趙峻

我院MRSA、MRCNS及產(chǎn)ESBLs酶腸桿科菌檢出率變遷

趙峻

目的 了解本院耐甲氧西林的金黃色葡萄球菌(MRSA)、耐甲氧西林的凝固酶陰性的葡萄球菌(MRCNS)及產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)的產(chǎn)酸克雷伯菌、大腸埃希氏菌、肺炎克雷伯菌檢出情況的變化, 為合理應(yīng)用抗菌藥物提供依據(jù)。方法 統(tǒng)計(jì)分析MRSA菌、MRCNS菌及產(chǎn)酸克雷伯菌、大腸埃希氏菌、肺炎克雷伯菌中產(chǎn)ESBLs酶的菌株。結(jié)果 2013年MRSA檢出率與2012年檢出率相比明顯下降, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；2012、2013年MRCNS、產(chǎn)酸克雷伯菌、大腸埃希氏菌、肺炎克雷伯菌株數(shù)中ESBLs酶陽(yáng)性菌檢出率之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。結(jié)論 根據(jù)病原菌分布及特殊病原菌的情況, 協(xié)助臨床醫(yī)師參考病原菌分布、藥敏情況等制定個(gè)體化治療方案, 控制和減少耐藥細(xì)菌的產(chǎn)生。

耐甲氧西林的金黃色葡萄球菌；耐甲氧西林的凝固酶陰性的葡萄球菌；產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶

近年來(lái), 關(guān)于MRSA、MRCNS及ESBLs的腸桿菌的出現(xiàn)引起人們的廣泛關(guān)注。現(xiàn)將本院2012、2013年以上病原菌分布及耐藥性的變遷報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 菌株來(lái)源 對(duì)2012年本院各臨床科室送檢的標(biāo)本(包括血液、痰液、中端尿、陰道分泌物、支氣管鏡灌洗液、引流物、腦脊液等)11065份, 2013年本院各臨床科室送檢標(biāo)本9990份進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)。標(biāo)本送檢和保存參照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》(第3版)。分析結(jié)果時(shí)剔除同一患者重復(fù)菌株, 非無(wú)菌部位標(biāo)本(如痰液)只收集感染標(biāo)本菌株。

1.2 儀器和試劑 法國(guó)生物梅里埃公司VITEK32全自動(dòng)微生物分析儀及其配套的鑒定板和藥敏板, 以及頭孢西丁藥敏藥片。

1.3 細(xì)菌培養(yǎng)、鑒定及藥敏檢驗(yàn) 標(biāo)本接種和培養(yǎng)參照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》(第3版)進(jìn)行, 細(xì)菌的鑒定采用VITEK32微生物分析儀, 藥敏試驗(yàn)采用VITEK32微生物分析儀配套的藥敏板。

1.4 MRSA、MRCNS的檢測(cè) 采用VITEK32分析儀分析結(jié)果,配套藥敏卡鑒定為MRSA 和MRCNS的菌株再用頭孢西丁藥敏紙片做K-B法藥敏, 以抑菌圈20 cm確定為MRSA和MRCNS。

1.5 產(chǎn)ESBLs酶的腸桿菌科細(xì)菌的檢測(cè) 根據(jù)本院以往細(xì)菌流行情況, 選擇主要腸桿科細(xì)菌產(chǎn)酸克雷伯菌、大腸埃希氏菌、肺炎克雷伯菌。統(tǒng)計(jì)這3類(lèi)細(xì)菌的ESBLs陽(yáng)性情況。ESBLs酶陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)：采用CLSI推薦的表型篩選試驗(yàn)和驗(yàn)證試驗(yàn)進(jìn)行。

