郭春霞 任擁軍 郭海榮

·臨床研究·

孕產(chǎn)婦HBV-DNA與乙型肝炎血清學(xué)標(biāo)志物的相關(guān)性分析

郭春霞 任擁軍 郭海榮

乙型肝炎血清學(xué)標(biāo)志物；孕婦；HBV-DNA；酶聯(lián)免疫吸附法；實(shí)時(shí)熒光定量PCR；相關(guān)性

長(zhǎng)期以來(lái)，我國(guó)人群一直呈乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)高感染率，約有1.3億人感染[1]。1979年全國(guó)性的大人群抽樣調(diào)查及以后陸續(xù)的小范圍調(diào)查顯示HBsAg 陽(yáng)性檢出率為9.09%～10%。孕產(chǎn)婦HBsAg 陽(yáng)性檢出率為11.2%～12.5%。我國(guó)每年約有72～80萬(wàn)名孕產(chǎn)婦婦攜帶HBV。因此，這些孕產(chǎn)婦的孕期保健和母嬰阻斷值得關(guān)注。目前乙肝的診斷主要依賴(lài)于血清標(biāo)志物和HBV-DNA水平的檢測(cè)。血清HBV-DNA水平對(duì)于臨床分析判斷病情，監(jiān)測(cè)抗病毒治療效果，估計(jì)急慢性乙肝感染的預(yù)后，是可靠的指標(biāo)。乙型肝炎病毒標(biāo)志物的檢測(cè)多采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)。該方法快速簡(jiǎn)便，試劑穩(wěn)定期長(zhǎng)，測(cè)試成本低[2]。本文用ELISA檢測(cè)患者血清HBsAg、HBeAg、抗HBe，抗HBc，并與HBV-DNA的定量進(jìn)行比較，以探討他們之間的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料 篩選收集2011年1月至2012年6月在石家莊婦幼保健院分娩的HBsAg 陽(yáng)性的1 012例產(chǎn)婦的血清標(biāo)本。產(chǎn)婦初檢HBsAg陽(yáng)性，肝腎功能正常，甲、丙、丁、戊型肝炎系列檢查陰性，年齡22～35歲。

1.2 檢測(cè)方法和儀器 酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)患者血清中的乙型肝炎血清學(xué)標(biāo)志物(HBsAg，抗HBs，HBeAg，抗HBe，抗HBc)。試劑盒：珠海麗珠生物工程股份有限公司提供。按試劑盒說(shuō)明書(shū)操作，用鄭州安圖酶標(biāo)儀測(cè)定記錄結(jié)果。實(shí)時(shí)熒光定量PCR(read time PCR,PT-PCR)技術(shù)檢測(cè)患者血清中的HBV-DNA。儀器名稱(chēng)Line-Gene(Read-Time PCR Detection System)。 試劑盒由珠海麗珠生物工程股份有限公司提供。檢測(cè)范圍(5×10-1.0*108)。

1.3 結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn) 血清學(xué)標(biāo)志物HBsAg、 HBeAg、 抗HBs的陰性結(jié)果為：樣品A值<臨界值(C.O.)，陽(yáng)性結(jié)果為：樣品A值≥臨界值(C.O.)。血清學(xué)標(biāo)志物抗HBe、抗HBc陽(yáng)性結(jié)果為：樣品A值<臨界值(C.O)，陰性結(jié)果為：樣品A值≥臨界值(C.O.)。

2 結(jié)果

HBsAg 陽(yáng)性+HBeAg 陽(yáng)性+ 抗HBc陽(yáng)性和HBsAg陽(yáng)性+HBeAg陽(yáng)性一組的HBV_DNA陽(yáng)性率(99%) 顯著高于HBsAg 陽(yáng)性 + 抗HBe 陽(yáng)性+抗HB c 陽(yáng)性和HBsAg陽(yáng)性+抗HBc陽(yáng)性一組的陽(yáng)性率(20%)(P<0.01)。而且HBeAg 陽(yáng)性一組的病毒載量集中在高拷貝區(qū)。但HBeAg 陽(yáng)性一組中仍有1%的陰性率。見(jiàn)表1。

