付兆祥

(劍閣縣中醫(yī)院，四川 劍閣 628300)

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龍膽原藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)體系分析

付兆祥

(劍閣縣中醫(yī)院，四川 劍閣 628300)

分析龍膽炮制飲片原藥材選擇原則和方法，完善龍膽炮制飲片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)體系，便于從性狀、水分、浸出物、重金屬、微生物等角度合理選擇原藥材，從而制作高質(zhì)量的龍膽炮制飲片。

龍膽炮制飲片；檢測(cè)方法；質(zhì)量體系

《中國(guó)藥典》記載有龍膽、條葉龍膽、三花龍膽和滇龍膽。龍膽多產(chǎn)于西南高寒山區(qū)，在北京、東北等地也有少量龍膽種植，其根和根莖均具有重大藥用價(jià)值[1]。龍膽為常見(jiàn)中藥，具有清火除濕熱、清利肝膽、清熱健胃的功效，可用于防治高血壓、肝炎、膽囊炎等疾病，療效顯著，也是常用中成藥的原料藥。中藥炮制方法選擇的不同會(huì)造成產(chǎn)品質(zhì)量的差異，從而對(duì)中成藥質(zhì)量產(chǎn)生重大影響。從檢測(cè)方法和質(zhì)量體系，對(duì)龍膽炮制飲片原料藥的選擇原則和方法進(jìn)行簡(jiǎn)要分析，現(xiàn)具體報(bào)告如下。

1 形態(tài)選擇

1.1 性狀鑒定

不同產(chǎn)地龍膽的性狀有所差別，主要表現(xiàn)在根的長(zhǎng)短、粗細(xì)、表面和斷面差異。如玉溪產(chǎn)出的三花龍膽根莖呈結(jié)節(jié)狀，長(zhǎng)0.6～0.8cm，直徑0.4～0.6cm，呈灰棕色或深棕色；根莖表面有2～6個(gè)芽苞片，會(huì)有一些殘留的鱗葉；根呈細(xì)長(zhǎng)紡錘形狀，長(zhǎng)7～12cm，直徑0.2～0.4cm，呈棕褐色或黃棕色；根表面有縱皺紋；斷面呈白色木心。玉溪產(chǎn)出的堅(jiān)龍膽與涼山、大理、建水等地三花龍膽在性狀上有細(xì)微差異，其中涼山產(chǎn)出的三花龍膽根較短，一般不會(huì)超過(guò)10cm；大理產(chǎn)出的三花龍膽根則較細(xì)，基本上各地堅(jiān)龍膽根莖均殘留有鱗葉，且斷面皆可見(jiàn)白色木心。根據(jù)相關(guān)質(zhì)量體系，其性狀鑒定為：不規(guī)則的短段，表面呈黃棕色，切面中心有筋脈點(diǎn)和裂隙，易折斷，味苦。

1.2 顯微鑒定

龍膽炮制飲片的橫切面具有顯微特征，可能會(huì)殘留有表皮細(xì)胞，因此可從橫切面的表皮層、形成層、裂隙等進(jìn)行鑒定。涼山產(chǎn)地三花龍膽顯微特征為：橫切面：無(wú)外皮層細(xì)胞，內(nèi)皮層細(xì)胞呈長(zhǎng)方形，有明顯的形成層，無(wú)裂隙、草酸鈣針晶及髓等；粉末：多數(shù)無(wú)外皮層細(xì)胞碎片，或已脫落；內(nèi)皮層細(xì)胞碎片：平周壁有明顯較密的橫向紋理，且每個(gè)母細(xì)胞有4～14個(gè)縱隔壁，導(dǎo)管為網(wǎng)紋、螺紋狀，無(wú)草酸鈣針晶、厚壁細(xì)胞，有單紋孔纖維。

不同產(chǎn)地的三花龍膽顯微特征有細(xì)微的差異，基本上均沒(méi)有外皮層和髓，形成層則非常明顯。根據(jù)相關(guān)質(zhì)量體系鑒別要求，龍膽炮制飲片的外皮層細(xì)胞碎片應(yīng)為長(zhǎng)方形、類方形，每個(gè)母細(xì)胞出橫壁分隔成多個(gè)類方形子細(xì)胞；內(nèi)皮層細(xì)胞碎片為長(zhǎng)方形、類方形，平周壁有明顯的橫向紋理，導(dǎo)管長(zhǎng)約40μm，薄壁細(xì)胞中含有一些細(xì)小的草酸鈣針晶。

