劉茜茜　蔡小連　朱水源

【摘要】 目的：建立天灸巴布劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法：采用TLC 法鑒別方中白芥子、延胡索、細(xì)辛和甘遂。采用HPLC 法測定方中芥子堿硫氰酸鹽的含量。結(jié)果：TLC結(jié)果顯示與對(duì)照藥材有顏色相同的斑點(diǎn)，且分離度好、專屬性強(qiáng)，陰性對(duì)照無干擾。HPLC 測定芥子堿硫氰酸鹽在0.008096-0.4048mg/ml有較好的線性關(guān)系，平均回收率為98.43%，RSD為1.3075%，天灸巴布劑中芥子堿硫氰酸鹽的含量平均為0.5571mg/貼。結(jié)論： 所建立的質(zhì)量控制方法準(zhǔn)確、可靠、可行， 可有效控制制劑質(zhì)量。

【關(guān)鍵詞】天灸；巴布劑；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；HPLC；芥子堿硫氰酸鹽

【中圖分類號(hào)】R286.0 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B【文章編號(hào)】1004-4949（2014）04-0119-01

天灸巴布劑中藥配方源于清朝名醫(yī)張璐所著的《張氏醫(yī)通》，是治療哮喘的經(jīng)典配方。配方由白芥子、延胡索、甘遂、細(xì)辛等藥味組成，臨床上使用多將配方量下的中藥研細(xì)粉，加以現(xiàn)磨生姜汁調(diào)敷[1]。為了控制天灸巴布劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，采用薄層色譜法鑒別方中主要藥味，高效液相色譜法控制主要藥味藥含量，為天灸巴布劑深入研究提參考。

1 儀器與試劑

JA2003型電子天平（上海良平儀器儀表有限公司），Agilent1100series液相色譜系統(tǒng)；四元泵G1311，柱溫箱G1316A檢測器G1314A，超聲波清洗器（型號(hào)：KQ-300功率：300W；工作頻率：40KHz；昆山市超聲儀器有限公司），PL602-L型電子天平（梅特勒-托利多），CNY-1型初黏性測試儀（濟(jì)南蘭光機(jī)電技術(shù)有限公司），ST-1型水凝膠涂布機(jī)（溫州皓豐機(jī)械有限公司），電熱恒溫干燥箱（廣州市康恒儀器有限公司），KBS-150型數(shù)控超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)裝置（昆山市超聲儀器有限公司）；芥子堿硫氰酸鹽對(duì)照品（中檢所，批號(hào)：111702-200501）；白芥子、延胡索、細(xì)辛、甘遂藥材（均購置于佛山市中藥飲片廠有限公司）；磷酸二氫鉀溶液試劑均為色譜純，乙醇、甲醇、正丁醇、乙酸乙酯、丙酮、甲酸均為分析純；雙重蒸餾水乙腈。

2 方法與結(jié)果

2.1 白芥子薄層鑒

2.1.1 取本品1 片，剪碎，加甲醇50 mL，300 W超聲處理45 min，濾過，濾液蒸干，加水25 mL 溶解，用水飽和的正丁醇提取2 次，每次20 mL，合并正丁醇液，置水浴上蒸干，殘?jiān)蛹状? mL 使溶解，作為供試品溶液。

2.1.2取缺芥子的陰性樣品（按處方去除芥子），依2.1項(xiàng)下制成陰性對(duì)照溶液；另取芥子堿硫氰酸鹽對(duì)照品，加甲醇制成每1mL 含1 mg 的溶液，作為對(duì)照品溶液。

2.1.3 按照照薄層色譜法試驗(yàn)（附錄VIB）[2]，吸取上述3種溶液各5μL分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水（8：3：2：1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液。供試品和對(duì)照品在色譜圖相應(yīng)位置上有顏色相同的斑點(diǎn)，而陰性對(duì)照無干擾，結(jié)果見圖1。

2.1 甘遂薄層鑒定

2.2.1取本品1 片，剪碎，加乙醇50 mL，功率300 W超聲處理0. 5 h，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)右掖? mL 使溶解，作為供試品溶液。取缺甘遂的陰性樣品（按處方去除甘遂），依法制成陰性對(duì)照溶液；另取甘遂對(duì)照藥材1 g，加乙醇10 mL，同法制得對(duì)照藥材溶液。