1.6 質(zhì)控細(xì)菌 金黃色葡萄球菌ATCC25923, ATCC43300；表皮葡萄球菌ATCC12228；大腸埃希菌ATCC25922, ATCC 35218；肺炎克雷伯菌ATCC700603.均購(gòu)自衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 收集2012年和2013年凝固酶陽(yáng)性葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌、產(chǎn)酸克雷伯菌、大腸埃希氏菌、肺炎克雷伯菌株數(shù), 統(tǒng)計(jì)MRSA、MRCNS、3種腸桿菌科細(xì)菌中ESBLs酶陽(yáng)性菌株數(shù)、檢出率。兩組之間采用χ2檢驗(yàn), P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 本院2012、2013年MRSA檢出率比較, P＜0.05, MRCNS檢出率的比較, P＞0.05, 見(jiàn)表1, 表2。

2.2 本院2012、2013年產(chǎn)酸克雷伯菌、大腸埃希氏菌、肺炎克雷伯菌中產(chǎn)ESBLs酶陽(yáng)性菌檢出率的比較P＞0.05。見(jiàn)表3, 表4, 表5。

3 討論

表1 2012 、2013年MRSA檢出率的比較

表2 2012、2013年MRCNS檢出率的比較

表3 2012、2013年產(chǎn)酸克雷伯菌中產(chǎn)ESBLs酶陽(yáng)性菌檢出率的比較

表4 2012、2013年大腸埃希氏菌中產(chǎn)檢出率的比較

表5 2012、2013年肺炎克雷伯菌中產(chǎn)ESBLs酶陽(yáng)性菌檢出率的比較

本院2012年共分離出致病菌2431株, 2013年共分離出2252株。主要致病菌2年內(nèi)變化不大, 多見(jiàn)克雷伯菌屬、埃希氏菌屬、假單胞菌屬、葡萄球菌屬、念珠菌屬。中段尿中檢出多見(jiàn)大腸埃希菌、陰道分泌物多見(jiàn)表皮葡萄球菌、金黃色葡萄球菌；痰液分泌物培養(yǎng)多見(jiàn)肺炎克雷伯菌、大腸埃希菌；血液培養(yǎng)多見(jiàn)大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌；分泌物培養(yǎng)多見(jiàn)金黃色葡萄球菌。

1961年Jevons在英國(guó)首次發(fā)現(xiàn)MRSA, 70年代末MRSA急劇增多遍及全球, 耐藥范圍日益擴(kuò)大, 耐藥程度也日益嚴(yán)重。80年代后期已成為全球性的病原微生物, 居醫(yī)院感染病原菌的首位［1］。MRSA的耐藥機(jī)制很復(fù)雜, 主要包括染色體介導(dǎo)的固有耐藥和通過(guò)質(zhì)粒轉(zhuǎn)移獲得的耐藥、基因表達(dá)調(diào)控有關(guān)的耐藥和主動(dòng)外排系統(tǒng)等。mecA基因是MRSA特有的耐藥基因, 在細(xì)菌耐藥性中起決定性作用［2］。其他與MRSA 產(chǎn)生的基因還包括vanA基因, 該基因在金黃色葡萄球菌對(duì)萬(wàn)古霉素的耐藥起重要作用［3］。由表1可以看出本院MRSA檢出情況2013年較2012年相比明顯下降, 可能與本院抗菌藥物專(zhuān)項(xiàng)治理活動(dòng)開(kāi)展有關(guān)。

凝固酶陰性的葡萄球菌(CNS)多為非致病菌, 當(dāng)人體免疫力下降或CNS遷移到非正常寄居部位就會(huì)產(chǎn)生感染,成為人體常見(jiàn)的條件致病菌［4］。醫(yī)療侵襲性操作及呼吸機(jī)使用的因素使CNS成為引發(fā)院內(nèi)感染的常見(jiàn)菌之一。醫(yī)務(wù)人員帶菌率可高達(dá)70%以上, 是醫(yī)院內(nèi)交叉感染的的重要來(lái)源［5］。由表2可以看出本院MRCNS近2年來(lái)檢出率高達(dá)50%以上,開(kāi)展抗菌藥物專(zhuān)項(xiàng)治理活動(dòng)以來(lái), MRCNS檢出率并沒(méi)有明顯下降。MRCNS所攜帶的mecA 基因還能傳給敏感的金黃色葡萄球菌, 導(dǎo)致MRSA的流行。因此, 高M(jìn)RCNS的檢出率應(yīng)引起廣泛關(guān)注。

