肖艷華，崔 猛，李艷艷，帥 維

（武漢工程大學(xué)化工與制藥學(xué)院綠色化工過程省部共建教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖北武漢430073）

白補(bǔ)藥（Salvia scapiformis Hance var.Hirsute Stib），別名地梗鼠尾、翻天雷公，為唇形科（Lamiaceae）多年生草本植物，花莖狀丹參的全草，主生于陰濕巖上，夏秋采收，洗凈，曬干或鮮用。主產(chǎn)于貴州、廣西等地。在民間用于補(bǔ)虛益損，強(qiáng)筋壯骨。主肺病，虛弱干瘦，頭目眩暈，勞傷盤骨［1］。為了加強(qiáng)對白補(bǔ)藥單體成分的研究，為白補(bǔ)藥的深層開發(fā)提供依據(jù)，作者對白補(bǔ)藥石油醚部分的化學(xué)成分進(jìn)行了系統(tǒng)研究。

1 實(shí)驗(yàn)

1.1 材料、試劑與儀器

白補(bǔ)藥藥材采自海拔1 800m的四川雅安，由綿陽師范學(xué)院唐天君教授鑒定，樣品標(biāo)號（4161）并保存于武漢工程大學(xué)實(shí)驗(yàn)室。藥材經(jīng)干燥粉碎，備用。

所用試劑均為分析純；常規(guī)顯色劑為質(zhì)量分?jǐn)?shù)5%的硫酸乙醇溶液。

FA2104N型電子天平；JY5002型電子天平；Perkin Elmer Spectrum One型FTIR紅外光譜儀（KBr壓片）；RE－2000型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器；Bruker AV－400型核磁共振儀；Finnigan LCQ DECA型質(zhì)譜儀；RY－2型熔點(diǎn)儀；ZF－20D型暗箱式紫外分析儀；色譜硅膠（100～200目，200～300目）和薄層色譜硅膠（GF254），青島海洋化工廠。

1.2 提取分離

取白補(bǔ)藥粉末3.5kg，用75%乙醇浸提3次，每次浸泡2h，濃縮得浸膏0.96kg。在浸膏中加入適量水稀釋使浸膏懸浮，用石油醚萃取，經(jīng)減壓濃縮得浸膏27.8g。浸膏經(jīng)硅膠柱色譜（柱規(guī)格8cm×60cm，1 000mL，100～200目硅膠）粗分，除去大極性部分后合并濃縮得粗分浸膏17.8g；再次經(jīng)硅膠柱色譜（柱規(guī)格8cm×60cm，600mL，200～300目硅膠）細(xì)分，用石油醚－乙酸乙酯［（100～1）∶1］梯度洗脫，共收集56流份（200mL／流份）。Fr 1～2合并后得化合物Ⅰ（15 mg）。Fr 3～19合并后濃縮得樣品3g，經(jīng)硅膠柱色譜（柱規(guī)格3cm×30cm，150mL，200～300目硅膠），用石油醚－乙酸乙酯［（100～5）∶1］梯度洗脫，收集20流份（100mL／流份），F(xiàn)r′1～8合并后重結(jié)晶得化合物Ⅱ（26mg），F(xiàn)r′9～13合并后濃縮，再經(jīng)凝膠純化得化合物Ⅲ（12mg）。Fr 20～26合并后用甲醇重結(jié)晶得化合物Ⅳ（18mg）。Fr 27～40合并后濃縮得樣品4 g，經(jīng)硅膠柱色譜（柱規(guī)格3cm×30cm，150mL，200～300目硅膠），用石油醚－乙酸乙酯［（50～1）∶1］梯度洗脫，收集17流份（10mL／流份），F(xiàn)r″11～14合并后重結(jié)晶得化合物Ⅴ（27mg）。Fr 41～49合并后濃縮再經(jīng)多次重結(jié)晶得化合物Ⅵ（17mg）。

2 結(jié)果與討論

2.1 化合物的表征

化合物Ⅰ：無色透明液體，易溶于氯仿和石油醚，難溶于水。在紫外燈（254nm）下無熒光，硫酸烘烤不顯色，推測其可能為直鏈無共軛雙鍵化合物。IR（KBr），νmax，cm－1：2938.9，2864.5，1459.7，701.6；1HNMR（400 MHz，CDCl3），δ：0.944（6H，t，H－1，9），1.323［14H，m，H－（2－8）］；13CNMR（100MHz，CDCl3），δ：14.07（C－1，9），22.60～31.91［C－（2－8）］。理化性質(zhì)及光譜、波譜數(shù)據(jù)與壬烷的報道［2］一致，鑒定該化合物為壬烷。

