陳德錕， 陳珍珍， 劉長(zhǎng)明

福建農(nóng)林大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院，農(nóng)業(yè)部亞熱帶農(nóng)業(yè)生物災(zāi)害與治理重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室/福建省昆蟲生態(tài)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，福建 福州 350002

煙蚜Myzuspersicae(Sulzer)寄主廣泛,是煙株上的主要害蟲之一(張廣學(xué)和鐘鐵森，1983), 在我國(guó)煙區(qū)均有分布。煙蚜繭蜂AphidiusgifuensisAshmead屬膜翅Hymenoptera蚜繭蜂科Aphidiidae，是煙蚜的主要天敵，可寄生多種蚜蟲，在自然條件下的寄生率高，容易進(jìn)行人工繁殖,現(xiàn)在已被廣泛用于煙蚜的生物防治，并取得了良好的效果(畢章寶和季正端，1996; 忻亦芬，1986； 趙萬源等，1980； Fukui,1988)。

長(zhǎng)期使用殺蟲劑防治煙蚜不僅會(huì)使煙蚜產(chǎn)生抗藥性(Devonshire,1989)，而且會(huì)導(dǎo)致天敵發(fā)育畸形甚至死亡，在一定范圍內(nèi)影響煙蚜繭蜂控制害蟲的能力和自身繁殖力(劉慧平等，2006、2007； 王德森等，2012)。煙蚜繭蜂除了羽化后的成蜂在寄主體外，其他蟲態(tài)都在寄主體內(nèi)完成發(fā)育，所以殺蟲劑在殺傷寄主的同時(shí)間接地影響了繭蜂(Masonetal.，2002)。寄生蜂不同蟲態(tài)對(duì)殺蟲劑的敏感程度有所不同。朱九生等(2009)研究表明，阿維菌素對(duì)廣赤眼蜂TrichogrammaevanescensWestwood幼蟲期和卵期無影響，但在預(yù)蛹和蛹期用藥后成蜂羽化率下降，羽化后雌蜂壽命縮短；而尹可鎖等(2005)在室內(nèi)分別用除蟲菊素、高效氯氰菊酯、吡蟲啉、啶蟲脒4種殺蟲劑處理蚜繭蜂DiaeretiellarapaeMintosh蛹后，蛹的羽化率沒有顯著變化；李增梅等(2005)研究表明，多殺菌素對(duì)菜蛾絨繭蜂Cotesiaplutellae(Kurdjumov)成蜂具有高毒性。目前，有關(guān)殺蟲劑對(duì)蚜繭蜂蛹、成蟲的影響已有報(bào)道(陳家驊等，1989； 尹可鎖等，2005)，但對(duì)其在寄主體內(nèi)發(fā)育的卵、幼蟲的研究則相對(duì)較少。為此，本試驗(yàn)研究煙蚜的常用殺蟲劑對(duì)煙蚜繭蜂不同發(fā)育階段的毒性，以期為田間合理用藥及更好地協(xié)調(diào)化學(xué)防治和生物防治提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1. 1 材料

1. 1. 1 供試寄主植物 煙草種子由福建省煙草農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所提供，品種為K326，采用漂浮育苗法育苗，待長(zhǎng)至7片真葉時(shí)移至花盆和大棚中定植待用。

采用離體煙葉飼養(yǎng)煙蚜：養(yǎng)蟲盒(22 cm×14 cm×7 cm)中倒入1%瓊脂溶液，將煙葉剪成比養(yǎng)蟲盒稍小的長(zhǎng)方形，待瓊脂溶液冷卻但尚未完全凝固時(shí)將剪好的葉片鋪于其上，煙葉正面貼緊瓊脂進(jìn)行保濕。

1. 1. 2 供試蟲源 煙蚜采自福建農(nóng)林大學(xué)作物病蟲害生物防治研究所，移至養(yǎng)蟲盒并置于人工氣溫箱(寧波海曙賽福實(shí)驗(yàn)儀器廠生產(chǎn)，型號(hào)為PRX-250B)中飼養(yǎng)若干代后待用。本試驗(yàn)所用人工氣候箱條件均為(25±1) ℃、光照14L:10D、相對(duì)濕度(75±5)%。

