覃喜軍涂冬萍黃 杰馬小軍,韋榮昌,莫長明潘麗梅. 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院, 北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院藥用植物研究所（北京 0093）；. 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所廣西分所; 3 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所云南分所; 廣西中醫(yī)藥大學(xué)

8-OH-DPAT、達泊西汀和甲基安非他明對雄性大鼠性行為的影響

覃喜軍1涂冬萍1黃 杰2,4馬小軍1,3*韋榮昌1,2莫長明2潘麗梅2
1. 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院, 北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院藥用植物研究所（北京 100193）；2. 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研
究所廣西分所; 3 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所云南分所; 4 廣西中醫(yī)藥大學(xué)

目的探討3種試劑8-OH-DPAT、達泊西汀和甲基安非他明對雄鼠性行為的影響。方法將120只具有射精經(jīng)歷的雄鼠隨機分為 4組，每組30只，分別為對照組、8-OH-DPAT、達泊西汀和甲基安非他明給藥組。分別給予雄鼠注射生理鹽水、8-OH-DPAT（0.5mg/kg、1.0mg/kg、2.0mg/kg 腹腔注射）、達泊西?。?0mg/kg、45mg/kg、60mg/kg 腹腔注射）、甲基安非他明（0.5mg/kg、1.0mg/kg、2.0mg/kg 腹腔注射）一次，注射時間分別為實驗前20min、1h、15min。然后與發(fā)情良好的雌鼠1:1合籠，用攝像機錄像觀察并記錄他們發(fā)生性行為特征指標(biāo)。各組實驗重復(fù)3次。結(jié)果與對照組相比，0.5mg/kg、1.0mg/kg 8-OH-DPAT有顯著性差異（P＜0.05），減小騎跨、插入、射精潛伏期及射精后間隔期，增加射精次數(shù)和提高交配效率，進而促進雄鼠性行為。達泊西汀各劑量組均對雄鼠射精有顯著性的抑制作用（P＜0.05），延長射精潛伏期及射精后間隔期，減少射精次數(shù)及降低交配效率。0.5mg/kg安非他明對雄鼠性行為有顯著性的促進作用（P＜0.05），減小騎跨、插入潛伏期和射精后間隔期，增加射精次數(shù)，但1.0mg/kg安非他明延緩雄鼠射精，而到2.0mg/kg時幾乎完全抑制雄鼠性行為。結(jié)論 5-HT1A受體激動劑8-OH-DPAT促進雄鼠射精。選擇性5-HT再攝取抑制劑（SSRI）達泊西汀延遲射精的發(fā)生，可用于早泄的治療。精神興奮劑甲基安非他明對性行為的影響與劑量有關(guān)。

8-OH-DPAT; 達泊西汀; 甲基安非他明; 大鼠; 性行為, 動物

5-羥色胺受體激動劑和選擇性5- 羥色胺再攝取抑制劑（SSRI ）類抗抑郁藥無論是對男性射精障礙還是兩性性高潮都有明顯的作用和影響[1]。8-OH-DPAT是5-羥色胺1A受體特異性激動劑。8-OH-DPAT減少雄鼠插入次數(shù)和減小射精潛伏期，促進雄性雄鼠射精[2-4]。其作用機制尚不明確，已知8-OH-DPAT刺激（突觸前，抑制性）5-羥色胺1A受體，可阻礙5-羥色胺釋放進入突觸，促進射精[5]。達泊西汀是一個新型短效的選擇性5-羥色胺再攝取抑制劑（SSRI），用于治療早泄。該藥物的作用機制被認(rèn)為是神經(jīng)元的5-羥色胺再攝取抑制及5-羥色胺的活性增強[6]。達泊西汀具有獨特的藥代動力學(xué)和藥效學(xué)特點，在很短的時間內(nèi)（大約1h）血藥濃度達到最大，且迅速消除（30mg和60mg初始半衰期為1.2h），過24h后其血藥濃度小于峰值的5%[7]。當(dāng)早泄的男性慢性服用達泊西汀時，射精延遲[8]。甲基安非他明，即甲基苯丙胺，俗稱“冰毒”，是一種高度上癮的精神興奮劑。據(jù)吸毒者的報告認(rèn)為注射或者吸食冰毒會增強性欲、性喚起和性快感[9-11]。然而，長期吸取冰毒也可以導(dǎo)致男性性功能下降，結(jié)果導(dǎo)致無法完全勃起，射精和性高潮延遲[12,13]。此外，冰毒的濫用通常與抑制性行為或者性沖動有關(guān)[9,14]，以及增加HIV感染有關(guān)[14,15]。最新的研究表明，低劑量的冰毒不會干擾性功能，但也許會導(dǎo)致性行為的不適應(yīng)[16]。這3種試劑都是與參與性行為調(diào)節(jié)最主要的兩種神經(jīng)遞質(zhì)多巴胺和5-羥色胺緊密聯(lián)系的。因此，研究這3種試劑的藥理對人類的生殖生理具有重要的意義。