化合物Ⅱ：室溫白色蠟狀固體，易溶于氯仿。紫外燈（254nm）下無熒光，硫酸烘烤不顯色，推測其可能為直鏈無共軛雙鍵的化合物。IR（KBr），νmax，cm－1：2917.9，2848.7，1750.8，1490.8，1452.2，707.4；1HNMR（400MHz，CDCl3），δ：0.880（3H，s，H－17），1.270［26H，m，H－（4－16）］，1.644（2H，m，H－3），2.316（2H，m，H－2），3.680（3H，s，－OCH3）；13CNMR（100MHz，CDCl3），δ：14.07（C－17），22.67～33.80［C－（2－24）］，51.40（－OCH3），176.93（C＝O）。理化性質(zhì)及光譜、波譜數(shù)據(jù)與十七烷酸甲酯的報道［2］一致，鑒定該化合物為十七烷酸甲酯。

化合物Ⅲ：白色晶體（氯仿），熔點(diǎn)：50～57℃，溶于無水乙醇、甲醇、石油醚及氯仿。在紫外燈（254 nm）下無熒光，硫酸烘烤不顯色，推測其可能為直鏈無共軛雙鍵化合物。IR（KBr），νmax，cm－1：3435.2，2917.7，2848.9，1743.7，1492.8，1452.2，697.2；1HNMR（400MHz，CDCl3），δ：0.900（3H，t，H－14），1.276［20H，m，H－（4－13）］，1.653（2H，m，H－3），2.349（2H，m，H－2）；13CNMR（100MHz，CDCl3），δ：14.10（C－14），22.66～33.86［C－（2－13）］，176.90（C＝O）。理化性質(zhì)及光譜、波譜數(shù)據(jù)與十四烷酸的報道［3］一致，鑒定該化合物為十四烷酸。

化合物Ⅳ：白色片狀晶體（甲醇），熔點(diǎn)：154～156℃，溶于無水乙醇、甲醇、石油醚及氯仿。硫酸烘烤后顯紫紅色，推測其為甾類化合物。ESI－MS，m／z：397.40［M＋H］＋；IR（KBr），νmax，cm－1：3452.9，2936.7，2869.9，1651.5，1580.8，1452.3，1384.7，1075.25，1053.5；1HNMR（400MHz，CDCl3），δ：5.65（1H，d，J＝6.5Hz，H－6），5.35（1H，d，J＝6.5Hz，H－7），5.25（2H，d，J＝5.1Hz，H－22，23），3.53（1H，m，H－3），1.01（3H，s，Me－24），0.98（3H，s，H－19），0.93（3H，d，J＝6.6Hz，H－21），0.87（6H，d，J＝6.9Hz，H－26，27），0.67（3H，t，J＝7.3Hz，H－18）；13CNMR（100MHz，CDCl3），δ：142.1（C－8），140.8（C－5），131.7（C－22），127.7（C－23），120.7（C－6），115.7（C－7），71.8（C－3），56.8（C－17），56.1（C－14），50.1（C－9），45.8（C－24），42.3（C－4，13），40.1（C－20），39.8（C－12），37.3（C－1），36.1（C－10），33.6（C－25），32.1（C－2），29.7（C－16），24.3（C－15），23.0（C－28），21.1（C－11），18.8（C－21），19.8（C－26，27），12.0（C－19），11.9（C－18）。理化性質(zhì)及光譜、波譜數(shù)據(jù)與麥角甾醇的報道［4］一致，鑒定該化合物為麥角甾醇。

化合物 Ⅴ：白色鱗狀晶體（氯仿），熔點(diǎn)：63～64℃，溶于無水乙醇、甲醇、石油醚及氯仿。在紫外燈（254nm）下無熒光，硫酸烘烤不顯色，推測其可能為直鏈無共軛雙鍵化合物。IR（KBr），νmax，cm－1：3337.0，2924.6，2853.8，1743.7，1465.7，1436.2，722.0；1HNMR（400MHz，CDCl3），δ：0.900（3H，t，H－14），1.275［24H，m，H－（4－13）］，1.635（2H，m，H－3），2.367（2H，m，H－2）；13CNMR（100MHz，CDCl3），δ：14.10（C－16），22.66～33.86［C－（2－15）］，173.5（C＝O）。理化性質(zhì)及光譜、波譜數(shù)據(jù)與軟脂酸的報道［3］一致，鑒定該化合物為軟脂酸。