2 水分含量測(cè)定

龍膽揮發(fā)性較低，可采用烘干法測(cè)定水分含量。取龍膽適量，將其碾碎，過(guò)2號(hào)篩，取樣品平鋪于扁形稱量瓶中，平鋪的厚度不宜超過(guò)5mm，精密稱取2.0g的樣品，將樣品置于100℃左右烘箱干燥5h，迅速將樣品轉(zhuǎn)移至干燥器中，冷卻半小時(shí)精密稱重。再按上述方法干燥1h，冷卻并精密稱重，直到連續(xù)兩次稱重相差不超過(guò)5mg為止，根據(jù)樣品減少的質(zhì)量可計(jì)算龍膽含水量。根據(jù)質(zhì)量體系要求，龍膽含水量控制不超過(guò)9%。

3 浸出物含量測(cè)定

由于龍膽具有水溶性，可選擇水、甲醇等作為溶劑測(cè)定浸出物含量，可取得較好的浸出效果。具體浸出方法有熱浸法和冷浸法兩種，下面主要介紹熱浸法。取龍膽碾碎成粉末，過(guò)2號(hào)篩稱取4.0g，將龍膽粉末置于250mL錐形瓶，加100mL蒸餾水，稱重；放置1h后連接回流冷凝管，加熱直至沸騰，保持溶液微沸約1h，待冷卻后取出錐形瓶，稱重，減少質(zhì)量加水補(bǔ)充，搖勻并采用干燥濾器過(guò)濾處理，稱取濾液25mL，置于蒸發(fā)皿蒸干，再置于100℃左右烘箱干燥3h，迅速轉(zhuǎn)移至干燥器中冷卻半小時(shí)并精密稱重，可計(jì)算龍膽浸出物含量。

研究結(jié)果表明，龍膽浸出物含量因產(chǎn)地、品種的不同均有所差異，其中清源產(chǎn)地龍膽浸出物含量較高可達(dá)43%左右，而涼山產(chǎn)地堅(jiān)龍膽浸出物含量則較低。

4 殘留物含量測(cè)定

根據(jù)《藥用植物及制劑進(jìn)出口綠色行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)》中相關(guān)規(guī)定，龍膽炮制飲片重金屬總含量控制不超過(guò)20.0mg/kg，其中鉛含量控制≤5.0mg/kg，鎘含量≤0.3mg/kg，汞含量≤0.2mg/kg，銅含量≤20.0mg/kg，砷含量≤2.0mg/kg；同時(shí)農(nóng)藥殘留含量亦有明確規(guī)定，如DDT≤0.1mg/kg，PCNB≤0.1mg/kg，Aldrin≤0.02mg/kg等。除此之外，藥用植物中重金屬與殘留農(nóng)藥含量控制應(yīng)符合《中國(guó)藥典》相關(guān)規(guī)定。在檢測(cè)方法上，銅、砷、汞等重金屬含量檢測(cè)可采用原子吸收光譜法、冷原子熒光光度法等；DDT、PNCB、Aldrin等農(nóng)藥殘留含量檢測(cè)則可采用氣相色譜法。對(duì)某批不同產(chǎn)地的三花龍膽和粗糙龍膽進(jìn)行重金屬和殘留農(nóng)藥含量檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明龍膽的重金屬總含量、單個(gè)金屬含量均未超過(guò)《藥用植物及制劑進(jìn)出口綠色行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)》中規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)限值，且殘留農(nóng)藥含量也未超過(guò)標(biāo)準(zhǔn)限值，說(shuō)明龍膽重金屬與殘留農(nóng)藥含量均符合控制標(biāo)準(zhǔn)。

原料藥的選擇鑒定，除了性狀、顯微特征、水分、浸出物、重金屬、殘留農(nóng)藥等方面，還有微生物含量檢測(cè)、總灰分檢測(cè)、酸不溶性灰分檢測(cè)、苦苷含量檢測(cè)等內(nèi)容。

5 結(jié)語(yǔ)