雖然國外對這3種試劑影響性行為的研究已有些報道，但主要是在慢性給藥方面的研究，所用的劑量皆有不同，而一次性給藥對性行為是否有影響卻缺乏研究，而且國內(nèi)尚無中文文章報道此類研究內(nèi)容。因此，本實驗將這3種試劑進行一次性給藥，研究對雄鼠性行為是否影響以提供一定的醫(yī)學(xué)用藥依據(jù)及借鑒。

材料和方法

一、材料

（一）實驗動物

9周齡已具備射精能力雄鼠120只，平均體重（300±20）g，雌鼠120只，平均體質(zhì)量（220±20）g（北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司提供）。所有動物均分籠飼養(yǎng)于標(biāo)準(zhǔn)動物房，以國家標(biāo)準(zhǔn)嚙齒類動物飼料飼養(yǎng)，自由飲食，給予規(guī)律光照（12h:12h），室內(nèi)相對濕度45%～50%，室溫（22±2）℃。

（二） 藥品和器械

苯甲酸雌二醇2mg/mL、黃酮體20mg/mL（浙江仙琚制藥股份有限公司生產(chǎn)，藥品準(zhǔn)字號分別為H41021503和H41021493），8-OH-DPAT（8-hydroxydi-propylaminotetralin，sigma公司生產(chǎn)），達泊西汀(Dapoxetine，(+)-(S)-N, N-dimethyl-(a)-[2-(1-naphthalenyloxy) ethyl]-naphthalenyloxy) ethyl]-benzenemethanamine hydrochloride，Sigma公司生產(chǎn))，鹽酸甲基安非他明（Methamphetamine，中國藥品食品鑒定研究院提供）。高清晰數(shù)碼錄像系統(tǒng)（DVR H.264），行為學(xué)觀察籠（藥用植物研究所生理教研室自制），常規(guī)手術(shù)器械一套。

二、方法

（一）建立雌鼠發(fā)情模型

根據(jù)文獻給雌鼠進行去勢手術(shù)。在雌鼠去勢手術(shù)2周后，分別在交配實驗前48h和4h皮下注射苯甲酸雌二醇（estradiol benzoate）20μg 和黃體酮（progesterone）500μg（分別以0.1mL的香麻油溶解，并且混合后在60℃水浴加熱1h）來誘導(dǎo)雌鼠發(fā)情[17,18]。