煙蚜繭蜂飼養(yǎng)于福建農(nóng)林大學(xué)作物病蟲害生物防治研究所煙葉種植大棚；試驗(yàn)用蜂采自大棚，將煙蚜繭蜂移至人工氣溫箱中飼養(yǎng)若干代后使用。

1. 1. 3 供試藥劑 5%啶蟲脒乳油(濟(jì)南金地農(nóng)藥有限公司)、10%順式氯氰菊酯乳油(巴斯夫有限公司)、5%阿維菌素乳油(山東聯(lián)合農(nóng)藥工業(yè)有限公司)、10%吡蟲啉可濕性粉劑(青島金正農(nóng)藥有限公司)。

1. 2 試驗(yàn)方法

1. 2. 1 4種殺蟲劑對(duì)煙蚜及煙蚜繭蜂成蜂的毒性測(cè)定 試驗(yàn)參照李曉磊和劉長(zhǎng)明(2009)的蟲體浸漬法。在預(yù)試驗(yàn)的基礎(chǔ)上將農(nóng)藥稀釋成5個(gè)系列濃度，以清水作對(duì)照。選取有一定數(shù)量煙蚜的葉片放入配制好的藥液中浸泡10 s，取出后迅速用吸水紙將葉片上的藥液吸干并用細(xì)毛筆將4齡若蚜100頭挑入預(yù)先準(zhǔn)備好的煙葉(22 cm×14 cm)背面，采用1.1.1中的離體煙葉飼養(yǎng)煙蚜。蓋好養(yǎng)蟲盒以防煙蚜逃逸，置于智能人工氣候箱內(nèi)培養(yǎng)。48 h后置于體視顯微鏡下檢查死亡蟲數(shù)。用PoloPlus Version 2. 0版軟件計(jì)算48 h的LC10、LC50的毒力回歸方程。以LC10作為亞致死劑量供下列試驗(yàn)備用。

采用試管藥膜法(Liuetal.,2003) 測(cè)定殺蟲劑對(duì)煙蚜繭蜂的觸殺毒性。將供試藥劑稀釋成田間常用濃度(稀釋2000倍)，取直徑0. 9 cm、長(zhǎng)4. 0 cm的玻璃試管3支，分別倒?jié)M藥液，靜置60 s后倒出試管中的藥液。然后將試管置于通風(fēng)處晾干，每支試管接入12 h內(nèi)羽化的雌、雄煙蚜繭蜂各10頭，用小型注射器在棉團(tuán)上滴入少量的10%蜜水，并用該棉團(tuán)封好管口(蜜水一端朝向試管內(nèi)部)，放入人工氣候箱中。每組處理重復(fù)3次，以清水作為對(duì)照組，分別于處理后2、4、8、12、24 h統(tǒng)計(jì)死亡率。

參照李增梅和劉銀泉(2005)的方法測(cè)定殺蟲劑對(duì)煙蚜繭蜂的胃毒作用。將藥劑用10%蜂蜜水稀釋成田間常用濃度(4種藥劑均稀釋2000倍)，取直徑0. 9 cm、長(zhǎng)4. 0 cm的試管3支，向試管內(nèi)接入12 h內(nèi)未飼喂蜜水的雌、雄煙蚜繭蜂各10頭，用取液器取0. 5 mL藥液滴于棉花上，并用棉團(tuán)將管口封好后放入人工氣候箱中。每組處理重復(fù)3次,以飼喂10%蜂蜜水為對(duì)照組，分別于處理后2、4、8、12、24 h統(tǒng)計(jì)死亡率。

1. 2. 2 煙蚜亞致死濃度殺蟲劑對(duì)煙蚜繭蜂各蟲態(tài)的毒性 用單只雌蜂寄生單只煙蚜的方法獲取被寄生的煙蚜30頭(李增梅等，2005)，接到養(yǎng)蟲盒內(nèi)的煙葉上，在產(chǎn)卵后1、4、9 d(相應(yīng)的煙蚜繭蜂發(fā)育階段為卵、幼蟲、蛹)(趙萬源等，1980)，分別用煙蚜亞致死濃度藥液對(duì)煙葉均勻噴霧直到有液滴形成為止，再將養(yǎng)蟲盒置于人工氣候箱中。用藥后每12 h觀察1次，記錄最終僵蚜數(shù)、成蜂的羽化率及雌蜂的比例。試驗(yàn)重復(fù)3次，并設(shè)清水作為對(duì)照。

