周英霞,趙福濤

(上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第三人民醫(yī)院風(fēng)濕免疫科，上海 201999)

系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus,SLE)是一類自身免疫性疾病,疾病的發(fā)生可能是由遺傳因素與環(huán)境因素復(fù)雜的交互作用導(dǎo)致[1]。遺傳易患性在SLE發(fā)生中起重要作用[2]。基因多態(tài)性可以作為一個(gè)強(qiáng)有力的預(yù)測(cè)工具來(lái)評(píng)估健康人患SLE的風(fēng)險(xiǎn)[2-3]。多項(xiàng)研究顯示，白細(xì)胞介素(interleukin,IL)21啟動(dòng)子區(qū)域多態(tài)性與哮喘、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、炎癥性腸病等炎癥性疾病有關(guān)[4]。其中IL-21基因多態(tài)性rs907715與SLE的發(fā)生密切相關(guān)[5]。然而，由于這些研究主要是以小樣本資料進(jìn)行的研究，結(jié)果存在較大的差異[6-7]。本研究擬用Meta分析方法，綜合目前有關(guān)該基因的研究結(jié)果，進(jìn)一步評(píng)估IL-21基因rs907715位點(diǎn)多態(tài)性與SLE的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1搜索符合的研究 檢索中國(guó)學(xué)術(shù)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù)(CNKI)、萬(wàn)方數(shù)據(jù)庫(kù)、中國(guó)生物醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)庫(kù)(CBM)、PubMed、Embase和Web of Knowledge數(shù)據(jù)庫(kù)，檢索時(shí)間為1997年1月至2013年12月。

1.2納入標(biāo)準(zhǔn) 納入文獻(xiàn)必須符合以下標(biāo)準(zhǔn)：①評(píng)價(jià)rs907715(G>A)多態(tài)性與SLE的風(fēng)險(xiǎn)之間的關(guān)聯(lián)；②病例對(duì)照研究；③提供詳細(xì)公布的數(shù)據(jù)為95%的置信區(qū)間(CI)估計(jì)的比值比(OR)；④SLE的診斷基于1997年美國(guó)風(fēng)濕病學(xué)會(huì)修訂的SLE分類標(biāo)準(zhǔn)中至少符合四個(gè)標(biāo)準(zhǔn)。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用Stata 11.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。對(duì)于同一研究中包括的不同種族，本研究分別提取數(shù)據(jù)。采用基因計(jì)數(shù)方法對(duì)每篇文獻(xiàn)中的IL-21多態(tài)性基因的頻率進(jìn)行計(jì)算，用χ2檢驗(yàn)分析對(duì)照組的H-W(Hardy-Weinberg)平衡。計(jì)算各研究等位基因及基因型頻率的OR值及95%CI。采用Q值統(tǒng)計(jì)量檢驗(yàn)法對(duì)各文獻(xiàn)結(jié)果進(jìn)行異質(zhì)性檢驗(yàn)，根據(jù)Ph值的結(jié)果進(jìn)行判斷，Ph值以0.10為界，P≥0.1為異質(zhì)性不顯著，P<0.10為異質(zhì)性顯著，當(dāng)Ph≥0.1時(shí)選擇固定效應(yīng)模型分析，Ph<0.10時(shí)按照隨機(jī)效應(yīng)模型進(jìn)行分析。各研究的效應(yīng)進(jìn)行加權(quán)合并，估計(jì)綜合效應(yīng)(合并OR值)及其95%CI。采用Egger線性回歸檢驗(yàn)來(lái)分析發(fā)表偏倚情況。

2 結(jié) 果

2.1納入研究的基本特征 初步檢索到30篇可能相關(guān)文獻(xiàn)，通過(guò)閱讀標(biāo)題和摘要排除了15篇文獻(xiàn)。由于不符合納入標(biāo)準(zhǔn)本研究排除了11項(xiàng)研究[9項(xiàng)病例對(duì)照?qǐng)?bào)告；2項(xiàng)不是針對(duì)rs907715(G>A)多態(tài)性]。共有4篇研究納入Meta分析(同一研究中包括的不同種族，本研究分別提取數(shù)據(jù))，包括7802例SLE病例和7907例健康對(duì)照[6-9]。所有研究特征見表1。所有納入研究的對(duì)照組數(shù)據(jù)滿足H-W平衡。

2.2IL-21 rs907715位點(diǎn)多態(tài)性與SLE關(guān)系的Meta分析 對(duì)IL-21基因rs907715位點(diǎn)總體研究的Meta分析結(jié)果見表2。等位基因G與A相比、AA與GG相比、GA與GG相比、AA+AG與GG相比、AA與GA+GG相比各研究間均無(wú)異質(zhì)性，所以采用固定效應(yīng)模型分析。發(fā)現(xiàn)A等位基因?qū)LE有保護(hù)效應(yīng)(OR=0.868,95%CI0.828～0.919)。此外，還觀察到同樣結(jié)果在純合子模型(AA vs GG,OR=0.740,95%CI0.628～0.871)、雜合子模型(GA vs GG,OR=0.838,95%CI0.753～0.970)、隱性模型(AA vs AG+GG,OR=0.830,95%CI0.721～0.954)和顯性模型(AG+AA vs GG,OR=0.818,95%CI0.726～0.922)，提示A等位基因?qū)LE有保護(hù)效應(yīng)。Egger檢驗(yàn)t=-0.27,P=0.799，各研究數(shù)據(jù)不存在發(fā)表偏倚。