（二）性行為觀察

實驗隨機分為4個組：8-OH-DPAT組、達泊西汀組、安非他明組和對照組。時間安排在晚上19：00～22：00，行為觀察室用紅色的燈光照明，調(diào)好燈光和錄像。給予雄鼠交配前20min腹腔注射8-OH-DPAT（0.5mg/kg、1mg/kg、2mg/kg）；1h腹腔注射達泊西?。?0mg/kg、45mg/kg、60mg/kg）；15min腹腔注射甲基安非他明（0.5mg/kg、1mg/kg、2mg/kg）；對照組注射生理鹽水，各組均注射1次。將雄鼠放入觀察籠適應(yīng)15min，然后將已發(fā)情良好的雌鼠輕輕地放入籠中（1:1合籠），觀察其在40min內(nèi)的交配行為（如雄鼠10min后還無性行為不作記錄）。參考Anders和Lumley等文獻，主要觀察并記錄各組雄鼠的騎跨潛伏期（Mounting Latency, ML）、插入潛伏期（Intromission Latency, IL）、射精潛伏期（Ejaculation Latency, EL）、射精后間隔期（post ejaculatory interval latency, PEI）、騎跨次數(shù)（Mounting Frequency, EF）、插入次數(shù)（Intromission Frequency, IF）、射精次數(shù)（Ejaculation Frequency, EF）和交配效率（Copulation efficiency，射精次數(shù)/插入次數(shù)）[17,19]。各組實驗重復(fù)3次。綜合Anders、Lumley和田二坡等實驗，對雄鼠性行為特征如下描述：騎跨，雄鼠嗅雌鼠的肛門生殖器區(qū)，然后騎跨雌鼠但陰莖還無插入或第一次插入雌鼠陰道；插入，雄鼠陰莖插入雌鼠陰道，此時雄鼠的背成弓形，前爪緊緊抱著雌鼠的背部，插入一次或連續(xù)兩次后下來，動作迅速，多次插入，每次插入后都會舔自己的陰莖；射精，多次插入后，雄鼠出現(xiàn)劇烈的顫動及陰莖深入插入，前肢緊緊抱著雌鼠過程持續(xù)達數(shù)秒鐘然后慢慢張開，下來后會趴著不動；射精后雄鼠會有一個長達數(shù)分鐘的不應(yīng)期[17-19]。

三、統(tǒng)計學(xué)分析

結(jié) 果

一、8-OH-DPAT對雄鼠性行為的影響

由表1可知，與對照組相比，腹腔注射0.5mg/kg、1mg/kg 8-OH-DPAT均使雄鼠騎跨潛伏期、插入潛伏期和射精潛伏期顯著性地縮短，騎跨次數(shù)和插入次數(shù)減少，雄鼠射精次數(shù)與對照組相比增加了一倍，交配效率也提高了將近一倍，各組射精后間隔期都無顯著性差異。然而2mg/kg 8-OH-DPAT組的雄鼠騎跨次數(shù)明顯地減少，射精潛伏期和射精后間隔期減小，其他卻無明顯的差異。

二、達泊西汀對雄鼠性行為的影響

由表2可知，與對照組相比，60mg/kg達泊西汀對雄鼠性行為的影響最為顯著：延長騎跨、插入、射精潛伏期和射精后間隔期，減少射精次數(shù)，而騎跨和插入次數(shù)無明顯影響。但是30mg/kg、45mg/kg、60mg/kg達泊西汀均使雄鼠交配效率降低了。

表2 各組雄鼠注射達泊西汀后性行為的比較

三、甲基安非他明對雄鼠性行為的影響

由表3可知，與對照組相比，0.5mg/kg甲基安非他明促進雄鼠性行為，騎跨、插入和射精潛伏期、射精后間隔期都有明顯的縮短，騎跨和射精次數(shù)增加。隨著劑量加大，安非他明會抑制雄鼠性行為，1.0mg/kg的劑量使雄鼠射精潛伏期明顯延長，而到2.0mg/kg劑量時，雄鼠幾乎不會和雌鼠發(fā)生交配行為。此外，對照、0.5mg/kg、1.0mg/kg 3個組的雄鼠交配效率均沒有顯著性差異。