關(guān)于龍膽炮制飲片的質(zhì)量體系，目前尚無(wú)完整的控制標(biāo)準(zhǔn)，有關(guān)水分、浸出物、重金屬、殘留農(nóng)藥、總灰分、苦苷等含量檢測(cè)亦無(wú)整套系統(tǒng)方法。因此不少學(xué)者就龍膽炮制飲片的質(zhì)量體系，具體提出龍膽炮制飲片的水分、浸出物、總灰分、酸不溶性灰分、重金屬、殘留農(nóng)藥、微生物等含量標(biāo)準(zhǔn)限值，并提出相應(yīng)檢測(cè)方法。龍膽炮制飲片質(zhì)量檢測(cè)方法均按2005版《中國(guó)藥典》中相關(guān)規(guī)定進(jìn)行檢測(cè)，比如采用烘干法檢測(cè)水分含量、熱浸法檢測(cè)浸出物含量。張新圖[2]采用《中國(guó)藥典》相關(guān)方法檢測(cè)不同產(chǎn)地不同品種龍膽的浸出物、水分、總灰分、苦苷、酸不溶性灰分的含量，在相對(duì)濕度為35%～70%環(huán)境中試驗(yàn)可取得較好的結(jié)果，當(dāng)環(huán)境濕度超過(guò)85%時(shí)得出結(jié)果與實(shí)際情況不符，說(shuō)明濕度會(huì)對(duì)溶液產(chǎn)生較為明顯的影響。張春旭等[3]采用反相高效液相色譜法檢測(cè)龍膽中苦苷的含量，實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確，且重現(xiàn)性強(qiáng)，值得推廣。

龍膽炮制飲片的質(zhì)量控制亟需統(tǒng)一檢測(cè)體系，結(jié)合現(xiàn)有研究成果和市場(chǎng)實(shí)際情況，制定與完善龍膽炮制飲片質(zhì)量檢測(cè)體系，以此根據(jù)龍膽的浸出物、苦苷、水分、總灰分等含量可進(jìn)行等級(jí)劃分，從而有效規(guī)范龍膽炮制飲片市場(chǎng)。根據(jù)科學(xué)檢測(cè)方法和飲片有效成分進(jìn)行評(píng)價(jià)，而并非采用傳統(tǒng)的形、色、氣、味來(lái)判斷中藥飲片質(zhì)量?jī)?yōu)劣[4]。同時(shí)，通過(guò)對(duì)龍膽炮制飲片質(zhì)量體系的相關(guān)研究，可對(duì)檢測(cè)環(huán)境、檢測(cè)細(xì)節(jié)進(jìn)行嚴(yán)格規(guī)定，并在適宜的試驗(yàn)環(huán)境得出精密準(zhǔn)確的試驗(yàn)結(jié)果。

綜上所述，隨中藥現(xiàn)代化的快速發(fā)展，中藥炮制飲片質(zhì)量與方法優(yōu)劣鑒定成為新的研究課題[5]。該文以龍膽為例，分析龍膽炮制飲片原料藥的選擇原則和檢測(cè)方法，對(duì)其水分、浸出物、重金屬等含量檢測(cè)進(jìn)行簡(jiǎn)單介紹，以期構(gòu)建與完善龍膽炮制飲片質(zhì)量體系，便于從原料藥的性狀、水分、浸出物、重金屬、微生物等角度合理選擇原料藥，從而制作高質(zhì)量的龍膽炮制飲片。

[1] 張發(fā)忠.中藥飲片龍膽、苦參炮制技術(shù)與藥理實(shí)驗(yàn)研究[J].健康必讀：中旬刊，2012,11(10)：24.

[2] 張新圖.龍膽藥材和飲片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J].醫(yī)學(xué)美學(xué)美容：中旬刊，2014(5)：256-257.

[3] 張春旭，張文彥，韓立燕.龍膽清熱顆粒制備和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究[J].河北中醫(yī)藥學(xué)報(bào)，2012,27(1)：44-45.

[4] 曾敏.蒼術(shù)飲片規(guī)格及其質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)研究[D].武漢：湖北中醫(yī)藥大學(xué)，2013.

[5] 祝啟飛.厚樸炮制工藝及飲片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[D].貴陽(yáng)：貴州中醫(yī)學(xué)院，2010.

(責(zé)任編輯：李嵐春)

2014-05-28

付兆祥(1974-)，男，四川省劍閣縣中醫(yī)院主管中藥師，研究方向?yàn)橹兴庤b別與炮制。

R283.3

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1673-2197(2014)18-0027-02