1983年首先發(fā)現(xiàn)產(chǎn)ESBLs的肺炎克雷伯菌和沙雷菌屬,此后世界各地均發(fā)現(xiàn)產(chǎn)ESBLs細(xì)菌, 各地的檢出率差別較大。ESBLs由質(zhì)粒介導(dǎo), 易在同種屬甚至不同種屬細(xì)菌間傳遞造成爆發(fā)流行, 產(chǎn)ESBLs細(xì)菌對(duì)青霉素類(lèi)、頭孢菌素類(lèi)和氨曲南的耐藥率均較高, 酶抑制劑能顯著提高β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗菌藥物對(duì)產(chǎn)ESBLs細(xì)菌的敏感率, 所以β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗菌藥物和酶抑制劑合劑是治療產(chǎn)ESBLs細(xì)菌的有效藥物［6］。但藥敏結(jié)果中發(fā)現(xiàn)相當(dāng)一部分ESBLs陽(yáng)性菌對(duì)β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗菌藥物和酶抑制劑合劑耐藥, 考慮其原因可能為長(zhǎng)期應(yīng)用酶抑制劑治療使細(xì)菌對(duì)酶抑制劑敏感型下降或細(xì)菌高產(chǎn) AmpC酶所致。由表3、表4、表5中可以看出近2年來(lái)本院ESBLs陽(yáng)性菌檢出率變化不大。大腸埃希氏菌中ESBLs陽(yáng)性菌株率較高。因此在治療此類(lèi)細(xì)菌感染時(shí)應(yīng)更加合理選擇抗菌藥物。藥敏結(jié)果中還發(fā)現(xiàn)產(chǎn)ESBLs菌不僅對(duì)頭孢菌素類(lèi)和青霉素類(lèi)有較高耐藥率, 對(duì)氨基糖苷類(lèi)、磺胺類(lèi)、喹諾酮類(lèi)也有較高耐藥率?？紤] ESBLs質(zhì)粒上可能同時(shí)攜帶對(duì)氨基糖苷類(lèi)、磺胺類(lèi)和喹諾酮類(lèi)抗菌藥物的耐藥基因有關(guān)。

定期統(tǒng)計(jì)分析病原菌分布及特殊病原菌的情況, 使臨床醫(yī)師能夠根據(jù)病原菌分布、藥敏情況等制定個(gè)體化治療方案, 避免抗菌藥物濫用, 控制和減少超級(jí)耐藥的產(chǎn)生。

［1］ 楊長(zhǎng)順, 劉文恩.MRSA耐藥機(jī)制與分子生物學(xué)檢測(cè)方法研究新進(jìn)展.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志, 2007, 17(3):356-358.

［2］ Lee JH.Occurrence of methicillin-resistant Staphylococcus aureus strains from cattle and chicken, and analyses of their mecA, mecR 1 and mecI genes.Vet Microbiol, 2005(17):1-5.

［3］ Clark N C, Weigel LM , Patel JB, et al.Comparison of Tn 1546 -like elements in vancomycin - resistant Staphylococcus aureus isolates from Michigan and Pennsylvania.Antimicrob Agens Chemother , 2005, 49(1):470-472.

［4］ 孫秋林, 李家斌, 李慧.2004年葡萄球?qū)賹?duì)12種抗菌藥物的耐藥性.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志, 2006, 16(10):1164-1165.

［5］ 劉蓬蓬.新生兒敗血癥耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌的檢測(cè).青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào), 2001, 37(4):327-328.

［6］ 張曉兵, 府偉靈, 廖揚(yáng), 等.臨床產(chǎn)ESBLs細(xì)菌的耐藥特征和基因分型研究.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志, 2005, 15(4):386-389.

2014-05-30］

450000 鄭州大學(xué)第五附屬醫(yī)院藥學(xué)部