表3 各組雄鼠注射甲基安非他明后性行為的比較

討 論

8-OH-DPAT是5-羥色胺1A受體激動劑的一種。5-HT是一種重要的單胺神經(jīng)遞質(zhì)，其和另外一種神經(jīng)遞質(zhì)多巴胺似乎都參與調(diào)節(jié)性高潮及兩性動物的性行為，5-羥色胺似性行為的剎車[5]。關(guān)于8-OH-DPAT相關(guān)的研究已有些報道，8-OH-DPAT（0.25mg/kg S.C.）減少雄鼠射精前插入次數(shù)和縮短射精潛伏期而促進性行為[20]。如果直接向雄鼠內(nèi)側(cè)視前區(qū)進行顯微注射8-OH-DPAT，也會減小騎跨、射精潛伏期和射精后間隔期[3]。本實驗表明8-OH-DPAT（0.5mg/kg、1mg/kg 腹腔注射）對雄鼠射精行為具有顯著性的影響，通過減少射精前插入次數(shù)、數(shù)量和射精潛伏期從而促進雄鼠射精，且提高了交配效率，而劑量2.0mg/ kg時，與對照組相比，除了騎跨次數(shù)射精潛伏期和射精后間隔期外，其余各項都無明顯差異。由此可知，隨著劑量的增大，8-OH-DPAT的藥效作用效果反而會減小。

使用選擇性5-羥色胺重攝取抑制劑（SSRIs）將提高突觸內(nèi)5-羥色胺水平抑制射精，可能還抑制性驅(qū)力[21]，由此SSRIs類藥物常用于臨床治療早泄。目前我們實驗數(shù)據(jù)表明，在給予正常雄鼠腹腔注射60mg/kg達泊西汀后，雄鼠性行為表現(xiàn)為：騎跨、插入、射精潛伏期及射精后間隔期延長，射精次數(shù)減少。2012年Clement等給予早泄模型雄鼠急性口服300mg/kg達泊西汀，首次證明了達泊西汀急性療效可以延遲早泄的雄鼠射精，此外還發(fā)現(xiàn)達泊西汀延緩射精的作用與降低射精相關(guān)腦部網(wǎng)絡(luò)的神經(jīng)元活動有關(guān)，如Fos表達[8]。達泊西汀通過抑制5-HT轉(zhuǎn)運體，能有效地抑制5-HT攝取，提高突觸間隙5-HT濃度，從而抑制射精。但是臨床試驗發(fā)現(xiàn)達泊西汀對患者有不良反應(yīng)，多數(shù)是中度[22]。由此看來，本組實驗的雄鼠在注射達泊西汀后，交配效率降低可能是此原因造成的。

由安非他明實驗可知，雄鼠交配前15min腹腔注射一次，0.5mg/kg低劑量促進雄鼠射精，表現(xiàn)為騎跨、插入、射精潛伏期和射精后間隔期減小，然而隨著劑量加大，1.0mg/kg安非他明具有明顯的抑制性行為作用，到2.0mg/kg時，雄鼠幾乎不會與雌鼠發(fā)生交配行為，而低劑量安非他明對雄鼠陰莖勃起、騎跨和插入次數(shù)無影響作用。Frohmader等[16]的研究已表明，在交配實驗前30min腹腔注射安非他明會降低雄鼠交配數(shù)量及減小性行為起始潛伏期。給予無性經(jīng)歷的雄鼠反復(fù)注射d-amphetamine（1.5mg/kg，IP）10次，3周注射藥后，經(jīng)過處理的雄鼠表現(xiàn)為騎跨、插入潛伏期縮短及交配比率升高，發(fā)生性行為加速[23]。另外，Meth使用者（男性或女性）報告稱吸食冰毒可增強性欲、性奮和性快感[9]。甲基安非他明增加多巴胺的傳遞是通過阻斷多巴胺轉(zhuǎn)運及增加囊泡多巴胺的釋放來實現(xiàn)的，然而安非他明劑量越大，就會產(chǎn)生過多的多巴胺，反而會抑制雄鼠性行為[16]。因此，在一次性注射2.0mg/kg安非他明后，幾乎所有雄鼠都不與雌鼠發(fā)生性行為。

