徐鋒,郭俊英
(福建醫(yī)科大學教學醫(yī)院福建省腫瘤醫(yī)院檢驗科,福建 福州350014)
為適應尿液沉渣分析儀標準化的要求,UF-1000i全自動尿沉渣分析儀綜合流式細胞原理、電阻抗法及熒光染色技術,定量檢測尿液中的有形成分。任何儀器都存在一定的檢測誤差且尿中有形成分復雜,勢必對紅細胞和白細胞檢測產(chǎn)生影響。但我們發(fā)現(xiàn)結(jié)晶、酵母樣菌、上皮細胞、黏液絲均導致儀器檢出錯誤[1],須結(jié)合鏡檢。為此,筆者隨機抽取1258例尿標本,比較UF-1000i和手工鏡檢結(jié)果,探討紅細胞和白細胞檢測的影響因素?,F(xiàn)報告如下。
1.1 標本來源 隨機收集1258例住院患者尿標本。
1.2 儀器和試劑 UF-1000i全自動尿沉渣分析儀,配套試劑及質(zhì)控物,均購自日本Sysmex株式會社。日本Olympus顯微鏡和一次性專用尿沉渣計數(shù)板。
1.3 檢測方法 用一次性塑料尿杯收集新鮮晨尿分成兩管,每管10ml,一管用于UF-1000i尿沉渣分析儀檢測,另一管以1500r/min離心5min,棄上清液,留 0.2ml,混勻后,取20μl滴入尿沉渣計數(shù)板,先用低倍鏡觀察全片,再用高倍鏡計數(shù)有形成分。所有標本均在2h內(nèi)檢測完畢。正常參考值:UF-1000i:紅細胞<25.0 個/μl、白細胞<25.0 個/μl;顯微鏡鏡檢:紅細胞<3個/HP,白細胞<5個/HP。
1.4 統(tǒng)計學方法 用SPSS16.0統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計分析。兩種方法檢測陽性率比較采用χ2檢驗,P<0.05時差異有統(tǒng)計學意義。
2.1 UF-1000i和手工鏡檢檢測紅細胞和白細胞結(jié)果比較 以鏡檢為標準,1258例樣本中UF-1000i檢測紅細胞陽性率、真陽性率、假陽性率分別為24.8%、57.6%、42.4%;白細胞陽性率、真陽性率、假陽性率分別為17.4%、74.8%、25.2%;手工鏡檢紅細胞、白細胞陽性率分別為15.0%、13.3%,兩種方法檢測紅細胞和白細胞陽性率經(jīng)χ2檢驗,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05),見表1。
表1 UF-1000i和手工鏡檢檢測紅細胞和白細胞結(jié)果比較
2.2 UF-1000i檢測紅細胞和白細胞假陽性結(jié)果影響因素分析 紅細胞假陽性增高:草酸鈣結(jié)晶占60.6%、非晶型鹽類占23.4%、酵母樣菌占16.0%;白細胞假陽性增高:腎小管上皮細胞占87.3%,細菌占12.7%,見表2。
表2 UF-1000i檢測紅細胞和白細胞假陽性結(jié)果影響因素
2.3 UF-1000i檢測紅細胞和白細胞假陰性結(jié)果影響因素分析 紅細胞假陰性增高:小紅細胞占66.7%、影細胞占33.3%;白細胞假陰性增高:尿潴留時間過長占75.0%、黃疸占25.0%,見表3。
表3 UF-1000i檢測紅細胞和白細胞假陰性結(jié)果影響因素
尿液有形成分檢查是尿液分析中不可缺少的重要內(nèi)容,UF-1000i尿沉渣分析儀因其無離心、簡單快速、重復性好、提供定量結(jié)果等優(yōu)點,在臨床廣泛應用[2]。但由于儀器本身的局限,如不能識別病理結(jié)晶、病理管型的具體類別及腫瘤細胞,當尿中有大量結(jié)晶、酵母樣菌、黏液絲等顆粒,常干擾檢測結(jié)果[3]。本研究表明,UF-1000i檢測尿紅細胞和白細胞存在假陽性或假陰性,主要的原因是尿中有形成分的干擾。
引起UF-1000i檢測尿紅細胞假陽性的因素是尿中有大量的結(jié)晶(主要是草酸鈣結(jié)晶)、非晶型鹽類、酵母樣菌。因紅細胞形態(tài)、大小、染色與結(jié)晶(尤其是草酸鈣結(jié)晶)、非晶型鹽類相似,在散點圖上有交叉分布,因此紅細胞計數(shù)呈假陽性增高[4]。酵母樣菌影響紅細胞的原因可能由于其在散點圖上分布介于RBC和WBC之間,雖然大部分情況下儀器可以區(qū)分酵母樣菌與紅細胞,但仍有和紅細胞重疊的情況,導致儀器分析錯誤[5]。引起UF-1000i檢測尿紅細胞假陰性的因素是紅細胞高度異形性,如小紅細胞和影細胞等。
引起UF-1000i檢測尿白細胞假陽性的原因主要為腎小管上皮細胞、細菌。因為白細胞的散射光、熒光強度及電阻抗信號,部分與腎小管上皮細胞重疊,而且白細胞大小、染色敏感度與腎小管上皮細胞相似,因此導致白細胞假陽性結(jié)果的增多[6]。由于染料對細菌膜的滲透性低,染色后熒光強度和前向散射光強度也較低,當尿中的細菌達到一定量時,相互聚集成團,其大小與白細胞相近,導致儀器誤認為白細胞。本研究僅有4例白細胞檢測假陰性,其中3例是尿液在膀胱潴留時間過長導致白細胞破壞,1例為黃疸標本,可能是由于膽紅素的顏色干擾白細胞的檢測[7]。
本文儀器法假陽性是相對于鏡檢法的陰性而言,而鏡檢法的結(jié)果相對于真實結(jié)果是存在假陰性的可能,只是非常少見,如尿中紅細胞和白細胞完全溶解時,鏡檢是看不到的,此時鏡檢法的陰性即為相對于真實結(jié)果的假陰性。當紅細胞和白細胞完全溶解時,UF-1000i是否能檢測到尿中兩者存在,對此問題有待進一步研究。
引起UF-1000i與手工鏡檢不符的原因主要是方法學差異。UF-1000i檢測未離心標本,檢測量為800μl,且線性范圍寬,而手工鏡檢為離心標本,鏡檢量小于200μl,以及檢驗人員主觀經(jīng)驗等都導致白細胞計數(shù)偏低。因此,出現(xiàn)UF-1000i檢測陽性而手工鏡檢陰性的情況。
綜上所述,UF-1000i尿沉渣分析儀是目前用于測定尿液有形成分的先進儀器,由于檢測結(jié)果假陽性或假陰性的客觀存在,因此,必須結(jié)合手工鏡檢,以確保尿液紅細胞、白細胞檢測結(jié)果的可靠。
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