研究了一種名為L(zhǎng)XT-101 的新型促性腺激素分泌激素（GnRH）類似物拮抗藥的多肽類藥物，能使血中雄激素水平迅速降低，而且不會(huì)出現(xiàn)最初的雄激素反跳現(xiàn)象；但作為多肽類藥物，其不能口服給藥，半衰期較短（僅為4 h），需頻繁多次給藥才能維持藥效，于是將其設(shè)計(jì)為抗前列腺癌的LXT-101MVL 注射劑[20]。經(jīng)實(shí)驗(yàn)表明，與普通制劑相比，經(jīng)皮下注射LXT-101MVL的生物利用度提高了近2倍，平均滯留時(shí)間延長(zhǎng)了近18倍，且能在大鼠的體內(nèi)維持5～6 d的藥效。此外，國(guó)內(nèi)外的學(xué)者還對(duì)白細(xì)胞介素、胰島素、人表皮生長(zhǎng)因子、胰島素樣生長(zhǎng)因子、促紅細(xì)胞生長(zhǎng)素及生長(zhǎng)激素釋放肽等多肽蛋白類大分子藥物的MVL劑型進(jìn)行了研究和探索。

4 結(jié)語

綜上所述，MVL以其特有的結(jié)構(gòu)和特點(diǎn)，具備良好的儲(chǔ)庫及緩釋作用，已成為國(guó)內(nèi)外眾多學(xué)者研究的重點(diǎn)。然而，MVL研發(fā)方面仍存在一些問題，如MVL粒徑較大不宜靜脈注射給藥；在貯存過程中易出現(xiàn)聚集和泄漏，影響藥物的穩(wěn)定性；MVL多為混懸液，不利于保存和運(yùn)輸?shù)取Ｏ嘈烹S著對(duì)MVL研究的不斷深入，對(duì)其結(jié)構(gòu)特征、處方優(yōu)化和制備工藝進(jìn)一步完善，將解決其目前存在的問題，MVL也將在臨床應(yīng)用方面具有更加廣闊的空間。

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