化合物Ⅵ：白色絮狀晶體（甲醇），熔點(diǎn)：154～156℃，溶于無水乙醇、甲醇及氯仿。硫酸烘烤后顯紫紅色，推測其為三萜類化合物。ESI－MS，m／z：439.34［M－H］－；1HNMR（400MHz，CDCl3），δ：0.80～1.20（多個H），3.13（1H，t，J＝7.0Hz，H－24），3.23（1H，t，J＝7.0Hz，H－24），3.53（1H，t，J＝7.0Hz，H－3），5.25（1H，d，J＝5.1Hz，H－12），5.65（1H，d，J＝5.1Hz，H－11）；13CNMR（100MHz，CDCl3），δ：137.54（C－13），131.04（C－18），127.29（C－11），125.13（C－12），78.99（C－3），65.45（C－24），55.87（C－9），54.33（C－5），42.06（C－14），40.73（C－4），40.45（C－8），38.89（C－19），38.16（C－1），37.86（C－22），36.71（C－10），36.11（C－21），35.51（C－16），34.68（C－17），33.05（C－20），32.42（C－7，29），25.83（C－28），24.94（C－15），24.14（C－30），23.64（C－2），22.66（C－23），19.79（C－27），19.19（C－6），17.83（C－26），16.38（C－25）。理化性質(zhì)及光譜、波譜數(shù)據(jù)與3β，2，4－二羥基，Δ11，13（18）－齊墩果二烯的報道［5］一致，鑒定該化合物為3β，2，4－二羥基，Δ11，13（18）－齊墩果二烯。

2.2 化合物的結(jié)構(gòu)式

化合物Ⅰ～Ⅵ的結(jié)構(gòu)式見圖1。

2.3 討論

白補(bǔ)藥通過分離純化得到6個化合物，均為初次從該藥材中分離得到。其中化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅴ為脂肪或脂肪酸類化合物，化合物Ⅳ為甾類化合物，化合物Ⅵ為齊墩果烯類化合物?，F(xiàn)代藥理研究表明：化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅴ主要用作食品乳化劑、顏料分散劑及醫(yī)藥、化妝品用乳化劑、混合劑和增脂劑以及表面活性劑等［6］。化合物Ⅳ具有抗癌、抗炎、免疫抑制和促進(jìn)血小板凝聚以及抗流感病毒等作用，在藥用和食用方面有較高的保健價值［7］。化合物Ⅵ對金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌、大腸桿菌和白色念珠菌有明顯的抑制作用［8－9］。本研究豐富了白補(bǔ)藥中化合物的類型，對建立嚴(yán)格質(zhì)量監(jiān)控標(biāo)準(zhǔn)及深層次開發(fā)利用白補(bǔ)藥藥材具有重要作用。

圖1 化合物Ⅰ～Ⅵ的結(jié)構(gòu)式Fig.1 Structural formula of compoundsⅠ～Ⅵ

3 結(jié)論

用75%乙醇提取白補(bǔ)藥，所得浸膏加水稀釋后，用石油醚萃取并將所得石油醚浸膏部分采用硅膠柱色譜和重結(jié)晶方法進(jìn)行分離純化，利用熔點(diǎn)、溶解性、顏色反應(yīng)等理化性質(zhì)以及紅外光譜、質(zhì)譜及核磁共振等波譜數(shù)據(jù)確定分離所得物質(zhì)的結(jié)構(gòu)。從白補(bǔ)藥中分離并鑒定了6個化合物，分別為：壬烷（Ⅰ）、十七烷酸甲酯（Ⅱ）、十四烷酸（Ⅲ）、麥角甾醇（Ⅳ）、軟脂酸（Ⅴ）、3β，2，4－二羥基，Δ11，13（18）－齊墩果二烯（Ⅵ）。這6個化合物均為首次從該藥材中分離得到。

［1］ 李時珍.本草綱目［M］.延邊：延邊人民出版社，2007：71.

［2］ 張前軍，楊小生，朱海燕.假木豆脂溶性成分研究［J］.貴州大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），2006，23（3）：270－271.

［3］ 吳乃居，孫燕.女貞子化學(xué)成分的研究［J］.中草藥，1993，24（1）：414.

［4］ 周忠玉，譚建文，劉吉開.陸地革菌的化學(xué)成分研究［J］.熱帶亞熱帶植物學(xué)報，2011，20（2）：201－205.

［5］ 龔復(fù)俊，袁曉，王國亮.3－氧，11α－羥基，Δ12－齊墩果烯及其類似化合物的13CNMR分析［J］.波譜學(xué)雜志，1998，15（3）：273－277.

［6］ 吳克剛，柴向華，楊蓮生.n－3多不飽和脂肪酸防治心血管疾病的研究進(jìn)展［J］.食品研究與開發(fā)，2000，21（6）：6－9.

［7］ 葛虹，張之強(qiáng)，孫玲新，等.肉豆蔻酸單乙醇酰胺硫酸酯銨鹽的合成與性能研究［J］.精細(xì)石油化工進(jìn)展，2006，7（8）：1－4.

［8］ YANG Z，LIU S，CHEN X，et al.Induction of apoptotic cell death and in vivo growth inhibition of human cancer cells by a saturated branched－chain fatty acid，13－methyltetradecanoic acid［J］.Cancer Res J T Cancer Res，2000，60（3）：505－509.

［9］ 唐初，陳玉，柏舜，等.齊墩果酸的結(jié)構(gòu)修飾與生物活性研究進(jìn)展［J］.有機(jī)化學(xué)，2013，33（1）：46－65.