2.2.2照薄層色譜法試驗(yàn)[2]，吸取上述3 種溶液各5 μL 分別點(diǎn)于同一硅膠G 薄層板上，以甲苯-丙酮（10：1. 2）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105 ℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品與對(duì)照藥材在色譜圖相應(yīng)位置上有相同顏色的斑點(diǎn)而陰性對(duì)照無干擾，結(jié)果見圖2。

2.2 細(xì)辛薄層鑒定

2.2.1 取本品1片，加甲醇50 mL，300W超聲處理1 h，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀芙?，乙醚萃取，揮干后，乙酸乙酯溶解為供試品溶液；取缺細(xì)辛的陰性樣品（按處方去除細(xì)辛），依法制得陰性對(duì)照溶液；另取對(duì)照藥材1 g，同法制得對(duì)照藥材溶液。

2.2.2 照薄層色譜法（附錄VIB） [2]試驗(yàn)，吸取上述3 種溶液10μL，分別點(diǎn)于同一塊硅膠G 薄層板，以正己烷-三氯甲烷-乙酸乙酯（16：3：4）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5% 香草醛硫酸，105 ℃加熱烘干顯色清晰。供試品與對(duì)照藥材在色譜相應(yīng)位置上有相同顏色斑點(diǎn)，而陰性對(duì)照無干擾，結(jié)果見圖3。

2.3 延胡索薄層鑒別

2.3.1 取本品1片，加甲醇50 mL，300W超聲處理1 h，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀芙?，加濃氨水調(diào)pH 至堿性，乙醚萃取，揮干后，甲醇溶解作為供試品溶液；取缺延胡索的陰性樣品（按處方去除延胡索），依法制得陰性對(duì)照溶液；取對(duì)照藥材粉末1 g，處理方法同供試品溶液，制成對(duì)照藥材溶液。

2.3.2 照薄層色譜法（附錄VI B）試驗(yàn)[2]，吸取上述3種溶液10μL，分別點(diǎn)于同一塊硅膠G薄層板，以甲苯-丙酮（9：2）為展開劑，展開，取出，晾干，碘蒸氣熏3 min，在紫外燈（256 nm）下顯色清晰。供試品與對(duì)照藥材在色譜相應(yīng)位置上有相同顏色熒光斑點(diǎn)，而陰性對(duì)照無干擾，結(jié)果見圖4。

2.4 芥子堿硫氰酸鹽的含量測定[3-5]

進(jìn)行對(duì)照品溶液制備、供試品溶液制備、陰性對(duì)照溶液制備，備用。通過對(duì)進(jìn)行線性關(guān)系考察、精密度試驗(yàn)、穩(wěn)定性試驗(yàn)表明內(nèi)有良好的線性關(guān)系、儀器精密度良好、供試品溶液在10 h 內(nèi)穩(wěn)定。

3 討論

含量測定的關(guān)鍵在于取樣的均勻性和完全性，由于巴布劑的基質(zhì)為高分子材料，且具有一定的黏度，還有很多附加劑及溶媒，提取精制比較困難，根據(jù)藥物特性，可容易甲醇，實(shí)驗(yàn)比較用該溶劑直接萃取，蒸餾法等都顯示，其有效成分溶出率較低，不適宜定性的標(biāo)準(zhǔn)，而通過超聲過后，利用空化效應(yīng)可以是溶劑滲透性增強(qiáng)，有效成分?jǐn)U散增加，達(dá)到比較高的提取率。最終采用本文報(bào)道的方法，通過方法學(xué)驗(yàn)證，結(jié)果穩(wěn)定可行，可作為本品的質(zhì)量控制指標(biāo)，并為其他巴布劑含量測定的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究提供參考。

參考文獻(xiàn)

[1] 李立芳.天灸[J].尋醫(yī)問藥，2011，7：28-29.

[2]中國藥典[S].一部. 2005：附錄31.

[3] 劉莉，穆曉敏，沈亦妙，等.穴敷喘平凝膠貼劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志， 2010， 16（11）：32-34.

[4] 鄧紅，區(qū)潔雯，張蜀，等.復(fù)方白芥子巴布劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J].中成藥，2010，32（5）：886-888.

[5] 張新勇，劉麗芳，徐中南，等.HPLC法測定復(fù)方止咳清肺膠囊中有效成分含量的研究[J].中國野生植物資源，2011，30（1）：61-63.