鄺陽勇

【摘要】目的：對(duì)單味中藥及其復(fù)方的抑制真菌的最小濃度進(jìn)行試驗(yàn)測(cè)定。方法：以試管內(nèi)藥基法對(duì)單味中藥及其復(fù)方進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究，對(duì)它們對(duì)常見真菌的抑制效果進(jìn)行測(cè)定評(píng)價(jià)。結(jié)果：大風(fēng)子、川椒、皂角對(duì)真菌的抑制作用最強(qiáng)，復(fù)方組抑菌最小濃度為0.625%，效果好于單味中藥。結(jié)論：大風(fēng)子、皂角、川椒等對(duì)皮膚癬菌具有明顯的抑制效果，復(fù)方的抑菌效果優(yōu)于單味中藥，中藥之間具有協(xié)同作用。

【關(guān)鍵詞】中藥；復(fù)方；抗真菌；最小濃度

【中圖分類號(hào)】R28 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B【文章編號(hào)】1004-4949（2014）04-0037-02

隨著器官移植、器官插管的不斷開展，廣譜抗生素、甾體抗生素在臨床上的大量使用，一些免疫障礙類疾病的大量出現(xiàn)，使得真菌感染的情況迅速增加[1] 。床上使用的抗真菌藥物也不斷增加，但是因?yàn)榭拐婢幬锏哪退巻栴}及毒副作用的問題對(duì)其廣泛推廣應(yīng)用產(chǎn)生了影響[2]。而中藥具有來源廣、毒副作用小、不容易出現(xiàn)耐藥性、價(jià)格低等優(yōu)點(diǎn)，使得抗真菌中藥的研究具有比較好的發(fā)展前景[3]。手足癬是臨床上常見行淺部真菌病，該病的致病菌種主要有石膏樣毛癬菌、紅色毛癬菌、白色念球珠菌等[4]。本文對(duì)臨床上常用來治療手足癬的10種單味中藥及其復(fù)方進(jìn)行研究，以試管內(nèi)藥基法，測(cè)定其抑制真菌的最小濃度，報(bào)道如下：

1資料與方法

1.1 一般資料

菌種：白色念珠菌、紅色毛癬菌、石膏樣毛癬菌。

菌液制作：用接種鉤挑選適量菌種放入生理鹽水，再經(jīng)研磨制成混懸液。在血細(xì)胞計(jì)數(shù)板上對(duì)菌液濃度進(jìn)行調(diào)節(jié)，濃度一般為5×105CFU/ML。

藥液制備：取大風(fēng)子、川椒、皂角、蛇床子、百部、大黃、地骨皮、苦參、黃柏、白鮮皮各30g，各加水250ML煮沸15分鐘，將藥汁以紗布濾出。然后再加水250ML煮沸15分鐘，將兩次煮出的藥汁兌再一起，進(jìn)行加熱濃縮至50ML，得100%藥液。

其他儀器：蛋白胨、蒸餾水、瓊脂、葡萄糖、氯霉素、加樣器、試管、恒溫箱、高壓消毒鍋、微量天平、顯微鏡、5ML注射器、20ML注射器等。

單味中藥的實(shí)驗(yàn)方法：制備常規(guī)沙氏瓊脂培養(yǎng)基，注入系列試管，每管4ML，取140支試管，為1-140支。以5ML的注射器抽取2ML100%藥液注入試管1ML，得20%藥液與培養(yǎng)基混合物；再以剩1ML藥液的5ML注射器抽取1ML蒸餾水，混合均勻后注1ML到下一試管，得10%的藥液與培養(yǎng)基的混合物。以此方法，可獲得0.3125%，0.625%，1.25%，2.5%，5%，10%，20%濃度的藥液與培養(yǎng)基的混合物，并做好標(biāo)記。再取141與142管，注入1ML蒸餾水，做好標(biāo)記，總計(jì)142支。以高壓消毒鍋進(jìn)行高溫消毒，持續(xù)15分鐘，然后置斜面等待冷卻，這樣就制成對(duì)照培養(yǎng)基與系列藥物濃度的培養(yǎng)基。將1-140管與生長對(duì)照管（141管）接種待測(cè)試的菌種，和空白對(duì)照管（142管）一起放入恒溫箱14天，恒溫箱溫度保持在25℃，觀察真菌的生長情況。

