許福亮，王云海，張 霞

(山東濰坊醫(yī)學院附屬醫(yī)院 檢驗科 山東省十二五高校重點實驗室,261031)

抗磷脂抗體綜合征(ASP)是常見的疾病，易引起習慣性流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎等癥狀。臨床上，依賴病人表現(xiàn)和磷脂抗體(aPL)來確診。aPL有多種，其中最重要、最具代表性的aPL是抗心磷脂抗體(aCL)和抗β2-糖蛋白1 (β2-GP1)抗體。

1 材料和方法

1.1研究對象

1.1.1 生育障礙組(患者組)：來源于本院就診，有習慣性流產(chǎn)病人536例，懷孕后出現(xiàn)胎停育或死胎患者64例，婚后多年未孕患者208例，共808例。年齡22歲-48歲。

1.1.2 懷孕婦女(對照組)：孕期2周-36周，120例，年齡23歲-38歲。

1.1.3 未懷孕或已順利生產(chǎn)的育齡婦女(正常組)：65例，健康。已生產(chǎn)者：足月、順利分娩。年齡：24-39歲。

1.2方法

1.2.1 標本采集 空腹抽血2-3 ml，待血液凝固后，3 000 rpm 10 min，分離血清后，將血清-30℃保存?zhèn)溆茫?周內(nèi)檢測。

1.2.2標本檢測aCL測定(IgA/G/M)將稀釋后的待測血清、標準品、陰性和陽性對照各100 μl分別加入相應的微孔內(nèi)，37℃溫育30 min。洗板后上述每孔各加100 μl酶標結(jié)合物，同上條件溫育、洗滌后，每孔各加100 μl色原/底物液，避光顯色15 min。每孔加100 μl終止液，450 nm波長比色。

以標準品濃度為橫坐標，以吸光度值為縱坐標畫曲線，各標本的濃度可以從曲線上查出。

抗β2-GP1抗體檢測(IgA/G/M) 操作同上述，同樣繪制曲線后，根據(jù)各自的光密度值查得各標本抗β2-GP1抗體濃度。

2 結(jié)果

aCL和抗β2-GP1抗體測定結(jié)果見表1。

表1 aCL和抗β2-GP1抗體各組測定值

患者組與對照組或正常組比較差異明顯(P<0.05)，對照組與正常組比較，兩種抗體濃度無差異(P>0.05)。

aCL、抗β2-GP1抗體和兩者相加后在不同組的陽性率見表2。

表2 aCL、抗β2-GP1抗體和兩者之和在不同組的陽性率

患者組aCL、抗β2-GP1抗體和兩者之和的陽性率顯著高于對照組或正常組(P<0.01)；對照組和正常組兩種抗體陽性率比較無明顯差異(P>0.05)

3 討論

抗磷脂抗體綜合征(antiphospholipid syndrome,APS)是一種抗體介導的非炎癥性自身免疫性疾病。臨床上以動靜脈血栓形成、習慣性流產(chǎn)和血小板減少等癥狀為表現(xiàn)。血液中抗磷脂抗體(antiphospholipid antibodies,aPL)升高是其主要特征之一?？沽字贵w(aPL)是一族主要針對磷脂結(jié)合蛋白的異質(zhì)性抗體,是一組針對血小板和內(nèi)皮細胞膜上的磷脂結(jié)構(gòu)抗原物質(zhì)的自身抗體。aCL和抗β2-GP1抗體是其中重要的aPL[1]。

正常情況下，帶有負電荷的心磷脂抗原(心肌、子宮居多)位于細胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)層，不被免疫系統(tǒng)識別。在某種因素作用下，抗原暴露或進入血循環(huán)，刺激機體產(chǎn)生aCL。aCL與內(nèi)皮細胞或血小板膜上的磷脂結(jié)合，直接造成血管內(nèi)皮細胞損傷。通過作用于胎盤血管內(nèi)皮細胞的膜磷脂，使前列環(huán)素合成釋放減少，干擾血栓降解素及纖維蛋白溶酶系統(tǒng)活性的釋放，影響蛋白系統(tǒng)的活化等多種病理機制，導致血流緩慢、血栓形成和滋養(yǎng)層細胞功能改變，形成胎盤梗死，胎兒宮內(nèi)發(fā)育遲緩，胎死宮內(nèi)，進而發(fā)生流產(chǎn)。本室檢測結(jié)果，患者組aCL測定值22.1±6.2 RU/ml，較對照組14.0±4.3 RU/ml或正常組10.2±4.5RU/ml有明顯差別(P<0.05)，其陽性率(12.8%)較后兩者(分別是3.3%和3.0%)差異顯著(P<0.01)，與資料報道一致但數(shù)值稍低[2-5]。