表1 HBeAg 陽(yáng)性和HBeAg陰性2組HBV_DNA定量與乙型肝炎血清學(xué)標(biāo)志物

3 討論

乙型病毒性肝炎是我國(guó)常見(jiàn)的傳染病,其傳染性和病死率均居高不下,嚴(yán)重危害人們的健康[3]。乙肝病毒血清標(biāo)志物檢測(cè)因操作簡(jiǎn)便，價(jià)格便宜，是目前診斷乙型肝炎最常用的指標(biāo),即俗稱(chēng)的“兩對(duì)半”,主要反映人體對(duì)HBV的免疫反應(yīng)狀態(tài)。用ELISA檢測(cè)HBV標(biāo)志物只能反應(yīng)病毒入侵人體的信息,不能直接反映HBV在患者體內(nèi)的復(fù)制情況,也不能作為判斷患者是否具有傳染性的直接證據(jù)[4]。HBV-DNA定量檢測(cè)是病毒復(fù)制最直接可靠的指標(biāo)，但由于HBV-DNA水平的檢測(cè)價(jià)格昂貴，對(duì)實(shí)驗(yàn)室要求也較高，在我國(guó)很多地區(qū)還不能常規(guī)開(kāi)展。乙肝病毒母嬰傳播是我國(guó)及其他亞洲國(guó)家病毒感染最主要的傳播途徑，大多數(shù)研究表明HBsAg、HBeAg及HBV-DNA載量是影響母嬰傳播的主要因素。所以了解血清標(biāo)志物及HBV-DNA載量，分析二者之間的關(guān)系，有助于今后對(duì)HBsAg 陽(yáng)性孕婦進(jìn)行快速監(jiān)測(cè)，以便采取合理有效的母嬰阻斷策略[5]。

本研究通過(guò)對(duì)2011年1月至2012年6月在石家莊婦幼保健院分娩的、表面抗原陽(yáng)性的1 090例產(chǎn)婦的血清標(biāo)本，同時(shí)采用ELISA檢測(cè)乙型肝炎血清學(xué)標(biāo)志物和實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)HBV-DNA。結(jié)果顯示HBsAg 陽(yáng)性+HBeAg 陽(yáng)性+ 抗HBc陽(yáng)性和HBsAg 陽(yáng)性+HBeAg 陽(yáng)性一組的陽(yáng)性率(99%)，大于HBsAg 陽(yáng)性 + 抗HBe 陰性+HBc陽(yáng)性和HBsAg 陽(yáng)性+HBc陽(yáng)性一組的陽(yáng)性率(20%)(P<0.01)。并且，HBeAg 陽(yáng)性一組的病毒載量集中在高拷貝區(qū)。但HBeAg 陽(yáng)性一組中仍有1%的陰性率。HBeAg 陽(yáng)性是反映病毒復(fù)制的良好指標(biāo)，但僅依靠乙型肝炎血清學(xué)標(biāo)志物檢

測(cè)結(jié)果不能準(zhǔn)確的判斷HBV病毒復(fù)制的程度及傳染性的強(qiáng)弱。隨著醫(yī)學(xué)的發(fā)展及檢驗(yàn)技術(shù)的不斷提高，為了減少或避免漏檢誤診，貽誤治療，二者聯(lián)合檢測(cè)才能更好的給臨床提供準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)，更全面地反映HBV感染、復(fù)制、傳染性和療效評(píng)估，更有利于母嬰阻斷的治療。

1 李金明主編.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù).第1版.北京：人民軍醫(yī)出版社，2009.190.

2 王功遂，王曼曼，明朗，等．HBeAg定量在慢性乙型肝炎診斷和治療中的價(jià)值.中華傳染病雜志,2004,22：255-258.

3 揚(yáng)廣輝，譚明德，謝玉桃，等.干擾素及拉米夫定抗乙型肝炎病毒的體外實(shí)驗(yàn)研究.疾病控制雜志,2004,8:209-212.

4 程鋼，何蘊(yùn)韶，周新宇.熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)乙型肝炎病毒.中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志,1999,22:135.

5 陸向東，孫翔，翟祥軍，等.HBsAg陽(yáng)性孕婦HBsAg、HBeAg和HBV-DNA關(guān)系探討.江蘇預(yù)防醫(yī)學(xué),2012,23：3.

10.3969/j.issn.1002-7386.2014.16.046

050011 河北省石家莊市婦幼保健院檢驗(yàn)科

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1002-7386(2014)16-2506-02

2014-03-19)