陳健勇，劉光明，張 于，郝小江，何紅平

（1.大理學(xué)院藥學(xué)與化學(xué)學(xué)院，云南大理 671000；2.中國科學(xué)院昆明植物研究所植物化學(xué)與西部植物資源持續(xù)利用國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，昆明 650201；3.云南中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，昆明 650500）

瑞香狼毒的化學(xué)成分

陳健勇1，2，劉光明1，張 于2，郝小江2，何紅平3*

（1.大理學(xué)院藥學(xué)與化學(xué)學(xué)院，云南大理 671000；2.中國科學(xué)院昆明植物研究所植物化學(xué)與西部植物資源持續(xù)利用國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，昆明 650201；3.云南中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，昆明 650500）

目的：對(duì)瑞香狼毒（Stellera chamaejasme）的化學(xué)成分進(jìn)行研究。方法：采用硅膠柱層析、C18反相柱層析、Sephadex LH-20凝膠柱層析和HPLC等方法分離瑞香狼毒的化學(xué)成分，采用波譜技術(shù)鑒定化合物的結(jié)構(gòu)。結(jié)果：從中共分離鑒定了5個(gè)化合物，分別是：（2R，3S）-3-（3，4-二甲氧基芐基）-2-（3，4-亞甲二氧基芐基）丁內(nèi)酯（1）、haplomyrfolin（2）、雙氫芝麻素（3）、異新狼毒素A（4）和瑞香狼毒素B（5）。結(jié)論：化合物1～3為首次從該植物中分離得到。

瑞香狼毒；瑞香科；化學(xué)成分

瑞香狼毒（Stellera chamaejasme），為瑞香科狼毒屬多年生草本植物，產(chǎn)我國北方各省區(qū)及西南地區(qū)〔1〕。其干燥根莖為中藥“狼毒”的正品〔2〕。其性味苦平，有逐水祛痰，破疾殺蟲之功效〔3〕?，F(xiàn)代報(bào)道瑞香狼毒具有較強(qiáng)的抗腫瘤、抗HIV、抗菌和殺蟲等多種生理活性〔4-8〕。瑞香狼毒的化學(xué)成分主要是雙二氫黃酮、香豆素、木脂素和二萜等〔9〕。為了進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)其生物活性成分，我們對(duì)產(chǎn)于云南的瑞香狼毒藥材進(jìn)行了化學(xué)成分的研究。從瑞香狼毒根部的乙酸乙酯萃取部位中分離得到5個(gè)化合物，分別為（2R，3S）-3-（3，4-二甲氧基芐基）-2-（3，4-亞甲二氧基芐基）丁內(nèi)酯（1）、haplomyrfolin（2）、雙氫芝麻素（3）、異新狼毒素A（4）和瑞香狼毒素B（5）。其中，化合物1～3為首次從該植物中分離得到。

1 儀器與材料

1.1儀器與試劑Bruker AM-400核磁共振儀，以四甲基硅烷（TMS）為內(nèi)標(biāo)；ESI質(zhì)譜由Waters 2695 HPLC–Thermo Finnigan LCQ Advantage型離子阱質(zhì)譜儀測(cè)定；HPLC為Agilent 1100；凝膠Sephadex LH-20（Pharmacia）；柱色譜用硅膠和GF254型薄層層析硅膠均為青島海洋化工廠產(chǎn)品；所用有機(jī)試劑均為工業(yè)純，使用前重蒸；顯色劑有碘顯色劑和2% H2SO4的乙醇溶液（噴灑后加熱顯色）。

1.2試驗(yàn)材料瑞香狼毒于2011年10月采自云南省香格里拉縣，由中科院昆明植物研究所陳渝老師鑒定為瑞香狼毒（Stellera chamaejasme L.），樣品標(biāo)本（No.H20111006）存放于中國科學(xué)院昆明植物研究所。