綜上所述，8-OH-DPAT促進雄鼠發(fā)生性行為，達泊西汀延遲雄鼠射精，而劑量低的甲基安非他明促進雄鼠性行為，劑量大則會抑制性行為。

1 Modell JG, Katholi CR, Modell JD, et al. Comparativesexual side effects of buproprion, f uoxetine, paroxetine and sertraline.Clin Pharmacol Ther1997; 61(4): 476-487

2 Hillegaart V, Ahlenius S. Facilitation and inhibition of male rat ejaculatory by the respective 5-HT1A and 5-HT1B receptor agonists 8-OH-DPAT and anpirtoline, as evidenced by use of the corresponding new and selective receptor antagonists NAD-299 and NAS-181.Br J Pharmacol1998; 125(8): 1733-1743

3 Matuszewich L, Lorrain DS, Trujillo R,et al. Partial antagonism of 8-OH-DPAT’S effects on male rat sexual behavior with a D2, but not a 5-HT1A, antagonist.Brain Res1999; 820(1-2): 55-62

4 Clement P, Bernabe J, Kia HK,et al.D2-like receptors mediate the expulsion phase of ejaculation elicited by 8-Hydroxy-2-(di-N-propylamino) tetralin in rats.J Pharmacol Exp Ther2006; 316(2): 830-834

5 Barry R Komisaruk, Carlos Beyer-Flores & Beverly Whipple. The science of orgasm. The Jones Hopkins University Press, 2006

6 Gengo PJ, Giuliano F, McKenna K,et al. Monoaminergic transporter binding and inhibition prof le of dapoxetine, a medication for the treatment of premature ejaculation.J Urol2005; 173 (Suppl 4): 239

7 Modi NB, Dresser MJ, Simon M,et al. Singleand multiple-dose pharmacokinetics of dapoxetine hydrochloride, a novel agent for the treatment of premature ejaculation.J Clin Pharmacol2006; 46(3): 301–309

8 Clement P, Laurin M, Compagnie S,et al. Effect of dapoxetine on ejaculatory performance and related brain neuronal activity in rapid ejaculator rats.J Sex Med2012; 9(10): 2562-2573

9 Green AI, Halkitis PN. Crystal methamphetamine and sexual sociality in an urban gay subculture: an elective aff nity.Cult Health Sex2006; 8(4): 317-333

10 Schilder AJ, Lampinen TM, Miller ML,et al. Crystal methamphetamine and ecstasy differ in relation to unsafe sex among young gay men.Can J Public Health2005; 96(5): 340-343

11 Semple SJ, Patterson TL, Grant I. Motivations associated with methamphetamine use among HIV men who have sex with men.J Subst Abuse Treat2002; 22(3): 149-156

12 Frosch D, Shoptaw S, Huber A,et al. Sexual HIV risk among gay and bisexual male methamphetamine abusers.J Subst Abuse Treat1996; 13(6): 483-486

13 Peugh J, Belenko S. Alcohol, drugs and sexual function: a review.J Psychoactive Drugs2001; 33(3): 223-232

14 Halkitis PN, Parsons JT, Stirratt MJ. A double epidemic: crystal methamphetamine drug use in relation to HIV transmission among gay men.J Homosex2001; 41(2): 17-35

15 Parsons JT, Halkitis PN. Sexual and drug-using practices of HIV-positive men who frequent public and commercial sex environments.AIDS Care2001; 14(6): 815-826

16 Frohmader KS, Bateman KL, Lehman MN,et al.Effects of methamphetamine on sexual performance and compulsive sex behavior in male rats.Psychopharmacology (Berl)2010; 212(1): 93-104

17 Agmo A. Male rat sexual behavior.Brain Res Brain Res Protoc1997; 1(2): 203-209

18 田二坡, 龍廷, 秦達念. 雄性大鼠交配實驗?zāi)Ｐ偷慕?中國男科學(xué)雜志 2008; 22(1) : 7-10

19 Lumley LA, Hull EM. Effects of a D1 antagonist and of sexual experience on copulation-induced Fos-like immunoreactivity in the medial preoptic nucleus.Brain Res1999; 829(1-2): 55-68