表1 納入本研究的4篇病例對(duì)照研究文獻(xiàn)基本情況

表2 SLE組與健康對(duì)照組rs907715等位基因分布頻率的Meta分析結(jié)果

*與GG比較

3 討 論

IL-21是一種主要由CD4+T細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子，它影響體內(nèi)多種免疫細(xì)胞的穩(wěn)態(tài)[10]，包括影響CD4+T細(xì)胞的分化和功能，促進(jìn)B細(xì)胞的分化和增殖，增強(qiáng)CD8+T細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞的細(xì)胞毒作用以及抑制調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的產(chǎn)生，從而引起免疫亢進(jìn)，促進(jìn)SLE的發(fā)生、發(fā)展[5,11]。SLE患者的血清中也發(fā)現(xiàn)其IL-21的水平高于對(duì)照組，并且IL-21與SLE活動(dòng)性指數(shù)呈正相關(guān)[11]。因此，IL-21在炎癥和免疫反應(yīng)中的多種功能，提示其在SLE中起很重要的作用。而rs907715多態(tài)性表明IL-21的基因多態(tài)性影響的SLE的發(fā)生。然而,不同的研究所得結(jié)果存在一定一致性,但不盡相同[6-7]。

Meta分析能夠通過(guò)科學(xué)、系統(tǒng)的方法,將研究目的相同的多個(gè)研究結(jié)果進(jìn)行定量合并分析和綜合評(píng)價(jià),以提高統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)功效,解決研究結(jié)果不一致的問(wèn)題,使研究結(jié)論更全面可靠[12]。為此本研究用Meta分析方法評(píng)估IL-21基因多態(tài)性rs907715對(duì)SLE發(fā)病的影響?？偣?5 709項(xiàng)病例納入了Meta分析，發(fā)現(xiàn)攜帶等位基因A個(gè)體的SLE的發(fā)病率明顯下降。其中在純合子模型中(AA比GG)，顯示發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)率下降最明顯(OR=0.740，95%CI0.628～0.871)。

總之,經(jīng)Meta分析認(rèn)為rs907715 A等位基因是SLE患病的保護(hù)基因,在各類人群中的保護(hù)作用均有顯著性。本研究利用Stata軟件的綜合分析功能,合并國(guó)內(nèi)外各研究機(jī)構(gòu)的報(bào)道,克服了單個(gè)研究樣本量小的局限性,得出rs907715基因多態(tài)性與SLE之間關(guān)系的結(jié)論,為進(jìn)一步研究提供了科學(xué)依據(jù)。為了達(dá)到更確切的結(jié)論，還需要開展多中心、大樣本、同質(zhì)性的病例對(duì)照研究。

[1] Guerra SG,Vyse TJ,Cunninghame GD.The genetics of lupus:a functional perspective[J].Arthritis Res Ther,2012,14(3):211.

[2] Sestak AL,Furnrohr BG,Harley JB,etal.The genetics of systemic lupus erythematosus and implications for targeted therapy[J].Ann Rheum Dis,2011,70 Suppl 1:37-43.

[3] Connolly JJ,Hakonarson H.Role of cytokines in systemic lupus erythematosus:recent progress from GWAS and sequencing[J].J Biomed Biotechnol,2012,2012:798924.

[4] Maiti A K,Kim-Howard X,Viswanathan P,etal.Confirmation of an association between rs6822844 at the Il2-Il21 region and multiple autoimmune diseases:evidence of a general susceptibility locus[J].Arthritis Rheum,2010,62(2):323-329.

[5] Li J,Pan H F,Cen H,etal.Interleukin-21 as a potential therapeutic target for systemic lupus erythematosus[J].Mol Biol Rep,2011,38(6):4077-4081.

[6] Sawalha AH,Kaufman KM,Kelly JA,etal.Genetic association of interleukin-21 polymorphisms with systemic lupus erythematosus[J].Ann Rheum Dis,2008,67(4):458-461.

[7] Ding L,Wang S,Chen GM,etal.A single nucleotide polymorphism of IL-21 gene is associated with systemic lupus erythematosus in a Chinese population[J].Inflammation,2012,35(6):1781-1785.

[8] Hughes T,Kim-Howard X,Kelly JA,etal.Fine-mapping and transethnic genotyping establish IL2/IL21 genetic association with lupus and localize this genetic effect to IL21[J].Arthritis Rheum,2011,63(6):1689-1697.

[9] Leng RX,Wang W,Cen H,etal.Gene-gene and gene-sex epistatic interactions of MiR146a,IRF5,IKZF1,ETS1 and IL21 in systemic lupus erythematosus[J].PLoS One,2012,7(12):e51090.

[10] Ohl K,Tenbrock K.Inflammatory cytokines in systemic lupus erythematosus[J].J Biomed Biotechnol,2011,2011:432595.

[11] Sarra M,Franze E,Pallone F,etal.Targeting interleukin-21 in inflammatory diseases[J].Expert Opin Ther Targets,2011,15(6):695-702.

[12] Knobloch K,Yoon U,Vogt PM.Preferred reporting items for systematic reviews and meta-analyses (PRISMA) statement and publication bias[J].J Craniomaxillofac Surg,2011,39(2):91-92.