2 提取與分離

瑞香狼毒根干燥，粉碎，取樣8.0 kg用甲醇回流提取3次，每次4 h；合并提取液后進(jìn)行減壓蒸餾回收甲醇得到浸膏，將浸膏加水稀釋后用乙酸乙酯萃取4次，得浸膏500 g。將浸膏用500 g硅膠（60～80目）拌樣，2.5 kg硅膠（200～300目）裝柱，依次用石油醚∕丙酮（v/v=9∶1，8∶2，7∶3，6∶4）和氯仿∕甲醇（v/v=9∶1，8∶2，0∶1）分為A-M等13段，在經(jīng)過硅膠柱層析、C18反相柱層析、Sephadex LH-20凝膠柱層析以及HPLC等分離手段反復(fù)分離純化，從F段中分離得到化合物1（23.2 mg），2（9.6 mg），3（5.3 mg），5（20.3 mg）；從K段中分離得到化合物4（5.2 mg）。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：淡黃色油狀；C21H22O6；ESIMS m/z 371〔M+H〕+，393〔M+Na〕+，409〔M+K〕+，763〔2M+Na〕+；1H NMR（400 MHz，CDCl3）δ：6.75（1H，d，J=8.1 Hz，H-5"），6.70（1H，d，J=7.7 Hz，H-5'），6.60（1H，d，J=1.7 Hz，H-2'），6.57（1H，d，J=7.7 Hz，H-6'），6.56（1H，d，J=8.1 Hz，H-6"），6.47（1H，d，J=1.7 Hz，H-2"），5.92（2H，s，3'-OH2O-4'），4.14（1H，dd，J=9.2，7.1 Hz，Ha-4），3.87（1H，dd，J=9.2，7.4 Hz，Hb-4），3.84（3H，s，-OCH3），3.82（3H，s，-OCH3），2.95（1H，dd，J=14.0，5.1 Hz，Ha-5），2.84（1H，dd，J=14.0，7.0 Hz，Hb-5），2.52（4H，m，H-2，3，6）；13C NMR（100 MHz，CDCl3）δ：178.5（s，C= O），149.0（s，C-3"），147.8（s，C-3'，4"），146.4（s，C-4'），131.3（s，C-1'），130.4（s，C-1"），122.2（d，C-6'），120.6（d，C-6"），111.6（d，C-2"），111.2（d，C-5"），109.4（d，C-2'），108.1（d，C-5'），101.0（t，3'-OCH2O-4'），71.2（t，C-4），55.9（q，-OCH3），55.7（q，-OCH3），46.4（d，C-2），41.2（d，C-3），38.2（t，C-6），34.7（t，C-5）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)〔10〕的波譜數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定該化合物為（2R，3S）-3-（3，4-二甲氧基芐基）-2-（3，4-亞甲二氧基芐基）-丁內(nèi)酯。

化合物2：淡黃色無定形粉末；C20H20O6；1H NMR（400 MHz，CDCl3）δ：6.74（1H，d，J=7.9 Hz，H-5），6.65（1H，d，J=7.4 Hz，H-5'），6.53（1H，brs，H-2'），6.52（1H，d，J=7.4 Hz，H-6'），6.45（1H，d，J= 7.9 Hz，H-6），6.39（1H，brs，H-2），5.87（2H，s，3-OCH2O-4），5.51（1H，s，-OH），4.08（1H，t，J=7.3 Hz，Ha-9'），3.81（1H，overlapped，Hb-9'），3.71（3H，s，3'-OCH3），2.89（1H，dd，J=13.5，4.8 Hz，Ha-7），2.83（2H，dd，J=13.7，6.7 Hz，Hb-7），2.48（4H，m，H-7'，8'，8）；13C NMR（100 MHz，CDCl3）δ：178.5（s，C-9），147.8（s，C-3），146.5（s，C-3'），146.4（s，C-4），144.4（s，C-4'），131.3（s，C-1），129.7（s，C-1'），122.2（d，C-6），121.2（d，C-6'），114.5（d，C-5'），110.9（d，C-2'），109.5（d，C-2），108.2（d，C-5），101.0（t，3-OCH2O-4），71.2（t，C-9'），55.8（q，3'-OCH3），46.4（d，C-8），41.3（d，C-8'），38.3（t，C-7'），34.7（t，C-7）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)〔11〕的波譜數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定該化合物為haplomyrfolin。

化合物3：淡黃色油狀；C20H20O6；1H NMR（400 MHz，CDCl3）δ：6.86（1H，s，H-2），6.78～6.65（5H，m，arom.H），5.97（2H，s，-OCH2O-），5.95（2H，s，-OCH2O-），4.82（1H，d，J=6.2 Hz，H-7），4.07（1H，dd，J=8.5，6.7 Hz，Ha-9'），3.92（1H，dd，J=10.7，7.0 Hz，Ha-9），3.78（2H，m，Hb-9，9'），2.90（1H，dd，J=14.0，5.3 Hz，Ha-7'），2.72（1H，m，Hb-7'），2.55（1H，dd，J=13.4，10.6 Hz，H-8），2.39（1H，m，H-8'）；13C NMR（100 MHz，CDCl3）δ:147.8（s，C-3），147.7（s，C-4），146.8（s，C-3'），145.9（s，C-4'），137.0（s，C-1'），134.1（s，C-1），121.4（d，C-6'），119.0（d，C-6），108.9（d，C-5'），108.3（d，C-5），108.0（d，C-2'），106.2（d，C-2），101.0（t，3-OCH2O-4），100.9（t，3'-OCH2O-4'），82.8（d，C-7），72.9（t，C-9'），60.8（t，C-9），52.6（d，C-8），42.3（d，C-8'），33.2（t，C-7'）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)〔12〕的波譜數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定該化合物為雙氫芝麻素。