在β2-GP1刺激下產(chǎn)生的抗β2-GP1抗體在aPL和磷脂的結(jié)合中發(fā)揮著重要角色，一方面是誘導內(nèi)皮細胞的激活從而形成容易發(fā)生血栓的促炎性狀態(tài)，另一方面同時干擾β2-GP1對VWF依賴的血小板凝集的抑制作用，抗β2-GP1抗體與β2-GP1結(jié)合后，β2-GP1失去了原有的抗凝作用易形成血栓?？功?-GP1抗體在β2-GP1介導下結(jié)合到細胞膜/磷脂膜上，導致細胞損傷[6]，血管內(nèi)皮受損。抗β2-GP1抗體和β2-GP1結(jié)合后，可干擾抗凝血系統(tǒng)活化蛋白C的抗凝作用，活化血管內(nèi)皮細胞及血液單核細胞，表達各種促凝物質(zhì)，促進血小板粘附和血栓形成并且抑制內(nèi)皮細胞前列腺素的合成釋放[7]?？功?-GP1抗體和β2-GP1形成復合物后，β2-GP1表面結(jié)構(gòu)改變而出現(xiàn)被aCL識別的表位，從而發(fā)生反應；另一方面，aCL包括與β2-GP1結(jié)合的和不結(jié)合的，而后者與血栓的相關(guān)性不大，且容易出現(xiàn)假陽性，因此檢測抗β2-GP1抗體較aCL更特異。本室檢測結(jié)果，患者組抗β2-GP1抗體測定值14.6±4.8 u/ml，較對照組6.2±2.6 u/ml或正常組4.2±2.2 u/ml有明顯差異(P<0.05)，其陽性率(7.9%)較后兩者(分別是2.5%和3.0%)差異明顯(P<0.05),類似相關(guān)報道[4,8-10]。

aCL和抗β2-GP1抗體聯(lián)合陽性與血栓發(fā)生的相關(guān)性高[11]，同時檢測這兩種抗體，可提高診斷APS的陽性率，可達16.1%[4]，減少了漏診,利于抗磷脂抗體綜合征的診斷[7]。對于aCL和抗β2-GP1抗體這兩種抗體的亞型，IgG相關(guān)性大于IgM。抗體濃度較低時，大多由IgM引起，較高時，大多由IgG所致。

生育障礙患者，aCL和抗β2-GP1抗體水平升高，血液處于高凝狀態(tài)，血流緩慢甚至局部有微血栓形成，導致流產(chǎn)。患者組抗體陽性率高，血漿抗體含量高。對照病例中有2例抗體濃度高，接近正常值的2倍(正常值：aCL<12RU/ml,抗β2-GP1抗體<5u/ml),隨訪發(fā)現(xiàn)，有1例35周分娩，比正常早5周。正常組中，有2例抗體含量在正常值的1.5倍至2.0倍間，未隨訪到底，這有可能以后出現(xiàn)生育方面的問題。對于已確診、因磷脂抗體高而不孕的婦女，隨治療的好轉(zhuǎn)，抗體水平逐漸下降，有的已懷孕，未出現(xiàn)不良征兆，有望順利分娩。

aCL和抗β2-GP1抗體檢測的臨床意義，不僅在于它是APS的診斷標準之一，更重要的是對導致不孕的原因進行干預、控制。育齡期婦女，早期和動態(tài)檢測aCL和抗β2-GP1抗體可及時發(fā)現(xiàn)危險因素，預防疾病的發(fā)生。

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