1. 3 數(shù)據(jù)處理

煙蚜繭蜂的死亡率、羽化率及雌蜂比例用SPSS 17. 0軟件處理，計(jì)算均值及標(biāo)準(zhǔn)誤，差異顯著性通過LSD進(jìn)行多重比較。

羽化率(%)=羽化蜂數(shù)僵蚜數(shù)×100

雌蜂比例=雌蜂數(shù)總蜂數(shù)

相對(duì)毒力指數(shù):選擇順式氯氰菊酯的LC50為標(biāo)準(zhǔn)藥劑，其相對(duì)毒力指數(shù)為1,其他藥劑相對(duì)毒力指數(shù)的計(jì)算公式如下：

相對(duì)毒力指數(shù)=順式氯氰菊酯LC50其他藥劑LC50

2 結(jié)果與分析

2. 1 4種殺蟲劑對(duì)煙蚜的毒力

阿維菌素對(duì)煙蚜4齡若蚜的毒力最高，LC50為1. 630 mg·L-1；其次為啶蟲脒和吡蟲啉,LC50分別為2. 717和12. 236 mg·L-1;順式氯氰菊酯對(duì)4齡若蚜毒力最低，LC50為29. 853 mg·L-1。阿維菌素和啶蟲脒的相對(duì)毒力指數(shù)較高，分別為18. 31和10. 99(表1)。

表1 殺蟲劑對(duì)煙蚜4齡若蚜的毒力Table 1 Toxicity of insecticides to 4th instar larvae of M.persicae

2.2 4種殺蟲劑對(duì)煙蚜繭蜂成蜂的觸殺和胃毒作用

各殺蟲劑在大田常用濃度處理下對(duì)煙蚜繭蜂成蜂的接觸毒性存在差異(表2)。其中，阿維菌素和啶蟲脒對(duì)煙蚜繭蜂有較大的殺傷力，24 h后致死率達(dá)到87. 78%和81. 11%；吡蟲啉對(duì)煙蚜繭蜂的毒性較低，24 h后致死率為41. 11%，但與對(duì)照比較仍存在顯著差異；順式氯氰菊酯對(duì)煙蚜繭蜂24 h后的致死率為64. 44%。隨著煙蚜繭蜂接觸藥劑時(shí)間的延長(zhǎng)，成蜂的死亡率不斷增大。

表2 殺蟲劑對(duì)煙蚜繭蜂成蜂的觸殺毒性Table 2 Contact toxicity of insecticides to adults of the parasitoid A.gifuensis

數(shù)值為平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤;同列數(shù)據(jù)后附不同小寫字母者表示在0. 05水平上差異顯著(P<0. 05)。

The data in the table are means±SE． The data in the same column followed by the different letter are significantly different at 5% level． The control mortality over 24 h was zero. All treatments are significantly different from the control.

各殺蟲劑在田間使用濃度處理下對(duì)煙蚜繭蜂成蜂的胃毒作用存在差異(表3)。2 h后順式氯氰菊酯對(duì)成蜂的胃毒作用最強(qiáng)，致死率為20%；阿維菌素和吡蟲啉對(duì)成蜂的胃毒作用較弱，致死率均為4. 44%。但24 h后阿維菌素對(duì)煙蚜繭蜂的胃毒作用最強(qiáng)，致死率達(dá)94. 44%；其次為啶蟲脒，致死率為86. 66%；順式氯氰菊酯和吡蟲啉的胃毒作用相對(duì)較弱，致死率分別為67. 78%和61. 11%。

表3 殺蟲劑對(duì)煙蚜繭蜂成蜂的胃毒作用Table 3 Stomach toxicity of insecticides to adults of the parasitoid A.gifuensis

數(shù)值為平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤;同列數(shù)據(jù)后附不同小寫字母者表示在0. 05水平上差異顯著(P<0. 05)。

The data in the table are means±SE． The data in the same column followed by the different letter are significantly different at 5% level． The control mortality over 24 h was zero. All treatments are significantly different from the control.

