多凱等

摘要：目的：利用近紅外漫反射光譜技術(shù)快速測定鹽酸維拉帕米片的含量。方法：采集鹽酸維拉帕米片NIR光譜，采用偏最小二乘法（（PLS）進行回歸，通過建立NIR光譜與理論測定值之間的多元校正模型，測定定鹽酸維拉帕米片的含量。結(jié)果：定量分析模型濃度范圍為32.8-48.0%（mg/mg）；內(nèi)部交叉驗證均方差（RMSECV）為0.668，決定系數(shù)（R2）為0.9860；外部驗證均方差（RMSEP）為0.553，決定系數(shù)（R2）為0.9902。結(jié)論：該方法準確可靠、快速簡便，可以滿足快速檢測的需要。

關(guān)鍵詞：近紅外光譜 鹽酸維拉帕米片 定量分析

中圖分類號：R927 文獻標識碼：A 文章編號：1672-5336（2014）06-0036-02

Abstract：Objective：To rapidly determine verapamil hydrochloride in verapamil hydrochloride tablets.Methods： NIR spectra of verapamil hydrochloride tablets were collected.On the basis of partial least squares（PLS） regression，the multivariant corrected model between the NIR spectra and theoretial values was established to evaluate the content of verapamil hydrochloride tablets.Results ：The concentration range of the quantitative analysis model was between 32.8-48.0%（mg/mg）.The mean square error of cross validation （RMSECV） was 0.668.the coefficient of determination （R2）was 0.9860.The mean square error of cross prediction （RMSEP） was 0.553.The average absolute deviation was 0.9902.Conclusion ：The method determining verapamil hydrochloride by NIR is accurate，rapid and simple.

Key Words：NIR （Near Infrared Spectrum Verapamil Hydrochloride Teblets quantitative analysis

維拉帕米（Verapamil）又名異搏定，是德國Knoll公司1963年研制成功的一種鈣通道阻滯劑，在1962年被當作冠脈擴張劑?，F(xiàn)今仍是治療高血壓的基礎(chǔ)藥品被國家基本藥物目錄收錄。還有抑制心肌及房室傳導(dǎo)、減慢心率、降低心肌耗氧量和逆轉(zhuǎn)腫瘤對某些藥物的抗藥性等藥理作用[1]。國內(nèi)生產(chǎn)企業(yè)鹽酸維拉帕米片的含量測定方法常為高效液相色譜法，該方法前處理繁瑣，時間長，不適用于現(xiàn)場快速檢測，而近紅外光譜分析技術(shù)具有無破壞、分析快、用量少等特點，在藥物現(xiàn)場檢查領(lǐng)域的得到廣泛的應(yīng)用[2-3]。本文利用近紅外漫反射技術(shù)結(jié)合化學(xué)計量法建立鹽酸維拉帕米片的定量分析模型，大大提高了分析效率，節(jié)約了分析成本，為鹽酸維拉帕米片的質(zhì)量控制提供了簡便、快速、可靠的分析方法。

1 實驗部分

1.1 儀器和試劑

安捷倫公司Agilent1100液相色譜儀（配有4元梯度泵、紫外、自動進樣）；Dikama Diamonsil C18色譜柱（4.6mm×250mm，5μm）；紫外檢測器。Matrix—F型傅立葉變換近紅外分光光度計（布魯克公司）。分析軟件為OPUS 5.0。所用試劑均為分析純。

1.2 樣品制備

取三個廠家生產(chǎn)的鹽酸維拉帕米片（天津中央藥業(yè)有限公司；上海信誼制藥有效公司；廣東華南制藥有限公司；該三個廠家生產(chǎn)的片劑為薄膜衣片）100批次（每批的含量使用HPLC方法測得），將上述100批樣品隨機分成兩組，一組為校正集75批，另一組為驗證集25批。樣品的質(zhì)量百分比濃度在32.8%～48.0%之間。

1.3 鹽酸維拉帕米片的NIR法測定

用光纖探頭直接抵住樣品，掃描范圍在4000～12000cm-1，測其近紅外光譜。采用儀器內(nèi)置背景做為參比，掃描次數(shù)32，次默認分辨率為8cm-1。每批樣品選取6片進行掃描，并通過軟件計算平均光譜后用來建模。

2 結(jié)果與討論

2.1 光譜預(yù)處理的方法選擇[4]

使用OPUS 5.0自帶的自動優(yōu)化功能，對校正集的75批樣品進行外部驗證法，以校正樣品集的交互驗證均方根誤差（RMSECV）選擇最佳主成分數(shù)，考察主成分數(shù)對RMSECV值的影響，當RMSECV值最小時，所選主成分數(shù)為最佳。每個模型有最小的RMSECV值，當主成分數(shù)繼續(xù)增加時，該值呈現(xiàn)上升趨勢，之后減小，由此選出的最佳維數(shù)為4。

2.2 定量分析模型的建立

樣品通過使用HPLC法測定含量，再采用偏最小二乘回歸法建立質(zhì)量百分比濃度與吸收強度之間的線性關(guān)系，使用儀器軟件進行內(nèi)部交叉驗證均方差（RMSECV）和驗證集樣品的預(yù)測均方差（RMSEP）及其相關(guān)系數(shù)（R2）值之間的比較，優(yōu)化掃描區(qū)間，比較處理后，選擇最佳的掃描區(qū)間和光譜預(yù)處理方法為“一階導(dǎo)數(shù)+矢量歸一化”，相關(guān)數(shù)據(jù)見表1。

2.3 近紅外定量分析模型的驗證

為評價建立的定量模型的適用性，對收集的數(shù)據(jù)分別進行內(nèi)部交叉驗證和外部交叉驗證，并對驗證集樣品用優(yōu)化后的模型進行測定，結(jié)果見表2。25批驗證集樣品的平均預(yù)測偏差值為0.19，最大值為1.23（折算為真實值的百分率為2.26%），驗證結(jié)果表明本模型的具有良好的準確度。

3 結(jié)語

由于不同廠家之間輔料純在較大的差異，最初設(shè)定的全波長范圍掃描所制定的模型無法得到較好的線性關(guān)系，故此，確定掃描范圍在12000～8000 cm-1鹽酸維拉帕米吸收較強的區(qū)間，通過使用儀器在進行驗證優(yōu)化確定最終的樣品掃描區(qū)間范圍。

本模型的建立，顯著提高了鹽酸維拉帕片含量的檢測速度，也為藥品的近紅外快速檢驗工作提供了一個方便快捷的分析模型，該模型的內(nèi)部驗證和外部驗證都得到了較好的實驗結(jié)果，可滿足對鹽酸維拉帕米片進行快速定量分析的目的。

參考文獻

[1]Pepine CJ，et al. Verapamil use in patients with cardiovascular disease： an overview of randomized trials. Clin Cardiol 1988，21（9）：663.

[2]鄧芳.HPLC法測定鹽酸維拉帕米片的溶出度[J].臨床合理用藥雜志，2013，20.

[3]張振杰，王曉宇.高效液相色譜法測定注射用鹽酸維拉帕米的含量[J].中國藥業(yè)，2007，16（9）：18-19.

[4]黃海，武洋.近紅外光譜法快速測定卡托普利片的含量[J].中國藥事，2011，25（7）：695-697.