20 Ahlenius S, Larsson K. Antagonism by pindolol, but not betaxolol, of 8-OH-DPAT-induced facilitation of male rat sexual behavior.J Neural Transm1989; 77(2-3): 163-170

21 Cantor JM, Binik YM , Pfaus JG. Chronic fluoxetine inhibits sexual behavior in the male rat: reversal with oxytocin.Psychopharmacology(Berl)1999; 144(4): 355-362

22 易培訓(xùn). 鹽酸達泊西汀治療早泄的臨床研究進展. 中國新藥雜志 2007; 16(24): 2008-2011

23 Dennis F. Fiorino, Anthony G. Philips. Facilitation of sexual behavior in male rats following d-amphetamineinduced behavioral sensitization.Psychopharmacology (Berl)1999; 142(2): 200-208

（2014-05-20收稿）

Effects of 8-OH-DPAT, dapoxetine and methamphetamine on sexual behaviors of male rats

Qin Xijun1, Tu Dongping1, Huang Jie2,3, Ma Xiaojun1*, Wei Rongchang1,2, Mo Changming2, Pan Limei2
1. Institute of Medicinal Plant Development, Chinese Academy of Medical Science , Peking Union Medical College, Beijing 100193, China; 2 Guangxi Branch of Institute of Medicinal Plant Development, Chinese Academy of Medical Science; 3. Yunnan Branch of Institute of Medicinal Plant Development, Chinese Academy of Medical Science; 4 Guangxi University of Chinese Medicine

Ma Xiaojun, mayixaun10@163.com

ObjectiveTo investigate the effects of 8-OH-DPAT,Dapoxetine and Methamphetamine on sexual behavior of male rats.MethodsOne hundred and twenty adult male rats who have experienced ejaculation were divided into four groups includingthe control(30 rats), 8-OH-DPAT group(30 rats), Dapoxetine group(30 rats) and Methamphetamine groups(30 rats), rats in which group respectively received one time injection of 0.9% sodium chloride, 8-OH-DPAT (0.5mg/ kg, 1.0mg/kg, 2.0mg/kg S.C.), Dapoxetine (30mg/kg, 45mg/kg, 60mg/kg S.C.), Methamphetamine (0.5mg/kg, 1.0mg/kg, 2.0mg/kg), and the injection time points were set at 20min, 1h, 15min before experiment. Then male rats were lived with good estrus female mate, sex characteristic index was recorded by a video camera. Each group experiment was repeatedthree times.ResultsCompared with control group, 0.5mg/kg and 1.0mg/kg 8-OH-DPAT by intravenous injection both existed in signif cant difference (P<0.05). They produced facilitation of the male rat sexual behavior, characterized by a decrease in mount, intromission, ejaculation latency and post-ejaculatory interval, by increase in ejaculation frequency and improvement in copulation eff ciency; All doses of Dapoxetine had signif cant inhibition to ejaculation in male rats (P<0.05), as evidenced by extension in ejaculation latency and post-ejaculatory interval, reduction in ejaculation frequency and copulation eff ciency; Methamphetamine (0.5mg/kg S.C.) promoted remarkably sexual behavior in male rats (P<0.05), as observed by decrease in mount, intromission, ejaculation latency and post-ejaculatory interval, increase in mount and ejaculation frequency. However, 1.0mg/kg Methamphetamine delayed ejaculation and 2.0mg/kg Methamphetamine almost completely inhibited sexual behavior in male rats.ConclusionThe agonist of 5-HT1A 8-OH-DPAT facilitates and serotonin reuptake inhibitor (SSRI) dopoxetine delays ejaculation in male rat, which the latter can be used for treatment in premature. The effects of psychostimulant Meth amphetamine on sexual behavior in male rat are does-dependent.

8-OH-DPAT; Dapoxetine; Methamphetamine; rats; sexual behavior, animal

10.3969/j.issn.1008-0848.2014.09.002

R 339.2

*通訊作者, E-mail: mayixaun10@163.com