2.3 煙蚜亞致死濃度殺蟲劑對(duì)煙蚜繭蜂各蟲態(tài)的毒性

在煙蚜繭蜂卵期施用亞致死濃度殺蟲劑后，阿維菌素和啶蟲脒對(duì)煙蚜繭蜂成蜂羽化率的影響較大，且與對(duì)照組存在顯著差異；但吡蟲啉和順式氯氰菊酯處理后與對(duì)照相比差異不顯著。在幼蟲期施藥對(duì)煙蚜繭蜂成蜂羽化率存在影響，均顯著低于對(duì)照。在蛹期施藥對(duì)煙蚜繭蜂成蜂羽化率沒有顯著影響(表4)。

表4 4種殺蟲劑亞致死濃度對(duì)煙蚜繭蜂成蜂羽化率的影響Table 4 Emergence rate of A.gifuensis exposed to insecticides at three developmental stages

數(shù)值為平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤;同列數(shù)據(jù)后附不同小寫字母者表示在0. 05水平上差異顯著(P<0. 05)。

The data in the table are means±SE． The data in the same column followed by the different letter are significantly different at 5% level．

由表5可知，在煙蚜繭蜂卵期用4種殺蟲劑亞致死濃度處理后，其羽化后雌蟲比例與對(duì)照沒有顯著差異；在幼蟲期施藥，阿維菌素處理后的煙蚜繭蜂雌蟲比例顯著高于對(duì)照，其他3種藥劑與對(duì)照沒有顯著差異；蛹期施藥后煙蚜繭蜂雌蟲比例與對(duì)照相比差異不顯著。

表5 4種殺蟲劑亞致死濃度對(duì)煙蚜繭蜂雌蜂比例的影響Table 5 Sex ratio of emerging A.gifuensis exposed to insecticides at three developmental stages

數(shù)值為平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤;同列數(shù)據(jù)后附不同小寫字母者表示在0. 05水平上差異顯著(P<0. 05)。

The data in the table are means±SE．The data in the same column followed by the different letter are significantly different at 5% level．

3 討論

在成蜂期，煙蚜繭蜂直接接觸殺蟲劑，試驗(yàn)所用4種殺蟲劑對(duì)煙蚜繭蜂均有觸殺和胃毒作用。其中，阿維菌素的毒性最高，在田間應(yīng)盡量減少使用阿維菌素；吡蟲啉對(duì)煙蚜繭蜂的毒性相對(duì)較低，需要化學(xué)防治時(shí)可優(yōu)先考慮。殺蟲劑對(duì)煙蚜繭蜂卵期、幼蟲期的影響主要取決于其對(duì)寄主的毒性，殺蟲劑先作用于煙蚜之后才作用于其體內(nèi)的煙蚜繭蜂，阿維菌素和啶蟲脒對(duì)煙蚜的毒性較強(qiáng)，所以其對(duì)煙蚜繭蜂成蜂羽化率均有顯著影響。在煙蚜繭蜂蛹期用藥，對(duì)成蜂的羽化率、雌蜂比例均無顯著影響，可能是因?yàn)橛欣O的保護(hù)，殺蟲劑較難滲入。

李增梅和劉銀泉(2005)研究表明，阿維菌素對(duì)菜蛾絨繭蜂成蜂具有較高的安全性，這與本試驗(yàn)結(jié)果存在差異，可能是因?yàn)?種繭蜂對(duì)阿維菌素的敏感度不一樣。尹可鎖等(2005)研究表明，吡蟲啉對(duì)蚜繭蜂毒性較低，與本試驗(yàn)結(jié)果一致；但3%啶蟲脒對(duì)蚜繭蜂毒性也較低，與本試驗(yàn)結(jié)果不同，可能是所用啶蟲脒有效成分含量不同所致；在蛹期施藥對(duì)蚜繭蜂的羽化率均沒有影響，與本研究一致。本試驗(yàn)在室內(nèi)條件下進(jìn)行，這與田間自然條件有一定的差異，因而關(guān)于殺蟲劑在田間對(duì)煙蚜繭蜂的毒性還需進(jìn)一步研究。

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