復(fù)方的試驗(yàn)方法：按照單味中藥的實(shí)驗(yàn)效果抽取5種效果最好的中藥：大風(fēng)子、川椒、皂角、地骨皮、藿香組成復(fù)方。制備藥基和接種菌種相同的單味中藥，觀察真菌的生長情況。

1.2效果判定

真菌發(fā)育迅速旺盛，記4+；真菌發(fā)育比較旺盛，但是菌落比正常偏小，記3+；真菌發(fā)育不旺盛，記2+，真菌發(fā)育緩慢，菌落較小，記1+；真菌完全不發(fā)育，記-。最小真菌完全無生長濃度就是抑制真菌生長的最低濃度。

2 結(jié)果

3討論

中藥在臨床上的應(yīng)用一般是復(fù)方制劑，因此對(duì)復(fù)方中藥進(jìn)行研究具有十分中藥的理論和實(shí)踐意義[5]。

真菌皮膚病的基本致病因素是濕、蟲、毒、熱，因?yàn)闈裥罢硿?，所以病情反?fù)，難以治愈，時(shí)間久則會(huì)瘀阻脈絡(luò)、傷津耗血，使血不榮膚。相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道中一般采用祛風(fēng)止癢、清熱燥濕、殺蟲療癬等藥物進(jìn)行治療[6]。本次試驗(yàn)采用的10種藥物就是具有上述功效的藥物。實(shí)驗(yàn)過程中，142支始終沒有真菌生長，證明實(shí)驗(yàn)過程中沒有出現(xiàn)真菌的交叉感染，141支生長始終迅速旺盛，證明菌株在培養(yǎng)基上的生長情況良好，提示測(cè)試結(jié)果可靠準(zhǔn)確。

不同藥物具有不同的真菌活性，大風(fēng)子、川椒、皂角、藿香、苦參等具有顯著的抑菌作用，而蛇床子、百部等抑菌效果較差；同一藥物對(duì)不同菌種的抗真菌活性也不相同，10種藥物對(duì)白色念珠菌的抑制效果較差。而復(fù)方組對(duì)三類真菌的抑制效果菌比較理想，優(yōu)于單味藥，最小濃度為0.625%，且對(duì)于白色念珠菌的抑制效果也比較好，最小濃度為2.5%，證明這些重要之間具有協(xié)同作用。

相信通過系統(tǒng)科學(xué)的研究，中藥抗真菌會(huì)取得新進(jìn)展。

參考文獻(xiàn)

[1]邱瑩，于騰. 20種中藥及其復(fù)方抗真菌實(shí)驗(yàn)研究[J].濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào).2007.9（3）：237-238

[2]劉靜，蔡希. 中醫(yī)藥治療手足癬的研究進(jìn)展[J].四川中醫(yī).2011.29（8）：44-45

[3]常小東，段渠，張溯，李俊儀.中藥復(fù)方外用治療手足癬研究進(jìn)展[J]. 河南中醫(yī). 2012.3（32）：390-391

[4] 錢方，葉秋華. 二大歸芷湯治療角化型手足癬臨床及實(shí)驗(yàn)研究[J].湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào). 2008.28（1）：41-42

[5] 秦麗.自擬克癬湯治療濕熱型手足癬30例療效觀察[J].工企醫(yī)刊.2008.21（5）：50-51

[6]陶茂燦，夏修蛟，曹毅.中藥復(fù)方制劑抗真菌的實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展[J].浙江臨床醫(yī)學(xué).2008.11（10）：1506-1507