化合物4：淡黃色無定形粉末；C30H22O10；ESIMS m/z 431〔M-H〕-；1H NMR（400 MHz，acetone-d6）δ：11.98（2H，s，5，5′′-OH），7.13（4H，d，J=8.4 Hz，H-2′，6′，2′′′，6′′′），6.85（4H，d，J=8.4 Hz，H-3′，5′，3′′′，5′′′），5.94（2H，d，J=1.8 Hz，H-8，8′′），5.83（2H，d，J=1.8 Hz，H-6，6′′），5.06（2H，brs，H-2，2′′），3.81（2H，brs，H-3，3′′）；13C NMR（100 MHz，acetone-d6）δ：196.5（s，C-4，4′′），167.8（s，C-7，7′′），165.3（s，C-5，5′′），164.0（s，C-9，9′′），159.4（s，C-4′，4′′′），130.6（d，C-2′，6′，2′′′，6′′′），128.5（s，C-1′，1′′′），116.4（d，C-3′，5′，3′′′，5′′′），102.5（s，C-10，10′′），97.1（d，C-6，6′′），95.8（d，C-8，8′′），81.9（d，C-2，2′′），48.4（d，C-3，3′′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)〔13〕的波譜數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定該化合物為異新狼毒素A。

化合物5：褐色無定形粉末；C33H28O10；1H NMR（400 MHz，CDCl3）δ：11.96（1H，s，-OH），11.92（1H，s，-OH），7.06（4H，d，J=8.2 Hz，H-2′，6′，2′′′，6′′′），6.90（4H，d，J=8.1 Hz，H-3′，5′，3′′′，5′′′），6.08（1H，d，J=2.2 Hz，H-6′′），5.99（1H，d，J=1.8 Hz，H-6），5.97（1H，d，J=2.2 Hz，H-8′′），5.88（1H，d，J=1.8 Hz，H-8），5.97（2H，d，J=11.1 Hz，H-2，2′′），3.79（6H，s，4′，4′′′-OCH3），3.88（3H，s，7-OCH3），2.84（2H，d，J= 12.0 Hz，H-3，3′′）；13C NMR（100 MHz，CDCl3）δ：196.6（s，C-4′′），196.0（s，C-4），167.9（s，C-7′′），164.6（s，C-7），164.2（s，C-5′′），164.0（s，C-5），162.9（s，C-9′′），162.5（s，C-9），160.4（s，C-4，4′′），129.2（d，C-2′，6′，2′′′，6′′′），128.4（s，C-1′，1′′′），114.2（d，C-3′，5′，3′′′，5′′′），103.1（s，C-10′′），103.0（s，C-10），96.7（d，C-6′′），95.3（d，C-6），95.2（d，C-8′′），94.1（d，C-8），83.4（d，C-2，2′′），55.7（q，4′，4′′′-OCH3），55.4（q，7-OCH3），49.6（d，C-3，3′′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)〔14〕的波譜數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定該化合物為瑞香狼毒素B。

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*通信作者：何紅平，教授，博士.

（責(zé)任編輯 李 楊）

Chemical Constituents of Stellera chamaejasme

CHEN Jianyong1，2,LIU Guangming1,ZHANG Yu2,HAO Xiaojiang2,HE Hongping3*
（1.College of Pharmacy and Chemistry,Dali University,Dali,Yunnan 671000,China;2.State Key Laboratory of Phytochemistry and Plant Resources Sustainable Utilization in West China,Kunming Institute of Botany,Chinese Academy of Sciences,Kunming 650201, China;3.School of Pharmacy,Yunnan University of Traditional Chinese Medicine,Kunming 650500,China）

Objective:To research the chemical constituents ofStellera chamaejasme.Methods:The constituents were isolated from the plant by silica gel column chromatography,C18 reversed phase chromatography,Sephadex LH-20 gel filtration chromatography and HPLC.Their structures were elucidated by spectroscopic methods.Results:Five known compounds were isolated and identified as (2R,3S)-3-(3,4-dimethoxybenzyl)-2-(3,4-methylenedioxybenzyl)-butyrolactone(1),haplomyrfolin(2),dihydrosesamin(3), isoneochamaejasmine A(4)and ruixianglangdusu B(5),respectively.Conclusion:Compounds 1-3 were isolated from this plant for the first time.

Stellera chamaejasme;thymelaeaceae;chemical constituents

R284.1

A

1672-2345（2014）08-0001-03

10.3969∕j.issn.1672-2345.2014.08.001

云南省中青年學(xué)術(shù)技術(shù)帶頭人后備人才資助項(xiàng)目（2010CI047）

2014-04-21

2014-04-28

陳健勇，碩士研究生，主要從事天然藥物化學(xué)研究.